Progrès de la technologie des organoïdes bovins utilisant des interfaces monocouches de l’intestin grêle et du gros intestin

Notre objectif de recherche est d’établir des techniques robustes pour générer des interfaces monocouches intestinales de base dérivées d’organoïdes intestinaux grêles et grands bovins adultes. Nous avons utilisé une approche analytique multimodale pour confirmer la formation d’une barrière épithéliale fonctionnelle au sein des monocouches établies. Contrairement aux modèles tridimensionnels, les monocouches 2D offrent une surface luminale exposée et accessible, cruciale pour l’étude des interactions hôte-pathogène.

Ces monocouches reflétant l’intestin in vivo avec de multiples lignées cellulaires fournissent désormais des protocoles sur mesure pour l’étude des agents pathogènes dans des sections spécifiques de l’intestin telles que les niches intestinales petites et grandes. Nos recherches ont identifié des conditions de culture optimisées pour créer et maintenir des monocouches 2D à partir de cellules de centres commerciaux bovins et d’organoïdes du gros intestin. Nous avons confirmé la formation d’une barrière épithéliale fonctionnelle au sein de ces monocouches à l’aide de registres électriques transépithéliaux et de tests de perméabilité paracellulaire, ainsi que de techniques de coloration immunocytochimique.

Notre protocole a comblé les lacunes de la recherche en se concentrant sur l’absence de modèles monocouches dérivés d’organoïdes intestinaux de bovins. Ces modèles ont été bien étudiés chez la souris et l’homme, mais les bovins, qui sont des réservoirs majeurs d’agents pathogènes intestinaux ayant de graves implications pour la santé publique, n’ont pas été suffisamment explorés. Nos recherches établissent et caractérisent un système d’élevage monocouche bovin en 2D.

Cet outil novateur permet d’explorer les états normaux et pathologiques de la physiologie intestinale bovine, avec des applications potentielles s’étendant à la recherche biomédicale et translationnelle d’importance pour la santé publique.