Untersuchungen über die Ga (III) -Komplexes von EOB-DTPA and Its<sup&gt; 68</sup&gt; Ga Radiolabeled Analog

Zusammenfassung

Ein Verfahren zur Isolierung von EOB-DTPA und anschließende Komplexierung mit natürlichen Ga (III) und ⁶⁸ Ga hier präsentiert wird, sowie eine gründliche Analyse aller Verbindungen und Untersuchungen zur Kennzeichnung Effizienz, In - vitro - Stabilität und der n- Octanol / Wasser Verteilungskoeffizient des radiomarkierten Komplexes.

Zusammenfassung

Wir zeigen, ein Verfahren zur Isolierung von EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris (carboxymethyl) -4- (Ethoxybenzyl) -undecanedioic Säure) von seinem Gd (III) -Komplex und Protokolle für die Vorbereitung seiner neuartigen nicht-radioaktiv, dh natürliche Ga (III) sowie radioaktive ⁶⁸ Ga - Komplex. Der Ligand als auch das Ga (III) -Komplexes wurde durch kernmagnetische Resonanz (NMR) Spektroskopie, Massenspektrometrie und Elementaranalyse charakterisiert. ⁶⁸ Ga durch eine Standard - Elution aus einem ⁶⁸ Ge / ⁶⁸ Ga - Generator erhalten. Versuche , die ⁶⁸ Ga-Markierungseffizienz von EOB-DTPA bei pH zu bewerten 3,8-4,0 durchgeführt wurden. Etablierten Analysetechniken Funk TLC (Dünnschichtchromatographie) und Radio-HPLC (Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie) wurden verwendet, um die radiochemische Reinheit des Tracers zu ermitteln. Als eine erste Untersuchung der Lipophilie ^'68 Ga Tracern der n- Octanol / Wasser distribution Koeffizienten von ⁶⁸ Ga - Spezies in einem pH 7,4 - Lösung wurde durch ein Extraktionsverfahren bestimmt werden . In vitro - Stabilitätsmessungen des Tracers in verschiedenen Medien bei physiologischem pH durchgeführt wurden, offenbart unterschiedliche Zersetzungsraten.

Einleitung

Gadoxetsäure ein gemeinsamer Name für den Gd (III) -Komplex des Liganden EOB-DTPA ^1, ist ein häufig verwendetes Kontrastmittel in hepatobiliären Magnetresonanztomographie (MRI). ^2,3 Aufgrund der spezifischen Aufnahme durch Leber Hepatozyten und hoher Prozentsatz von hepatobiliären Exkretion es die Lokalisierung von fokalen Läsionen und Lebertumoren ermöglicht. ^2-5 gewisse Einschränkungen der MRI - Technik (zB Toxizität der Kontrastmittel, begrenzte Anwendbarkeit bei Patienten mit Klaustrophobie oder Metallimplantaten) jedoch für eine alternative Diagnosewerkzeug nennen .

Positron - Emissions - Tomographie (PET) ist ein Molekularabbildungsverfahren, bei dem eine kleine Menge einer radioaktiven Substanz (Tracer) verwaltet wird, auf dem ihre Verteilung im Körper durch einen PET - Scanner aufgezeichnet. ⁶ PET ist ein dynamisches Verfahren , das für Hoch ermöglicht räumliche und zeitliche Auflösung der Bilder sowie die Quantifizierung der Ergebnisse, ohne mitbefassen sich mit den Nebenwirkungen von MRI-Kontrastmittel. Der Aussagewert der erhaltenen metabolischen Informationen kann durch Kombination von weiteren bildgebenden Verfahren, wie es am häufigsten erreicht durch Hybrid-Bildgebung mit Computertomographie (CT) in PET / CT-Scanner erhalten mit anatomischen Daten erhöht werden.

Die chemische Struktur der Tracer für PET müssen ein radioaktives Isotop, das als Positronenemitter umfassen. Positronen haben eine kurze Lebensdauer, da sie fast sofort mit Elektronen der Atomschalen umgebenden Gewebe zu vernichten. Durch Vernichtung zwei 511 keV Gammaphotonen mit entgegengesetzter Bewegungsrichtung emittiert werden , die von der PET - Scanner erfasst werden. ^7,8 Um einen Tracer, PET Nuklide bilden können kovalent an ein Molekül gebunden sein, wie es der Fall in 2-Desoxy- 2- ^[18 F] fluoroglucose (FDG), das am häufigsten verwendete PET - Tracer. ⁷ kann jedoch ein Nuklid auch koordinative Bindungen an einen oder mehrere Liganden bilden (zB^[68 Ga] -DOTATOC ^9,10) oder als gelöste anorganische Salze eingesetzt werden (beispielsweise ^[18 F] Natriumfluorid ^11). Insgesamt ist die Struktur des Tracers entscheidend, da es seine Bioverteilung bestimmt, Metabolismus und Ausscheidungsverhalten.

Eine geeignete PET-Nuklid sollten günstige Eigenschaften wie bequeme Positron Energie und Verfügbarkeit sowie eine Halbwertszeit ausreichend für die geplante Untersuchung zu kombinieren. Die ⁶⁸ Ga Nuklid ist in den letzten zwei Jahrzehnten eine wesentliche Kraft auf dem Gebiet der PET werden. ^12,13 Dies ist vor allem vor Ort durch ein Generatorsystem, das unabhängig von der Nähe eines Zyklotrons Kennzeichnung ermöglicht aufgrund seiner Verfügbarkeit ist. In einem Generator Nuklid die Mutter ⁶⁸ Ge auf einer Säule aus dem absorbiert wird die Tochter - Nuklid ⁶⁸ Ga eluiert wird und anschließend in einem geeigneten Chelator gekennzeichnet. ^6,14 Da das ⁶⁸ Ga Nuklid als trival bestehtent - Kation wie Gd (III) ^10,13, EOB-DTPA mit ⁶⁸ Ga Chela statt einen Komplex mit dem gleichen Gesamt negative Ladung als Gadoxetsäure ergeben würde. Dementsprechend könnte , dass ⁶⁸ Ga - Tracer eine ähnliche Charakteristik Leberspezifität mit der Eignung für die PET - Bildgebung zu kombinieren. Obwohl Gadoxetsäure als Dinatriumsalz gekauft und verwaltet werden , in folgendem Zusammenhang werden wir es als Gd [EOB-DTPA] beziehen und auf die nicht-radioaktiven Ga (III) -Komplex als Ga [EOB-DTPA] oder ⁶⁸ Ga [ EOB-DTPA] im Falle der radiomarkierten Komponente aus Gründen der Bequemlichkeit.

Zur Beurteilung ihrer Eignung als Tracer für PET, radioaktiven Metallkomplexe müssen geprüft werden extensiv in in vitro, in vivo oder ex vivo Experimente zuerst. Zur Bestimmung der Eignung für ein entsprechendes medizinisches Problem, verschiedene Tracer Eigenschaften wie Bioverteilung Verhalten und Lichtraumprofil, Stabilität, Organspezifität und Zelle oder tissue Aufnahme müssen untersucht werden. Aufgrund ihrer nicht-invasiven Charakter, in vitro - Bestimmungen werden häufig vor der in vivo - Experimente durchgeführt. Es ist allgemein anerkannt , dass DTPA und seine Derivate sind von begrenzter Eignung als Chelatoren für ⁶⁸ Ga aufgrund dieser Komplexe kinetische Inertheit fehlt, in vergleichsweise schnelle Zersetzung führt , wenn in vivo verabreicht. ^14-20 Dies in erster Linie durch apo- Transferrin verursacht wird als wirkende Wettbewerber für ⁶⁸ Ga im Plasma. Dennoch untersuchten wir diese neue Tracer über ihre mögliche Anwendung in Leber - Gallen - Bildgebung, bei Diagnoseinformationen können innerhalb von Minuten nach der Injektion ^3,4,21-23, wodurch nicht unbedingt für die langfristige Stabilität Tracer zur Verfügung gestellt werden. Dazu isolierten wir EOB-DTPA aus Gadoxetsäure und ausgeführt zunächst die Komplexbildung mit natürlichen Ga (III), die als Mischung von zwei stabilen Isotopen besteht, ⁶⁹ Ga und ⁷¹ Ga. Der Komplex somit als nicht-radioaktive Standard für die folgenden Chelat von ⁶⁸ Ga erhalten serviert. Wir verwendeten Methoden ermittelt und bewertet gleichzeitig ihre Eignung für den ⁶⁸ Galabeling Effizienz der EOB-DTPA für die Bestimmung und die Lipophilie des neuen ⁶⁸ Ga - Tracer und seine Stabilität in verschiedenen Medien zu untersuchen.

Protokoll

1. Herstellung von EOB-DTPA und Ga [EOB-DTPA]

Achtung: Bitte konsultieren Sie alle relevanten Sicherheitsdatenblätter (MSDS) der verwendeten organischen Lösungsmittel, Säuren und Laugen vor dem Gebrauch. Führen Sie alle Schritte in einem Abzug und persönliche Schutzausrüstung (Schutzbrille, Handschuhe, Kittel).

1. Isolierung von EOB-DTPA aus Gadoxetsäure
   1. Setzen Sie 3 ml 0,25 M Gadoxetsäure injizierbare Lösung in einen Kolben. Hinzufügen, 500 mg (5,6 mmol) Oxalsäure zu der gerührten Lösung.
   2. Nach dem Rühren für 1 Stunde, filtern die Suspension über eine Fritte reduziert Druck. Dann den Rückstand dreimal mit 3 ml Wasser auf.
   3. Kombinieren Sie die wässrigen Filtrate und statten die Lösung mit einem pH-Elektrode. Liste 12 M Chlorwasserstoffsäure zu dem Filtrat, bis der pH-Wert beträgt etwa -0,1.
   4. Entferne das Lösungsmittel in vacuo zu einem farblosen Rückstand zu ergeben. Unter Inertgas aufbewahren.
   5. Waschen Sie den Rückstand gut (mindestens dreimal) mit Ethylacetat das überschüssige Oxalsäure zu entfernen. Trocknet den Rückstand im Vakuum.
   6. Abgeblasen, und der Rückstand in 2 ml Wasser bei Raumtemperatur und dann die Lösung in einem Eisbad zu kühlen. Ohne Entfernen des Eisbad mit 0,5 M wässriger Natronlauge tropfenweise bis zur Bildung eines farblosen gluey Feststoff wird beobachtet.
   7. Entfernen Sie das Wasser durch Abgießen. Waschen Sie die solide zwei Mal mit 1 ml kaltem Wasser. Der Feststoff wird im Vakuum die erste Produktfraktion zu ergeben.
   8. Isolieren einer zweiten Produktfraktion aus den vereinigten Fraktionen von abdekantiert Wasser über Säulenchromatographie (Kieselgel, Methanol / Wasser 4/1). ²⁴ das Lösungsmittel im Vakuum entfernen.
   9. Wenn das so erhaltene feste nicht rein weiß ist, wieder in Lösung in 1 ml Wasser, 10 ml Ethanol und anschließend 10 ml Diethylether das Produkt zu fällen. Filter durch eine Fritte mit vermindertem Druck und im Vakuum getrocknet.
   10. Kombinierensowohl feste Fraktionen von EOB-DTPA und NMR - Spektroskopie, ²⁵ massenspektrometrischen ²⁶ und Elementar ²⁷ Analysen durchführen.
2. Synthese von Ga [EOB-DTPA]
   VORSICHT: Shop feste Ga (III) -chlorid unter einer trockenen, inerten Atmosphäre, da bei Kontakt mit Luft, Feuchtigkeit oder Fett Zersetzung stattfindet, was zu ätzende Dämpfe und die Bildung von gelb, braun oder schwarz Verunreinigungen.
   1. Bereiten Sie eine 0,11 M Stammlösung durch Auflösen von 1,94 g (11,0 mmol) Ga (III) -chlorid in 100 ml Wasser. Verdünne 1 ml 25% iger wässriger Ammoniaklösung mit 4 ml Wasser.
   2. Man löst 80 mg (0,15 mmol) des EOB-DTPA in einen Kolben in 10 ml Wasser. Falls erforderlich, erwärmen das Lösungsmittel eine vollständige Auflösung zu erreichen.
   3. In 1,4 ml (0,15 mmol) des Ga (III) -chlorid-Stammlösung. Anlegen des Kolbens mit einem Rührer und pH-Elektrode. Hinzufügen verdünnte wässrige Ammoniaklösung zugetropft, bis der pH-Wert der Lösung ca. 4,1 beträgt. Rühre bei room Temperatur für 30 min.
   4. Entferne das Lösungsmittel in vacuo. Platzieren Sie den Rückstand in einem Kolben, ausgestattet mit einem Destillationsaufsatz mit einem zentralen und parallelen Seiten Hals. Rüsten Sie den zentralen Hals mit einem Kühlfinger und dem Seitenhals mit einer Vakuumpumpe Auslass
   5. Heizen Sie den Rückstand unter vermindertem Druck (125 ° C, 0,6 mbar). Entfernen Sie regelmäßig sublimierten Ammoniumchlorid (sichtbar als weiße Beschichtung der Glasoberfläche) aus dem Kühlfinger und immer noch den Kopf, als auch von den oberen Teilen des Kolbens mit einem leicht feuchten Tuch. Setzen Sie den Vorgang, bis es keine sichtbare Bildung neuer Sublimat ist.
   6. Zum Entfernen letzten Spuren von Ammoniumchlorid den Rückstand dreimal mit 0,5 ml heißem Methanol, respectively. Trocknen der farblose Rückstand in vacuo. Führen NMR - spektroskopische, ²⁵ massenspektrometrischen ²⁶ und Elementar ²⁷ Analysen.

2. Allgemeine Markierungsverfahren

ACHTUNG: Alle exExperimente mit direkten oder indirekten Kontakt mit radioaktiven Stoffen dürfen nur von geschultem Personal durchgeführt werden. Bitte verwenden Sie geeignete Schutzausrüstung. Sammeln Sie alle radioaktiven Abfälle getrennt und zu speichern und in Übereinstimmung mit den gültigen Vorschriften zu entsorgen.

1. Elution des Generators
   Hinweis: Ein 40 mCi ⁶⁸ Ge / ⁶⁸ Ga - Generator mit der Mutter - Nuklid als Oxid auf Dodecyl-3,4,5-trihydroxybenzoat Kieselsäure gebunden wurde verwendet. Elution und Reinigung kann manuell oder durchgeführt werden, wie es der Fall in diesem Verfahren war, als kombinierte automatisierten Prozess eine peristaltische Pumpe und Spendereinheit.
   1. Bereiten Sie Lösungen von 5,5 M, 1,0 M und 0,05 M Salzsäure. Eine Lösung aus 5,0 M Natriumchlorid, 25 & mgr; l von 5,5 M Chlorwasserstoffsäure pro ml enthält. Bereiten einer Pufferlösung von pH 4,6 durch die Kombination von 4,1 g Natriumacetat, 1 ml HCl (30%) und 2,5 ml Eisessig und verdünnt das Gemisch mit Wasser auf 50 ml.
   2. Precondition der PS-H ⁺ Kartusche durch sie langsam mit 1 ml 1,0 M Salzsäure und anschließend mit 5 ml Wasser gespült.
   3. Eluieren der Silica - Säule des Generators mit 4 ml 0,05 M HCl. ¹² Legen Sie das ⁶⁸ Ga - Eluat auf die PS-H ⁺ Patrone.
   4. Spülen Sie die Kartusche mit 5 ml Wasser und anschließend mit 5 ml Luft trocknen. Eluieren der ⁶⁸ Ga aus der Kartusche mit 1 ml 5,0 M angesäuerten Natriumchloridlösung. ²⁸
2. Die Markierung von EOB-DTPA mit ⁶⁸ Ga
   1. Man löst 1 mg (1,9 umol) EOB-DTPA in 1 ml Wasser. Aus dieser Lösung nehmen 100 ul (0,19 umol) und verdünnen sie mit 9,9 ml Wasser ein 19 & mgr; M herzustellen (10 ug / ml) Stammlösung von EOB-DTPA.
   2. Entfernen Sie 50 ul (entspricht 22-29 MBq) der Lösung ⁶⁸ Ga enthält und in ein Fläschchen. In 50 ul (0,5 ug) einer 19 mM Stammlösung von EOB-DTPA und 300 & mgr; l of Puffer den pH-Wert auf 4,0 zu erhöhen. Schütteln Sie kurz und Inkubation der Lösung bei Raumtemperatur für 5 min. Entfernen eines aliquoten von 1-5 & mgr; l und setzen HPLC oder TLC-Analyse.
   3. Führen Sie Radio - HPLC - Analyse an einer Reversed - Phase (RP) C18 - Säule ²⁹ Verwenden Sie die folgende mobile Phase: a . - Wasser / Trifluoressigsäure (99,9% / 0,1%), B - Acetonitril / Trifluoressigsäure (99,9% / 0,1%), Gradient : 06 min 80% A → 0% A (0,5 ml / min), 610 min 0% A (0,5 ml / min).
   4. Bestimmen Sie die Peak-Intensitäten der Funk HPLC-Signale als Fläche unter der Kurve. Berechnen Sie die Markierungsausbeute als radiochemische Reinheit (RCP) des Tracers wie folgt:
      RCP = A _Ga-EOB-DTPA / (A _Ga + A _Ga-EOB-DTPA) ∙ 100%
      Ein _Ga-EOB-DTPA: Fläche unter der Kurve von ⁶⁸ Ga [EOB-DTPA]
      A _Ga: Fläche unter der Kurve der freien ⁶⁸ Ga

3. Labelingeffizienz

1. Führen Sie Markierungsverfahren wie beschreibend in Abschnitt 2. Verwenden Sie ein durchgängiges Programm an Aktivität von ⁶⁸ Ga - Eluat starten, zB 22-29 MBq (40-140 & mgr; l, abhängig von der Frische des Eluats).
2. Die erforderliche Menge an Pufferlösung , um den pH auf 3,8-4,0 einzustellen (40-190 & mgr; l, abhängig von dem Volumen von ⁶⁸ Ga - Eluat). Fügen Sie die erforderliche Menge an Ligand-Stammlösung (10-70 ul einer 19 mM Lösung).
3. Fügen Sie die erforderlichen Mengen an Wasser, um das Gesamtvolumen jeder Markierungssonde auf 1,75 ml einzustellen. Gut mischen und lassen Sie die Probe stehen für 5 Minuten bei Raumtemperatur. Eine HPLC-Analyse wie in Abschnitt 2 beschrieben, um die Markierungsausbeute zu bestimmen.
4. Führen Markierungsverfahren mit Mengen an Liganden zwischen 0,1 & mgr; g und 0,7 & mgr; g in Schritten von 0,1 & mgr; g. Führen Sie Experimente in dreifacher Ausführung für jede Ligandenkonzentration. Berechnen Sie die mittlere Ausbeute und Standardabweichung.

4. In - vitro - Stabilität

1. Allgemein pERFAHREN und Zubereitungen
   1. Auflösen einer Tablette von Phosphat-gepufferter Salzlösung (PBS) in 200 ml deionisiertem Wasser mit einer PBS-Stammlösung mit einer Phosphatkonzentration von 10 mM herzustellen.
   2. Führen Sie die Kennzeichnung von 22-29 MBq ⁶⁸ Ga mit 0,5 ul EOB-DTPA - Stammlösung, wie in Kapitel 2. Je nach Volumen des ⁶⁸ Ga - Eluats, stellen Sie die Menge des Puffers, wie in Kapitel 3. Ziehen Proben Markierungslösung 6-12 MBq Tracer enthält Stabilitätsmessungen durchzuführen.
   3. Führen Radio DC - Analyse auf 80 mm Silicagel-beschichteten Aluminium - Platten unter Verwendung von 0,1 M wässrigem Natriumcitrat als Eluent und zu analysieren , die Platten mit einem Radioaktivität TLC - Scanner. ³⁰ die Intensitäten der TLC - Signale als Fläche unter der Kurve zu bestimmen. Berechnen Sie die RCP des Tracers wie folgt:
      RCP = A _Ga-EOB-DTPA / (A _Ga-free + A _Ga-EOB-DTPA + A _{Ga-kolloidalen)} ∙ 100%
      Eine _Ga-EOB-DTPA: Fläche unter der Kurve von ⁶⁸ Ga [EOB-DTPA]
      Ein _Ga-frei: Fläche unter der Kurve der freien ⁶⁸ Ga
      Ein _{Ga-kolloidale:} Fläche unter der Kurve von kolloidalem ⁶⁸ Ga
   4. Berechnen RCP _t / RCP ₀ für jeden Zeitpunkt. Zeichnen Sie die so standardisiert RCP vs. Zeitdifferenz seit dem Startpunkt t = 0 min.
      RCP _t = RCP von ⁶⁸ Ga [EOB-DTPA] zum Zeitpunkt t.
      ₀ RCP = RCP von ⁶⁸ Ga [EOB-DTPA] bei t = 0 min.
2. Stabilität in phosphatgepufferter Salzlösung (A)
   1. Zu 65 & mgr; l Markierungslösung mit 150 ul PBS-Stammlösung und 60 & mgr; l Natriumhydroxid-Lösung (0,1 M), um den pH-Wert auf 7,4 zu erhöhen. Gründlich durchmischen.
   2. Entfernen eines aliquoten von 1-5 ul TLC-Analyse durchzuführen ( "Ausgangspunkt"). Sofort speichern, die Lösung in einem Inkubator bei 37 ° C und Aliquots entfernen, um die DC-Analyse an repräsentieren zuführenAtive Zeitpunkten über 3 Stunden.
3. Stabilität gegenüber mehr als apo -Transferrin in PBS (B)
   1. Zu 120 & mgr; l Markierungslösung 50 ul-Lösung und 430 PBS-Stamm ul Natronlauge hinzu (0,1 M), um den pH-Wert auf 7,4 zu erhöhen. Werden 40 ul einer Lösung von apo -Transferrin (25 mg / ml). Gründlich durchmischen.
   2. Entfernen eines aliquoten von 1-5 ul TLC-Analyse durchzuführen ( "Ausgangspunkt"). Sofort speichern, die Lösung in einem Inkubator bei 37 ° C und Entfernen Aliquots TLC-Analyse bei repräsentativen Zeitpunkten über 3 h durchzuführen.
4. Stabilität in humanem Serum (C)
   1. Bis 500 & mgr; l humanem Serum 25 ul Markierungslösung hinzufügen und 45 & mgr; l Natriumhydroxid-Lösung (0,1 M), um den pH auf 7,4 zu erhöhen. Gründlich durchmischen.
   2. Entfernen eines aliquoten von 1-5 ul TLC-Analyse durchzuführen ( "Ausgangspunkt"). Unmittelbar speichern Sie die Lösung in einem incubator bei 37 ° C und Entfernen Aliquots TLC-Analyse bei repräsentativen Zeitpunkten über 3 h durchzuführen.

5. Bestimmung des Verteilungskoeffizienten LogD

1. Führen Sie Markierungsverfahren, wie in Abschnitt 2. 50 ul Markierungslösung werden 20 ul PBS-Stammlösung und 170 & mgr; l Natriumhydroxid-Lösung (0,1 M) beschrieben, um den pH-Wert auf 7,4 zu erhöhen.
2. Ziehen Sie 200 ul von dieser Lösung und steckte es in eine Plastik V-Fläschchen. In 200 ul n- Octanol. Schließen Sie das Fläschchen und Vortex für 2 min. Zentrifuge Dann die Probe bei 1600 × g für 5 min.
3. Entfernen Triplikaten von 40 & mgr; l aus der n Octanol - Phase und der wässrigen Phase jeder und sie in separaten V-Fläschchen. Achten Sie darauf, um die Schichten zu vermischen.
4. Messen Sie die Aktivität jeder Probe in einem Gamma-Zähler gut für 30 Sekunden. Für jede Probe sofort die Messung zweimal wiederholen und davon die mittlere Aktivität Ᾱ _t berechnen in Zählungen pro Minute (cpm). Liste der auf diese Weise gewonnenen Ᾱ _{t, W1,} Ᾱ _{t, W2} und Ᾱ _{t, W3} (Aktivitäten in wässrigen Proben) und Ᾱ _{t, O1,} Ᾱ _{t, O2,} Ᾱ _{t, O3} (Aktivitäten in n- Octanol) zusammen mit dem jeweiligen Zeitpunkt t ihrer Bestimmung.
5. Legen Sie den Zeitpunkt der Messung der letzten Probe als t _0. Bestimmen und in der Liste At in min durch die Berechnung At = tt _0. Führen Sie Zerfallskorrektur von Ᾱ _t, mit der folgenden Formel:
   Ᾱ ₀ = Ᾱ _t · 2 ^{(& Dgr; t / 68 min).}
6. Berechnen Ᾱ _{0, W} als Mittelwert von Ᾱ _{0, W1,} Ᾱ _{0, W2} und Ᾱ _{0, W3} sowie Ᾱ _{0, O} als Mittelwert Ᾱ _{0, O1,} Ᾱ _{0, O2} und Ᾱ _{0, O3.} Berechnen logD mit folgender Formel:
   logD = log [(Ᾱ _{0, O · 40 ug) / (Ᾱ 0, W · 33 ug)].}
7. Führen Sie das gesamte Experiment in dreifacher Ausfertigung und den Mittelwert logD zusammen mit seiner Standardabweichung.

Ergebnisse

Der Ligand EOB-DTPA und der nicht-radioaktiven Ga (III) -Komplex wurden mittels ¹ H analysiert und ¹³ C ^{1 H} -NMR - Spektroskopie, Massenspektrometrie und Elementaranalyse. Die Ergebnisse in Tabelle 1 aufgelistet und dargestellt in Figuren 1-6 , die Reinheit der Substanzen verifizieren.

Die Elution der ⁶⁸ Ge / ⁶⁸ Ga - Generator l...

Diskussion

EOB-DTPA ist über eine mehrstufige Synthese ³³ kann aber auch nur aus den verfügbaren Kontrastmittel Gadoxetsäure enthält , isoliert werden. Zu diesem Zweck kann die Zentral Gd (III) -Ion mit einem Überschuß von Oxalsäure ausgefällt werden. Gd (III) Oxalat und Oxalsäure Nach dem Entfernen der Ligand kann durch Ausfällen in kaltem Wasser bei pH 1,5 isoliert werden. Um jedoch die Ausbeuten Säulenchromatographie des Filtrats zu verbessern kann durchgeführt anstelle oder als Follow-up-Verfahren. Jedes...

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
primovist	Bayer	-	0.25 M
gallium(III) chloride	Sigma-Aldrich Co.	450898
water (deionized)	-	-	tap water deionizing equipment by Auma-Tec GmbH
hydrochloric acid 12 M	VWR	20252.29
sodium hydroxide	Polskie Odczynniki Chemiczne S.A.	810925429
oxalic acid	Sigma-Aldrich Co.	75688
ethyl acetate	Brenntag GmbH	10010447
silica gel	Merck KGaA	1.10832.9025	Geduran Si 60 0.063-0.2 mm
TLC silica gel 60 F254	Merck KGaA	1.16834.0001
methanol	VWR	20903.55
ethanol	Brenntag GmbH	10018366
eiethylether	VWR	23807.468	stored over KOH plates
ammonia solution (25%)	VWR	1133.1
pH electrode	VWR	662-1657
stirring and heating unit	Heidolph	505-20000-00
pump	Ilmvac GmbH	322002
frit	-	custom design
NMR spectrometer	Bruker Coorporation	-	Ultra Shield 400
mass spectrometer	Thermo Fisher Scientific Inc.	-
elemental analyser	Hekatech GmbH Analysentechnik	-	EuroVector EA 3000 CHNS
deuterated water D2O	euriso-top	D214	99.90% D
Material/Equipment required for labeling procedures
68Ge/68Ga generator	ITG Isotope Technologies Garching GmbH	A150
pump and dispenser system	Scintomics GmbH	-	Variosystem
hydrochloric acid 30% (suprapur)	Merck KGaA	1.00318.1000
water (ultrapur)	Merck KGaA	1.01262.1000
sodium chloride (suprapur)	Merck KGaA	1.06406.0500
sodium acetate (suprapur)	Merck KGaA	1.06264.0050
glacial acetic acid (suprapur)	Merck KGaA	1.00066.0250
sodium citrate dihydrate	VEB Laborchemie Apolda	10782	>98.5%
PS-H+ Cartridge (S)	Macherey-Nagel	731867	Chromafix
apo-Transferrin	Sigma-Aldrich Co.	T2036
PBS buffer (tablets)	Sigma-Aldrich Co.	79382
human serum	Sigma-Aldrich Co.	H4522	from human male AB plasma
flasks, columns, etc.		custom design
pH electrode	Knick Elektronische Messgeräte GmbH & Co. KG	765-Set
binary pump (HPLC)	Hewlett-Packard	G1312A (HP 1100)
UV Vis detector (HPLC)	Hewlett-Packard	G1315A (HP 1100)
radioactive detector (HPLC)	EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP column	Advanced Chromatography Technologies Ltd.	ACE-1110-1503/A100528
HPLC glass vials	GTG Glastechnik Graefenroda GmbH	8004-HP-H/i3µ
pipette	Eppendorf	-
plastic vials	Sarstedt AG & Co.	6542.007
plastic vials	Greiner Bio-One International GmbH	717201
activimeter	MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH	-	Isomed 2010
tweezers		custom design
incubator	Heraeus Instruments GmbH	51008815
vortex mixer	Fisons	-	Whirlimixer
centrifuge	Heraeus Instruments GmbH	75003360
gamma well counter	MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH	-	Isomed 2100
water for chromatography	Merck KGaA	1.15333.2500
acetonitrile for chromatography	Merck KGaA	1.00030.2500
trifluoroacetic acid	Sigma-Aldrich	91707
TLC radioactivity scanner	raytest Isotopenmessgeräte GmbH	B00003875	equipped with beta plastic detector