球后窦注射对出生后、幼年和发育成年小鼠的全身治疗

我们的研究涉及罕见遗传疾病的基因疗法的开发，特别是专注于一组称为有机酸血症的代谢紊乱。我们研究的目标是确定哪些方法可能最适合进行人体临床试验。多种基因疗法被批准用于治疗各种遗传疾病，这在十年前是不可能的。

事实上，几项针对有机酸血症的基因治疗临床试验已经完成、正在进行或计划中。全身递送到严重遗传病的镜像模型可能具有挑战性，因为小鼠可能无法达到成年大小。这种球后注射方案将允许在具有严重表型的镜像模型中测试基因疗法，并有望为患者开发新的疗法。

首先，每次注射时，在无菌 1.5 mL微量离心管中用无菌 PBS 将 AAV 稀释至所需的注射体积和浓度。在填充一次性无菌注射器之前，上下移动柱塞数次，以确保柱塞可以顺利按下。然后将注射器填充至所需体积，确保没有气泡。

如果是右撇子，将麻醉的鼠标放在左侧，鼻子指向右手以注射右眼。然后，将一两滴眼药剂滴在要注射的眼球上。使用无菌吸收纱布垫去除任何多余的眼科麻醉液。

用指尖轻轻按压眼睛的皮肤、背侧和腹侧，使鼠标的眼球部分从眼窝中伸出。现在，将针头斜面以 30 度角向下插入内眦。缓慢而平稳地对注射器柱塞施加压力以输送注射液。

最后，从鼠标上取下面罩，以防止从麻醉中恢复。在肝细胞中观察到甲基丙二酰辅酶 A 变位酶 RNA 的表达，表明球后注射成功。