我们的研究目标是建立强大的技术来生成源自成年牛小肠和大肠类器官的主要肠道单层界面。我们采用多模态分析方法来确认已建立的单层内功能性上皮屏障的形成。与三维模型不同,2D 单层提供了一个暴露的、可接近的管腔表面,这对于研究宿主病原体相互作用至关重要。
这些反映具有多个细胞谱系的体内肠道的单层细胞现在为研究特定肠道切片(如小肠壁龛和大肠壁龛)中的病原体提供了量身定制的方案。我们的研究确定了优化的培养条件,以从牛商场和大肠类器官的细胞中创建和维持 2D 单层。我们使用跨上皮电登记剂和细胞旁通透性测定以及免疫细胞化学染色技术证实了这些单层内功能性上皮屏障的形成。
我们的方案通过关注缺乏肠道类器官衍生的牛单层模型来解决研究空白。这些模型已在小鼠和人类中进行了充分研究,但是,牛是具有严重公共卫生影响的肠道病原体的主要宿主,尚未得到充分探索。我们的研究建立并表征了 2D 牛单层培养系统。
这种创新工具允许探索牛肠道生理学的正常和疾病状态,其潜在应用可扩展到具有公共卫生意义的生物医学和转化研究。