JoVE Logo

로그인

JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.

기사 소개

  • 요약
  • 초록
  • 서문
  • 프로토콜
  • 결과
  • 토론
  • 공개
  • 감사의 말
  • 자료
  • 참고문헌
  • 재인쇄 및 허가

요약

EOB-DTPA의 분리 및 후속 착화 천연의 Ga (III) 및 (68)의 Ga 명세서 제시뿐만 아니라 표지 효율 모든 화합물 및 조사의 철저한 분석 시험 관내 안정성 및 N- 옥탄 올 / 물하는 수순 방사성 표지 복합체의 분배비.

초록

우리는 EOB-DTPA (-3,6,9- 트리 아자 -3,6,9- 트리스 (카르복시 메틸) -4- (에 톡시) -undecanedioic 산)의 하나님 (III)에서 복잡한 프로토콜의 분리 방법을 보여 그 소설 비 방사성, 즉, 자연 조지아 (III)뿐만 아니라 방사성 68 조지아 복합체의 제조. 착물 리간드뿐만 아니라의 Ga (III)는 핵 자기 공명 (NMR) 분광법, 질량 분석 및 원소 분석을 특징으로 하였다. 68 조지아 68의 Ge / 68 조지아 발생기로부터 표준 용출 방법으로 얻었다. 실험은 3.8-4.0를 실시했다 pH에서 EOB-DTPA의 68 조지아 - 라벨의 효율성을 평가한다. 설립 분석 기술 무선 TLC (박층 크로마토 그래피) 및 라디오 HPLC (고성능 액체 크로마토 그래피)는 탐침의 방사 화학적 순도를 결정 하였다. 68 조지아의 추적자 '친 유성 n 옥탄 올 / 물 소소의 첫 번째 조사로는 pH 7.4 용액에 존재하는 68 종의 Ga N 계수 추출 방법에 의해 측정 하였다. 실시 하였다 생리적 pH에서 각종 미디어의 추적자 시험 관내 안정성의 측정, 다른 분해 속도를 드러내는.

서문

Gadoxetic 산, EOB-DTPA 리간드 Gd의 (III) 착물에 대한 일반적인 이름 인해 간 간세포 높은 퍼센티지는 특정 흡수에 간담 자기 공명 영상 (MRI). 2,3-에서 자주 사용되는 조영제 인 간담 배설의이 초점 병변 및 간 종양의 위치 파악을 가능하게한다. 2-5 그러나 MRI 기술의 특정 제한 사항 (예를 들면, 조영제의 독성, 밀실 공포증 또는 금속 임플란트 환자에서 제한 적용) 다른 진단 도구를 요구 .

양전자 방출 단층 촬영 (PET)는 본문에 그 분포는 PET 스캐너로 기록되는 때 방사성 물질 (추적)을 소량 투여하는 것을 특징 분자 이미징 법을한다. 6 PET 높은 허용 동적 방법 않고도 시공간 이미지 해상도뿐만 아니라 결과를 정량화MRI 조영제의 부작용 다룬다. 얻어진 메타 정보의 정보 값이 상기와 같은 가장 일반적으로 PET / CT 스캐너의 전산화 단층 촬영 (CT)과 하이브리드 이미징 달성 추가 촬상 수단으로부터 수신 된 데이터와 해부학 적 조합에 의해 증가 될 수있다.

PET 적합한 트레이서의 화학 구조는 양전자 방출로서 방사성 동위 원소를 포함한다. 양전자는 즉시 주변 조직의 원자 껍질의 전자를 몰살하기 때문에 짧은 수명을 가지고있다. 소멸함으로써 움직임 반대 방향으로 두 511 keV의 감마 광자는 PET 스캐너에 의해 기록되는, 방출된다. 7,8, PET 핵종은 분자에 공유 결합 될 수있는 탐침을 형성하는 2- 데 옥시의 경우처럼 2- [F 18] fluoroglucose (FDG)는 가장 널리 사용되는 PET 추적자. 7 그러나 핵종는 하나 이상의 리간드에 배위 결합을 형성 할 수있다 (예를 들면[68 조지아] -DOTATOC 9,10) 나)는 (용해 된 무기 염으로 예컨대, [F 18] (11), 불화 나트륨을 적용. 그것의 생체 내 분포, 대사 및 배설 동작을 결정으로서 전체적으로 트레이서의 구조가 중요하다.

적합한 애완 동물 핵종 편리 양전자 에너지 및 가용성뿐만 아니라 의도 된 조사에 적합한 반감기 같은 유리한 특성을 결합해야합니다. 68 조지아 핵종은 지난 20 년간 PET 분야에서 필수적인 힘이되었다. 12,13이 때문에 사이클로트론 부근으로부터 독립적 현장 라벨링 할 수있는 발전기 시스템으로의 가용성을 주로한다. 발전기에서 어머니 (68) 창은 딸 핵종 (68) 가인이 적당한 킬레이트로 용출하고 이후에 표시되는 열을 흡수 핵종. 6,14 68 조지아의 핵종은 trival로 존재하기 때문에gadoxetic 산 같은 전반적인 음전하와 복합체를 얻을 것 대신에 68 조지아와 EOB-DTPA를 킬레이트 단지 하나님 (III) 10, 13와 같은 엔트 양이온. 따라서, 그 68 조지아의 추적은 PET 영상에 대한 적합성과 유사한 특성 간 특이성을 결합 할 수 있습니다. gadoxetic 산 다음과 같은 맥락에서 구입하고, 나트륨 염으로 관리하고 있지만 우리는 하나님 [EOB-DTPA]과 같이 참조됩니다 조지아 [EOB-DTPA, 또는 68 조지아 [같은 비 방사성 조지아 (III) 복잡한 편의상 방사성 표지 된 성분의 경우 EOB-DTPA].

PET에 대한 추적자는, 방사성 금속 착물 먼저 생체 내 또는 생체 외 실험에서, 체외에서 광범위하게 조사 할 필요가 그들의 적용 가능성을 알아보고자 하였다. 각각의 의료 문제에 대한 적합성을 확인하려면, 생체 분포 행동과 통관 프로필, 안정성, 장기 특이 세포 또는 tissu 같은 다양한 추적 특성전자 흡수를 조사 할 필요가있다. 그들의 비 침습적 문자, 체외 결정은 종종 생체 실험 이전에 수행된다. 일반적으로 생체 내에서 투여시 DTPA 및 그 유도체가 비교적 빨리 분해의 결과로 운동 불활성 결여로 인해이 단지 68 조지아에 대한 킬레이트, 제한된 적합성의 것으로 인정된다. 14-20 이것은 주로 역할을 apo- 트랜스페린에 의해 발생 플라즈마에서 68 조지아에 대한 경쟁. 그럼에도 불구하고, 우리는 진단 정보함으로써 반드시 장기 추적 안정성을 필요로하지 않는, 분 이내에 포스트 분사 3,4,21-23를 제공 할 수있다 특징으로 간담 영상에서의 가능한 적용에 관한 새로운 추적을 조사 하였다. 이를 위해 우리는 gadoxetic 산에서 EOB-DTPA를 분리하고 처음 두 개의 안정 동위 원소, 69 Ga 및 (71)의 혼합물로서 존재하는 자연 조지아 (III)와 착물을 수행 조지아. 복잡한 따라서 68 조지아의 다음 킬레이트 비 방사성 표준을 역임 얻을. 우리는 방법을 확립 함과 동시에 EOB-DTPA의 68 Galabeling 효율을 결정하고 새로운 68 조지아 트레이서의 친 유성 및 다른 매체에서의 안정성을 조사하기 위해 자신의 적합성을 평가 사용했다.

프로토콜

EOB-DTPA와 조지아 1. 준비 [EOB-DTPA]

주의 : 사용하기 전에 사용되는 유기 용매, 산 및 알카라인의 모든 관련 물질 안전 보건 자료 (MSDS)를 참조하십시오. 흄 후드에서 모든 단계를 수행하고 개인 보호 장비 (안전 안경, 장갑, 실험실 코트)를 사용합니다.

  1. gadoxetic 산에서 EOB-DTPA의 분리
    1. 플라스크에 0.25 M gadoxetic 산 주사 용액 3 ㎖를 넣습니다. 교반 된 용액에 옥살산 500 밀리그램 (5.6 밀리몰)를 추가합니다.
    2. 1 시간 동안 교반 한 후, 감압을 사용하여 프릿을 통해 현탁액을 필터. 각각 물 3 ㎖로 잔류 물을 세 번 씻으십시오.
    3. 수성 여액을 결합하고 pH 전극과 솔루션을 장비. pH가 약 -0.1가 될 때까지 여액에 12 M 염산.
    4. 무색의 잔류 물을 수득하는 용매를 진공하에 제거한다. 불활성 기체에서 보관하십시오.
    5. 충분히 잔류 워시 (적어도 세에틸 아세테이트 시간) 옥살산의 과잉을 제거한다. 진공 잔류 물을 건조.
    6. 실온에서 물 2 ㎖에 재용 해 잔류하고 얼음 용기에 용액을 냉각. 빙욕을 제거하지 않고 형성 될 때까지 0.5 M 수산화 나트륨 수용액을 적가하여 무색 고체를 관찰 끈끈한.
    7. 경사에 의해 물을 제거합니다. 차가운 물 1 mL로 고체 두 번 더 씻는다. 제 생성물 분획을 수득 진공하에 고체를 건조.
    8. 칼럼 크로마토 그래피 (실리카, 메탄올 / 물 4/1)를 통해 경사 물의 결합 분획 제 생성물 분획을 분리. 24, 진공에서 용매를 제거한다.
    9. 얻어진 고체는 순수한 흰색이 아닌 경우, 물 1 ㎖에 재용 해하여 생성물을 침전 10 ml의 에탄올 및이어서 10 ㎖의 디 에틸 에테르를 추가한다. 감압하고, 진공에서 건조하여 프릿을 통해 필터.
    10. 콤바인고체 EOB-DTPA의 분수 및 NMR 분광, 25 질량 분석 (26)와 원소 (27) 분석을 수행 둘.
  2. 가인의 합성 EOB-DTPA]
    주의 : 건조한 불활성 분위기 하에서 스토어 고체 조지아 (III) 클로라이드, 이후 공기, 수분이나 기름 분해와 접촉시 부식성 가스 및 노란색, 갈색 또는 검은 색 불순물의 형성의 결과로 발생한다.
    1. 물 100 ㎖에서의 Ga (III) 클로라이드 1.94 g (11.0 밀리몰)을 용해하여 0.11 M 스톡 용액을 제조 하였다. 물 4 ml의 25 % 암모니아 수용액 1 mL로 희석.
    2. 물 10 ㎖의 플라스크에 EOB-DTPA 80 밀리그램 (0.15 밀리몰)을 녹인다. 필요한 경우, 완전한 용해를 달성하기 위해, 용매를 가열한다.
    3. 조지아 (III) 클로라이드 원액 1.4 ㎖ (0.15 밀리몰)를 추가합니다. 교반하여 pH 전극과 플라스크를 착용. 용액의 pH가 약 4.1이 될 때까지 묽은 암모니아수 용액을 적하하여 추가한다. RO에서 교반30 분 톰 온도.
    4. 진공에서 용매를 제거한다. 중앙 및 병렬 측 경부와 stillhead가 장착 된 플라스크의 잔류 물을 넣습니다. 진공 펌프 출구와 냉각 손가락 측면 목 중심 목에 착용
    5. 감압 (125 ° C, 0.6 밀리바)에서 잔류 물을 가열한다. 주기적 냉각 핑거 여전히 헤드로부터 (유리 표면의 백색 코팅과 같은 표시) 승화 염화 암모늄을 제거 할뿐만 아니라, 약간 젖은 천으로 플라스크의 상부 부분에서. 새로운 승 화성의 가시적 형성이 없을 때까지 프로세스를 계속한다.
    6. 각각 뜨거운 메탄올 0.5 ㎖로 잔류 물을 세 번 씻어 염화 암모늄의 마지막 흔적을 제거합니다. 진공에서 무색 잔류 물을 건조. NMR 분광, 25 질량 분석 (26)와 원소 (27) 분석을 수행합니다.

2. 일반 라벨 절차

주의 : 모든 전방사성 물질에 직접 또는 간접 접촉을 포함위한 실험은 숙련 된 기술자가 수행해야합니다. 적절한 차폐 장치를 사용하십시오. 개별적으로 방사성 폐기물을 수집하고 저장하고 유효한 규정에 따라 폐기 할 것.

  1. 발전기 용출
    참고 : 도데 실-3,4,5-trihydroxybenzoate 실리카 산화물 결합 된 어머니 핵종과 40 mCi의 68 창 / 68 조지아 발생하는 사용되었다. 이 절차의 경우이었던 것에 용출 및 정제는 연동 펌프 및 디스펜서 장치를 사용하여 결합 된 자동화 된 프로세스로, 수동으로 수행하거나 할 수있다.
    1. 5.5 M의 1.0 M 및 0.05 M 염산 용액을 준비합니다. mL의 5.5 M 염산 25 μl를 함유하는 5.0 M 염화나트륨의 용액을 제조 하였다. 4.1 g의 나트륨 아세테이트, 1 mL의 염산 (30 %) 및 ​​2.5 ml의 빙초산과 함께, 50 ml의 물을 혼합물을 희석하여 pH가 4.6의 완충 용액을 제조 하였다.
    2. PREC1 1.0 M 염산 mL 및 이후 5 ml의 물과 함께 천천히 세척하여 PS-H + 카트리지 ondition.
    3. 4 ml의 0.05 M HCl로 발전기의 실리카 컬럼을 용출. (12)로드 PS-H + 카트리지 상에 68 조지아의 용출액.
    4. 물 5ml와 카트리지를 세척하고이어서 공기 5 ㎖로 건조. 1 ㎖의 5.0 M로 산성화 식염수로 카트리지로부터 용리 68 조지아. 28
  2. 68 조지아와 EOB-DTPA의 라벨링
    1. 물 1 ㎖에 EOB-DTPA 1 밀리그램 (1.9 μmol)을 녹인다. 이 솔루션에서 100 μL (0.19 μmol)를 타고 19 μM (10 μg의 / ㎖) EOB-DTPA의 원액을 준비하기 위해 물 9.9 ml의로 희석.
    2. 68 조지아를 포함하는 용액 (22 ~ 29 MBq의 같게) 50 μl를 제거하고 유리 병에 넣어. EOB-DTPA의 19 mM의 주식 솔루션의 50 μL (0.5 μg의) 300 ㎕를 O를 추가F 4.0으로 pH를 높이기 위해 버퍼. 간단히 흔들어 5 분 동안 실온에서 용액을 배양한다. 1-5 μL의 분취 량을 제거하고 HPLC 또는 TLC 분석했습니다.
    3. . 물 / 트리 플루오로 아세트산 (99.9 % / 0.1 %), B - - 트리 플루오 / 아세토 니트릴로 아세트산 (99.9 % / 0.1 %), 그라데이션 A : 역상 (RP) C18 컬럼 (29)를 사용하여 다음 이동상에 무선 HPLC 분석을 수행 06 분 80 % A를 0 % → A (0.5 ㎖ / 분), 610 분 0 % A (0.5 ㎖ / 분).
    4. 곡선 아래의 영역으로서 무선 HPLC 신호의 피크 강도를 결정한다. 다음과 같이 추적의 방사 화학적 순도 (RCP)와 라벨 수율을 계산한다 :
      RCP = A 조지아-EOB-DTPA / (A 조지아 + A 조지아-EOB-DTPA)은 100 % ∙
      조지아-EOB-DTPA : 68 조지아 [EOB-DTPA]의 곡선 아래 영역
      조지아 : 무료 68 조지아의 곡선 아래 영역

3. 라벨 효율성

  1. 설명으로 라벨링 절차를 수행섹션 2.에 D (용출액의 신선도에 따라 40-140 μL) 68 조지아의 용출액의 활동을 시작하는 일관된 범위, 예를 들어, 22 ~ 29 MBq의.
  2. (68 조지아 용출액의 부피에 따라 40-190 μL) 3.8-4.0로 pH를 조정하기 위해 완충액의 요구량을 추가한다. 리간드 모액의 요구량 (19 mM의 용액을 10 내지 70 μL)을 추가한다.
  3. 1.75 mL의 각 라벨 프로브의 전체 볼륨을 조정하는 물을 필요한 양의 추가. 잘 혼합하고, 샘플을 실온에서 5 분간 방치하자. 라벨 수율을 결정하기 위해 2 절에 설명 된대로 HPLC 분석을 수행합니다.
  4. 0.1 μg의 단계에서 리간드의 양 μg의 μg의 0.1 내지 0.7와 라벨링 절차를 수행합니다. 각 리간드 농도 3 회 반복 실험을 수행합니다. 평균 수익률과 표준 편차를 계산합니다.

4. 체외 안정성

  1. 일반 페이지rocedure 및 준비
    1. 10 mm의 포스페이트 농도와 PBS 원액을 제조 탈 이온수 200 ml의 인산염 완충 염수 정제 (PBS)를 녹인다.
    2. 섹션 3. 샘플 인출에 기재된 바와 같이, 제 2 항에 기재된 바와 같이, 68 조지아 용출액의 부피에 따라 EOB-DTPA 원액 0.5 μL와 22 ~ 29 MBq 내지 68의 Ga의 표시를 수행 버퍼의 양을 조절 안정성 측정을 수행하는 추적의 6 ~ 12 MBq의를 포함하는 라벨 솔루션입니다.
    3. 용리액으로서 0.1 M 수성 시트르산 나트륨을 사용하여 80mm 실리카겔 피복 알루미늄 판에 무선 TLC 분석을 수행하고 TLC 방사능 스캐너 판을 분석한다. (30)은 곡선 아래의 영역으로서 TLC 신호의 강도를 결정한다. 다음과 같이 추적의 RCP 계산 :
      RCP = A 조지아-EOB-DTPA / (A 조지아 무료 + A 조지아-EOB-DTPA + A 조지아 콜로이드) ∙ 100 %
      조지아-EOB-DTPA : 68 조지아 [EOB-DTPA]의 곡선 아래 영역
      조지아 무료 : 무료 68 조지아의 곡선 아래 영역
      콜로이드 (68) 조지아의 곡선 하 면적 : 조지아 콜로이드
    4. 때마다 포인트 RCP의 t / RCP 0을 계산합니다. 기점 t = 0 분부터 시간차 따라서 표준화 RCP 플롯.
      시점 t에서 68 조지아 [EOB-DTPA]의 RCP의 t는 = RCP.
      t에서 68 조지아 [EOB-DTPA] = 0 분의 RCP 0 = RCP.
  2. 인산염 완충 염수 중 안정성 (A)
    1. 라벨 용액 65 ㎕를 7.4로 pH가 상승하는 PBS 스톡 용액 150 μL 및 수산화 나트륨 용액 (0.1 M)의 60 μL를 추가한다. 철저하게 섞는다.
    2. ( '출발점') TLC 분석을 수행 1-5 μL의 분취 량을 제거합니다. 즉시 37 ℃에서 항온 용액을 저장하고, 대표에서 TLC 분석을 수행 분취 삭제3 시간에 걸쳐 시점을 극상.
  3. PBS에서 아포 -transferrin의 과잉으로 안정성 (B)
    1. 라벨 용액 120 ㎕를 7.4로 pH가 상승하는 PBS 스톡 용액 50 μL 및 수산화 나트륨 용액 (0.1 M) 430 μL를 추가한다. 아포 -transferrin (25 ㎎ / ㎖)의 용액 40 μl를 추가합니다. 철저하게 섞는다.
    2. ( '출발점') TLC 분석을 수행 1-5 μL의 분취 량을 제거합니다. 즉시 37 ℃에서 항온 용액을 저장하고, 3 시간에 걸쳐 대표적인 시점에서 TLC 분석을 수행 분취 량을 제거한다.
  4. 인간 혈청의 안정성 (C)
    1. 인간 혈청 500 ㎕를 7.4로 pH를 높이기 위해 라벨링 용액 25 μL 및 수산화 나트륨 용액 (0.1 M)의 45 μL를 추가한다. 철저하게 섞는다.
    2. ( '출발점') TLC 분석을 수행 1-5 μL의 분취 량을 제거합니다. 즉시 인큐에서 솔루션을 저장37 ° C에서 울란바토르 분취 량을 제거는 3 시간에 걸쳐 대표적인 시점에서 TLC 분석을 수행한다.

분배 계수 5. 결​​정 (L) 접속자

  1. 7.4 pH를 올리는 PBS 스톡 용액 20 μL 및 수산화 나트륨 용액 (0.1 M) 170 ㎕를 추가 라벨 용액 50 μL에 제 2 항에 기재된 표시 절차를 수행한다.
  2. 해당 솔루션에서 200 μl를 철회 및 플라스틱 V-유리 병에 넣어. n 옥탄 올의 200 μl를 추가합니다. 2 분 동안 유리 병 및 소용돌이를 닫습니다. 그런 다음 5 분 동안 1,600 XG에서 샘플을 원심 분리기.
  3. n 개의 -octanol 상과 각 성상에서 40 μL의 삼중를 제거하고 별도의 V-유리 병에 넣어. 레이어를 혼합하지 않도록주의하십시오.
  4. 30 초 동안 잘 감마 카운터로 각 시료의 활성을 측정한다. 각 시료는 즉시 회 측정을 반복하고, 그 평균 활동 Ᾱ의 t를 계산 들어 분 (CPM)에 따라 계산한다. 이렇게 얻은 Ᾱ의 t을 나열, 각과 함께 W1, Ᾱ의 t, W2 및 Ᾱ의 t, W3 (수성 샘플 활동) 및 Ᾱ의 t, O1, Ᾱ의 t, O2, Ᾱ의 t, O3 (n 옥탄 올 활동) 그 판정 시점 t.
  5. t를 0으로 마지막 샘플의 측정 시점을 정의한다. 결정의 Δt = TT 0을 계산하여 분에서의 Δt를 나열합니다. 다음 식을 사용 Ᾱ (T)의 감쇠 보정을 수행
    0 = Ᾱ의 t · 2 (의 Δt / 68 분).
  6. 의 평균으로 W0을 계산 Ᾱ 0, W1,0, W2 및 Ᾱ 0, W3뿐만 아니라 Ᾱ 0, O의 평균으로 Ᾱ 0, O1,0, O2 및 Ᾱ 0, O3. 다음 식을 사용하여 계산 (L) 접속자 :
    (L) 접속자 = 로그 [(Ᾱ 0, O · 40 μg의) / (Ᾱ 0, W · 33 μg의)].
  7. 삼중의 전체 실험을 수행하고 그 표준 편차와 함께 평균 (L) 접속자을 계산합니다.

결과

리간드 EOB-DTPA와 비 방사성의 Ga (III) 1 H, 13 C} {1 H NMR 스펙트럼, 질량 분석 및 원소 분석을 통해 분석 하였다 복합체. 도 1-6에 표 1에 도시하고 그 결과는 물질의 순도를 확인.

68 창 / 68 조지아 발생기의 용출은 400-600 MBq의 68 조지아의 솔루션을 얻?...

토론

EOB-DTPA 다단계 합성 (33)를 통해 액세스 할 수 있지만 단지 또 gadoxetic 아세트산 함유 사용할 조영제로부터 분리 될 수있다. 이를 위해, 중앙 하나님 (III) 이온은 옥살산의 과잉으로 석출 할 수있다. 하나님 (III), 옥살산 및 옥살산을 제거한 후 리간드을 pH 1.5에서 냉수 침전에 의해 단리 될 수있다. 그러나, 여액 수율 칼럼 크로마토 향상시키기 위해서 대신에 또는 후속 절차로 수행 될 수있다. ...

공개

The authors have nothing to disclose.

감사의 말

The authors have no acknowledgements.

자료

NameCompanyCatalog NumberComments
primovistBayer-0.25 M
gallium(III) chlorideSigma-Aldrich Co.450898
water (deionized)--tap water deionizing equipment by Auma-Tec GmbH
hydrochloric acid 12 MVWR20252.29
sodium hydroxidePolskie Odczynniki Chemiczne S.A.810925429
oxalic acidSigma-Aldrich Co.75688
ethyl acetateBrenntag GmbH10010447
silica gelMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0.063-0.2 mm
TLC silica gel 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
methanolVWR20903.55
ethanolBrenntag GmbH10018366
eiethyletherVWR23807.468stored over KOH plates
ammonia solution (25%)VWR1133.1
pH electrodeVWR662-1657
stirring and heating unitHeidolph505-20000-00
pumpIlmvac GmbH322002
frit-custom design
NMR spectrometerBruker Coorporation-Ultra Shield 400
mass spectrometerThermo Fisher Scientific Inc.-
elemental analyserHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVector EA 3000 CHNS
deuterated water D2Oeuriso-topD21499.90% D
Material/Equipment required for labeling procedures
68Ge/68Ga generatorITG Isotope Technologies Garching GmbHA150
pump and dispenser systemScintomics GmbH-Variosystem
hydrochloric acid 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
water (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
sodium chloride (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
sodium acetate (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
glacial acetic acid (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
sodium citrate dihydrateVEB Laborchemie Apolda10782>98.5%
PS-H+ Cartridge (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.T2036
PBS buffer (tablets)Sigma-Aldrich Co.79382
human serumSigma-Aldrich Co.H4522from human male AB plasma
flasks, columns, etc.custom design
pH electrodeKnick Elektronische Messgeräte GmbH & Co. KG765-Set
binary pump (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
UV Vis detector (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
radioactive detector (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP columnAdvanced Chromatography Technologies Ltd.ACE-1110-1503/A100528
HPLC glass vialsGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipetteEppendorf-
plastic vialsSarstedt AG & Co.6542.007
plastic vialsGreiner Bio-One International GmbH717201
activimeterMED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH-Isomed 2010
tweezerscustom design
incubatorHeraeus Instruments GmbH51008815
vortex mixerFisons-Whirlimixer
centrifugeHeraeus Instruments GmbH75003360
gamma well counterMED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH-Isomed 2100
water for chromatographyMerck KGaA1.15333.2500
acetonitrile for chromatographyMerck KGaA1.00030.2500
trifluoroacetic acidSigma-Aldrich91707
TLC radioactivity scannerraytest Isotopenmessgeräte GmbHB00003875equipped with beta plastic detector

참고문헌

  1. Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
  2. Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln. Radiologe. 44, 1185 (2004).
  3. Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. Primovist, Eovist - what to expect. J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).
  4. Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
  5. Leonhardt, M., et al. Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters. Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).
  6. Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease. J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).
  7. Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. Molecular Imaging with PET. Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).
  8. Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. Radiometals for Combined Imaging and Therapy. Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).
  9. Henze, M., et al. PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas. J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).
  10. Hofmann, M., et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).
  11. Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. Fluorine-18: a new isotope for bone scanning. J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).
  12. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium Radiopharmaceutical Chemistry. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).
  13. Rösch, F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).
  14. Liu, S. The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals. Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).
  15. Haubner, R., et al. Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).
  16. Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function. Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).
  17. Chauhan, K., et al. 68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging. Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).
  18. Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators. Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).
  19. Clevette, D. J., Orvig, C. Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium. Polyhedron. 9, 151-161 (1990).
  20. Prinsen, K., et al. Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography. Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).
  21. Vogl, T. J., et al. Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA. Radiology. 200, 59-67 (1996).
  22. Reimer, P., et al. Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence. Radiology. , 177-183 (1996).
  23. Ba-Ssalamah, A., et al. MRT der Leber. Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).
  24. Scott, R. P. W. . Journal of Chromatography Library. 22A, A137-A160 (1983).
  25. Reichenbaecher, M., Popp, J. . Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , (2007).
  26. Gross, J. H. . Mass Spectrometry: A Textbook. , (2004).
  27. Ma, T. S., Rittner, R. C. . Modern Organic Elemental Analysis. , (1979).
  28. Mueller, D., et al. Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity. Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).
  29. Roberts, T. R. Radio-column chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).
  30. Roberts, T. R. Radio-thin-layer chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).
  31. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium radiopharmaceutical chemistry. Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).
  32. Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates. EJNMMI Res. 2, 13 (2012).
  33. Schmitt-Willich, H., et al. Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).
  34. Zhernosekov, K., Nikula, T. 68Ga generator for positron emission tomography. , (2012).
  35. Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates?. ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).
  36. Baur, B., et al. Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep. Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).
  37. Boros, E., et al. RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga. Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).
  38. Beck, W. S. . Hematology. , (1998).
  39. Patel, V., Morrissey, J. . Practical and Professional Clinical Skills. , (2001).
  40. Bartke, A., Constanti, A. . Basic Endocrinology. , (1998).
  41. Bernstein, L. R. Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium. Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).
  42. Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. 67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components. Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).
  43. Dumont, R. A., et al. Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856. J. Nucl. Med. 52, 1498 (2011).
  44. Pohle, K., et al. 68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process. Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).
  45. Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3. Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).

재인쇄 및 허가

JoVE'article의 텍스트 или 그림을 다시 사용하시려면 허가 살펴보기

허가 살펴보기

더 많은 기사 탐색

11468PETEOB DTPAgadoxetic

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

개인 정보 보호

이용 약관

정책

연구

교육

JoVE 소개

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. 판권 소유