确定热水洗涤的病毒消毒效果

该协议测试热水洗涤的消毒效果。它可以帮助评估洗衣机和烘干机是否适合清洁被病毒污染的衣服。这种洗涤技术的主要优点是，它可以使用经过质量保证过程的程序在其他实验室中以较小的规模复制。

微生物学家Ahmed Abdel-Hady，研究科学家Mariela Monge和Jonathan Sawyer以及我们实验室的其他人将展示该程序。首先，通过将成分在去离子水中称重并混合来制备改性胰蛋白酶大豆琼脂，如文本中所述。然后，向软琼脂中加入一毫升未稀释的浓缩 Phi6 等分试样和 100 微升对数期丁香假单胞菌培养物。

接下来，将软琼脂倒在直径为100毫米的固化改性胰蛋白酶大豆琼脂平板的表面上。通过轻轻旋转平板并将软琼脂均匀分布在固体琼脂表面上来防止气泡或溢出。在室温下孵育过夜后，用无菌细胞扩散器轻轻刮取三个板的内容物到含有15毫升SM缓冲液的无菌50毫升编年史管中。

以最大设置涡旋试管一至两分钟以打破琼脂，然后以7， 000倍G离心15分钟，然后收集上清液并通过0.2微米注射器过滤器过滤。将过滤后的上清液作为一毫升等分试样储存在80摄氏度的冷冻管中，直到进一步使用。通过测量和记录不同位置未清洗的个人防护设备或个人防护装备物品的长度和宽度，进行测试前视觉评估。

对于接种，通过将一克牛肉提取物溶解在总体积为10毫升的1X PBS中来制备10%牛肉提取物溶液。过滤器使用0.2微米注射器过滤器对溶液的整个体积进行灭菌。接下来在生物安全柜内，通过将 10 微升量的溶液作为多个液滴移液到 PPE 项目上并使用移液管的尖端将液滴扩散到每个样品中，用大约 10 到 7 个斑块形成单元接种测试和阳性对照试样。

使用热板和搅拌棒将洗涤溶液加热至 50 摄氏度。然后测量并记录洗涤溶液的pH和温度，并收集10毫升溶液进行无菌检查。然后，将 3.25 升洗涤溶液倒入无菌洗衣机中。

将个人防护用品、一个接种过的面罩和四个没有优惠券的未受污染的薄膜口罩放入洗衣机中。清洗PPE物品18分钟后，排干洗衣机，每次用5升室温自来水冲洗三次以去除泡沫。将 3.25 升室温灭菌的自来水加入洗衣机中，并进行长达 9 分钟的冲洗循环。

接下来，将PPE物品移入洗衣机旋转侧旋转五分钟。在烘干机中以 93 摄氏度的高温设置将 PPE 物品干燥 80 分钟。然后将个人防护装备物品从烘干机移至无菌工作区。

无菌地从接种的物品中取出优惠券，并将其放入锥形管中。接下来，通过在设备的最大设置下涡旋两分钟，将优惠券提取在 10 毫升 10%Dey-Engley 中和肉汤中。要使用传统的软顶琼脂覆盖方法将提取物铺板，将测试样品等分试样添加到含有6毫升软琼脂和100微升对数相P丁香的软琼脂管中。

接下来，将软琼脂倒在固化的改性胰蛋白酶大豆琼脂平板的表面上，并通过旋转平板将软琼脂均匀地分布在固体琼脂表面上。在室温下孵育过夜后，手动枚举每个板上的平台单元。评估全尺寸个人防护装备或衣物病毒消毒洗涤效果的系统实验室测试表明，平台单元或PFU板计数和提取的样品体积能够计算每个测试优惠券的平台单元数量。

通过面罩试验获得具有代表性的病毒回收结果。洗涤测试提供了有关材料特性的信息，例如服装物品的拉伸或收缩以及协议的质量控制数据。热水洗涤在消毒 Phi6 的面罩、牛仔布和擦洗 PPE 材料方面的功效在此图中得到证明，其中星星表示完全消毒。

在整个过程中使用无菌技术以防止交叉污染非常重要。此外，试样的接种干燥时间对于每种材料都是唯一的，并在测试前确定。其他免费方法包括显微镜和液体渗透测试，以探索材料降解或进一步的尺寸评估，以确保屏障保护仍然适合佩戴者。

该技术为扩大全尺寸服装和个人防护装备的洗涤效果和材料测试奠定了基础。它还可以帮助在另一次传染事件或大流行期间建立有效的洗钱程序。