Name: light/dark transition test for mice
Uploaded: 2006-11-13T00:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
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Diese Arbeit wurde unterstützt von Grants-in-Aid for Young Scientists (A) (# 16680015), Grant-in-Aid for Exploratory Research (# 16653065), Grant-in-Aid for Scientific Research auf Schwerpunktbereiche (# 18023022, # 18016012 und # 18053015) vom Ministerium für Bildung, Kultur, Sport, Wissenschaft und Technologie in Japan, Grant-in-Aid aus Förderung der grundlegenden Studien in Health Sciences der National Institute of Biomedical Innovation (NIBIO), Grant-in- Hilfe aus Neuroinformatik Japan Center (NIJC), RIKEN

<ol><li> Die Geräte für die Hell / Dunkel-Übergangs-Test bestand aus einem Käfig (21x42x25 cm) in zwei gleich große Abschnitte durch eine Trennwand mit Tür (Ohara &amp; Co., Tokyo) unterteilt. </li><li> Mäuse sind drei vor vier pro Käfig in einem Zimmer untergebracht mit einem 12 Stunden Licht / Dunkel-Zyklus (Licht an um 07.00 Uhr) mit ad libitum Zugang zu Nahrung und Wasser. Im Idealfall sind zwei Kontrollen und zwei Mutanten zusammen, durch Neuordnung der Mäuse, sobald sie zum Zeitpunkt der Entwöhnung sind genotypisiert untergebracht. Behavioral Tests erfolgt zwischen 9:00 Uhr durchgeführt und 06.00 Uhr alle Käfige mit Mäusen, um das Verhalten Testraum sind 30 min übertragen, bevor der erste Prozess beginnt. </li><li> Eine Kammer ist hell mit weißen Dioden (390 lux) beleuchtet, während die andere Kammer ist dunkel (2 Lux). Mäuse sind in der dunklen Seite gelegt und die Tür wird automatisch 3 Sekunden geöffnet, nachdem die Maus von der Infrarotkamera erkannt wird. Die Tür ist so, dass die Mäuse nicht in die Lichtkammer unmittelbar nach der Veröffentlichung mit ihrer Motivation, von Experimentator zu entkommen, da die Latenzzeit bis zum Lichtkammer geben als ein Index von Angst-ähnliches Verhalten dienen können verwendet werden. </li><li> Mäuse sind erlaubt, sich frei bewegen zwischen den beiden Kammern mit offener Tür für 10 min. Die Anwendung zur Erfassung und Analyse der Verhaltensdaten (Bild LD4) verwendet wird, auf den öffentlichen Bereich Image J-Programm (entwickelt byWayne Rasband am National Institute of Mental Health und unter http://rsb.info.nih.gov/ij Basis /), die von Tsuyoshi Miyakawa (verfügbar über O&#39;Hara &amp; Co., Tokyo, Japan) geändert wurde. </li><li> Die Strecke in jeder Kammer, die Gesamtzahl der Übergänge, verbrachte die Zeit in der jeder Kammer, und die Latenzzeit, das Licht chamberare von Image LD4 Programm aufgezeichnet geben. </li><li> Nach jedem Versuch sind alle Kammern mit super unterchlorige Wasser gereinigt, um eine Vorspannung auf Geruchssinn Basis zu verhindern. </li></ol>

<ol>
	<li>Austin, C. P., Aiba, A., Takao, K., Miyakawa, T., Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T., Crawley, J. N., Crawley, J. N., Crawley, J., Goodwin, F. K., Miyakawa, T., Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+knockout+mouse+project.">The knockout mouse project.</a> Nat Genet. 36, 921-924 (2004).</li></ol>

Alle Verfahren wurden durch die Verwendung von Tieren und Pflege Ausschuss der Universität Kyoto gebilligt. Tsuyoshi Miyakawa mit BIRD, Japan Science and Technology Agency, Saitama, Japan verbunden.

Obwohl alle Maus-Genom-Sequenzen bestimmt wurden, sind die Funktionen der meisten dieser Gene nicht bekannt. Gene-Targeting-Techniken kann jedoch verwendet werden, um zu löschen oder manipulieren ein bestimmtes Gen in Mäusen (Aiba et al, 2007.; Austin et al, 2004.) Werden. Der Einfluss eines bestimmten Gens zu einem bestimmten Verhalten kann dann durch die Durchführung Verhaltensanalysen des mutierten Mäusen (.; Takao et al, 2007 Takao und Miyakawa, 2006) ermittelt werden. Als Test für die Verhaltens-Phänotypisierung von Mausmutanten, die Hell / Dunkel-Übergangs-Test einer der am häufigsten verwendeten Tests zur Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen (Crawley, 2000) zu messen. Der Test basiert auf der natürlichen Abneigung der Mäuse zu hell beleuchteten Bereichen und auf ihre spontane Erkundungsverhalten in neue Umgebungen (Crawley, 1985) basiert. Der Test ist empfindlich auf anxiolytische medikamentöse Behandlung (Crawley, 1985). Der Apparat besteht aus einer dunklen Kammer und eine hell erleuchtete Kammer. Eine eingeschränkte Öffnung, 3 cm hoch und 5 cm breit, verbindet die beiden Kammern. Mäuse sind erlaubt, sich frei bewegen zwischen den beiden Kammern. Die Anzahl der Einträge in das helle Kammer und die Dauer der Zeit gibt es in Form von Indizes von hell-Raum Angst in Mäusen verwendet. Der Hell / Dunkel-Übergangs-Test wurde ursprünglich von Crawley und Kollegen (Crawley und Goodwin, 1980) entwickelt. Es gibt zwei Unterschiede zwischen der Originalfassung und unser Test. Zuerst wird das Licht Kammer größer als die dunkle Kammer, in der ursprünglichen Version, während die Größe der beiden Kammern ist der selbe in unserer Version des Tests. Zweitens, in der ursprünglichen Fassung hatte der Lichtkammer keine Decke und den Wänden der Lichtkammer wurden transparent (Crawley und Goodwin, 1980), während wir Deckweiß Kunststoff für die Decke und den Wänden der Lichtkammer verwenden. Diese Unterschiede, nämlich die Größe und die Offenheit der Lichtkammer, für den gleichzeitigen Nachweis von hell-Raum Angst sowie Open-Space-Angst in der ursprünglichen Version des Tests zu ermöglichen. In unserem Labor, aber Open-Space-Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen in einer erhöhten Plus-Labyrinth getestet. Das undurchsichtige Wände und die Decke, Größe der Lichtkammer und unsere spezifischen hell / dunkel Übergang Testprotokoll ist spezialisierter zum Nachweis von hell-Raum-Angst im Vergleich zu der ursprünglichen Version. Obwohl die Hell / Dunkel-Übergangs-Test und erhöhten Plus-Labyrinth sowohl für die Beurteilung der Angst-Verhalten eingesetzt werden, sind die Ergebnisse nicht immer konsistent. Zum Beispiel verbringen Vorderhirn-spezifischen Calcineurin knockout Mäuse eine verringerte Menge an Zeit in das Licht Kammer in der Hell / Dunkel-Übergangs-Test, sondern eine erhöhte Menge an Zeit in die offenen Arme in die Elevated Plus Maze (Miyakawa et al., 2003) . Wir stellten die Hypothese, dass unsere Hell / Dunkel-Übergangs-Test und erhöhten Plus-Labyrinth-Tests unterschiedliche Aspekte von Angst-ähnliches Verhalten, wie hell-Raum Angst und Open-Space-Angst-ähnliches Verhalten zu beurteilen. Um diese Hypothese zu testen, haben wir eine große Datenmenge gesammelt mit den gleichen Mäusen in beiden Tests. In unserem Labor führen wir Verhaltenstest Batterien, die viele Domains auf dem Bildschirm für die Verhaltens Bedeutung der Gene. Die Testbatterie erfordert mehrere Wochen dauern. Während der Testphase werden Mäusekäfige auf einem Gestell in unserer Einrichtung aufbewahrt. Wenn Mäuse an unser Labor von anderen Institutionen transportiert werden, sind sie für die Umwelt unserer Anlage für mindestens 1 Woche gewöhnt. Nach der Gewöhnung Zeitraum, sind Mäuse, eine allgemeine Gesundheits-Check und neurologischen Screening (Miyakawa et al., 2003) unterzogen, und nach dieser einfachen Untersuchungen, Mäuse sind die Hell / Dunkel-Übergangs-Test unterzogen. Der Test wird in einer schalldichten experimentellen Raum nach 30 min der Gewöhnung an die experimentellen Raum durchgeführt, wie im Film gezeigt. Wir haben mehr als 60 Stämme von gentechnisch mutierten Mäusen unter Verwendung des Protokolls in dem Film gezeigt, bewertet und haben eine große Menge von Rohdaten für mehr als 3000 Mäuse (einschließlich Wildtyp-und mutierten Mäusen). Wir haben Faktorenanalysen, die Vorteile der großen Menge von Rohdaten zu nehmen. Tatsächlich entdeckten wir verschiedene Faktoren, die von jedem Test (unveröffentlichte Daten), obwohl es einige signifikante Korrelationen zwischen den Indizes (unveröffentlichte Daten) .. Diese Daten werden im Rahmen einer öffentlichen Datenbank, die wir jetzt bauen werden offen gelegt werden. In unserem Test-Batterie sind Wildtyp-Geschwister in der Regel als Kontrolle verwendet. Als Hintergrund-Stamm, sind C57BL/6J-Mäuse häufig verwendet. Wir sammelten die Daten von C57BL/6J-Mäuse als Kontrolle von Mausmutanten in der Testbatterie verwendet. Die Indizes von C57BL/6J-Mäuse in unserem hell / dunkel Übergang Test waren wie folgt (n = 795; bedeuten, SEM); Strecke: 846,5 8.88 cm im Lichte Kammer, 1478,5 9,53 cm in die dunkle Kammer, Dauer der Zeit : 215,8 1.85 Š in das Licht, 395,8 1,86 s im Dunkeln; Anzahl der Übergänge zwischen den Kammern: 30.52 0,43; Latenz, um das Licht Kammer eintreten: 64,94 2,40 s. Die Bewegung der Maus rund um die Eingänge zu den Kammern wird von der Kamera erkannt wird und im Laufe der Zeit in beide c verbracht gezähltHambers. Aus diesem Grund verbrachte die Summe der mittleren Dauer der Zeit in das Licht und die, die in dunklen Kammern war größer als die der gesamten Dauer des Tests (600 s). In unserem Protokoll ist eine Maus zuerst in die dunkle Kammer platziert. Drei Sekunden nachdem Sie mit der Maus in die dunkle Kammer, die Tür zwischen den Kammern automatisch geöffnet und die Maus frei bewegen kann zwischen den beiden Kammern. C57BL/6J-Mäuse verbringen weniger Zeit in das Licht Kammer als in der dunklen Kammer (p &lt;0,0001, Dauer, wenn die Zeit in Licht verbracht: 215,8 1.85 Š, der Dauer der Zeit in dunklen verbracht: 316,3 2,11 s [die Zeit im Dunkeln verbracht hat nicht die erste Zeit in der Dunkelheit vor dem Eintritt in die Lichtkammer zum ersten Mal], n = 795, gepaarten t-Test) ausgegeben. Dies deutet darauf hin, dass C57BL/6J-Mäuse die Lichtkammer meiden, und dass die Zeit in das Licht ist ein guter Index der Angst-ähnliches Verhalten. Die Ergebnisse aus verschiedenen Stämmen von mutierten Mäusen gewonnen werden leicht verglichen werden, da alle erhaltenen Daten sind mit dem gleichen Protokoll. Um Phänotypisierung Ergebnisse eines Stammes von mutierten Mäusen, die leicht reproduzierbar und im Vergleich mit Daten von anderen Mutanten, sollte das Verhalten Prüfverfahren werden so identisch wie möglich zwischen den Laboratorien. Crabbe und seine Kollegen testeten die Interaktion zwischen Verhalten der Maus und Labor-Umgebung mit genau der gleichen Inzuchtstämme und eine Null-Mutante. In ihrer Studie wurden die Apparate, Prüfprotokolle und viele Umgebungsvariablen streng standardisiert. Trotz der Standardisierung, fanden sie eine systematische Unterschiede im Verhalten zwischen Laboratorien, obwohl sie erkannt auch unterschiedliche Stämme in alle Verhaltensweisen (Crabbe et al., 1999). Sie berichteten, dass unkontrollierbare Variablen und Experimente charakterisieren Mutanten können die Ergebnisse, dass idiosynkratische zu einem bestimmten Labor ergeben. Die verfahrensrechtlichen Unterschiede zwischen den Labors gibt es schwierig zu replizieren oder vergleichen Sie die Ergebnisse von Labor zu Labor. Hier präsentieren wir unsere Protokoll für die Hell / Dunkel-Übergangs-Test als einen Film, so dass die Details des Protokolls nachgewiesen werden kann. Gründung visuelle Dokumentation des Protokolls wird eine bessere Verständigung über die Einzelheiten der experimentellen Verfahren, ermöglicht eine Standardisierung der Protokolle über Labors und für Vergleiche des Verhaltens Phänotypen verschiedener Stämme von mutierten Mäusen beurteilten mit Hilfe dieses Tests. Filme von anderen Protokollen, wie zum Beispiel für die erhöhten Plus-Labyrinth, offene Feldversuch Porsolt Forced Swim Test, Angstkonditionierung, dass wir in unserem Verhalten Testbatterie werden derzeit zur Veröffentlichung als zukünftige Video Zeitschriftenartikeln gemacht.

light/dark transition test for mice

Obwohl alle Maus-Genom-Sequenzen bestimmt wurden, wissen wir noch nicht wissen, die Funktionen der meisten dieser Gene. Gene-Targeting-Techniken kann jedoch verwendet werden, um zu löschen oder manipulieren ein bestimmtes Gen in Mäusen werden. Der Einfluss eines bestimmten Gens zu einem bestimmten Verhalten kann dann durch die Durchführung Verhaltensanalysen der mutierten Mäusen bestimmt werden. Als Test für die Verhaltens-Phänotypisierung von Mausmutanten, die Hell / Dunkel-Übergangs-Test einer der am häufigsten verwendeten Tests zur Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen zu messen. Der Test basiert auf der natürlichen Abneigung der Mäuse zu hell beleuchteten Bereichen und auf ihre spontane Erkundungsverhalten in neue Umgebungen. Der Test ist empfindlich auf anxiolytische medikamentöse Behandlung. Der Apparat besteht aus einer dunklen Kammer und eine hell erleuchtete Kammer. Mäuse sind erlaubt, sich frei bewegen zwischen den beiden Kammern. Die Anzahl der Einträge in das helle Kammer und die Dauer der Zeit gibt es Indizes der Hell-Raum Angst bei Mäusen. Um Phänotypisierung Ergebnisse eines Stammes von mutierten Mäusen, die leicht reproduzierbar und vergleichbar mit denen anderer Mutanten, sollte die Verhaltens-Prüfverfahren werden so identisch wie möglich zwischen den Laboratorien. Die verfahrensrechtlichen Unterschiede zwischen den Labors gibt, machen es jedoch schwer zu replizieren oder vergleichen Sie die Ergebnisse von Labor zu Labor. Hier präsentieren wir unsere Protokoll für die Hell / Dunkel-Übergangs-Test als einen Film, so dass die Details des Protokolls nachgewiesen werden kann. In unserem Labor haben wir mehr als 60 Stämme von mutierten Mäusen unter Verwendung des Protokolls in dem Film gezeigt, beurteilt. Diese Daten werden als Teil einer öffentlichen Datenbank, die wir jetzt bauen werden offen gelegt werden. Visualisierung des Protokolls erleichtern das Verständnis der Details des gesamten experimentellen Verfahren, ermöglicht eine Standardisierung der Protokolle über Labors und Vergleiche der Verhaltens-Phänotypen der verschiedenen Stämme von mutierten Mäusen beurteilten mit Hilfe dieses Tests.

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Light/dark Transition Test for Mice

Der Hell / Dunkel-Übergangs-Test ist eine der am häufigsten verwendeten Tests zur Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen zu messen. Hier präsentieren wir einen Film, der detaillierte Verfahren, wie wir Verhalten der Test zeigt.

Hell / Dunkel Transition Test für Mäuse

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Research

JoVE Journal

Biology

52.4K Aufrufe.  Graduate School of Medicine, Kyoto University. He did. So what?

Serie: Light/dark Transition Test for Mice

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Sensitive and reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of potential therapeutic treatments in preclinical trials for many neurodegenerative diseases. In Parkinson's disease, sensorimotor tests sensitive to varying degrees of nigrostriatal dysfunction are fundamental for testing the efficacy of potential therapeutics. Reliable and quite elegant sensorimotor measures exist for rats, however many of these tests measure sensorimotor asymmetry within the rat and are not entirely suitable for the newer genetic mouse models of PD. We have put together a battery of sensorimotor tests inspired by the sensitive tests in rats and adapted for mice. The test battery highlighted in this study is chosen for a) its sensitivity in a wide variety of mouse models of PD, b) its ease in implementing into a study, and c) its low expense. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of PD as well as in testing potential disease-modifying therapies.

In Parkinson's disease and movement disorders in general, sensitive and reliable behavioral assays are essential for testing novel potential therapeutics. Here, we describe a manageable battery of sensorimotor tests for mice that are sensitive to varying degrees of injury to the nigrostriatal system and useful for preclinical studies.

Beurteilung der Sensomotorik in Maus-Modellen der Parkinson-Krankheit

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Forschung

Verhalten

Automated, Quantitative Cognitive/Behavioral Screening of Mice: For Genetics, Pharmacology, Animal Cognition and Undergraduate Instruction

We describe a high-throughput, high-volume, fully automated, live-in 24/7 behavioral testing system for assessing the effects of genetic and pharmacological manipulations on basic mechanisms of cognition and learning in mice. A standard polypropylene mouse housing tub is connected through an acrylic tube to a standard commercial mouse test box. The test box has 3 hoppers, 2 of which are connected to pellet feeders. All are internally illuminable with an LED and monitored for head entries by infrared (IR) beams. Mice live in the environment, which eliminates handling during screening. They obtain their food during two or more daily feeding periods by performing in operant (instrumental) and Pavlovian (classical) protocols, for which we have written protocol-control software and quasi-real-time data analysis and graphing software. The data analysis and graphing routines are written in a MATLAB-based language created to simplify greatly the analysis of large time-stamped behavioral and physiological event records and to preserve a full data trail from raw data through all intermediate analyses to the published graphs and statistics within a single data structure. The data-analysis code harvests the data several times a day and subjects it to statistical and graphical analyses, which are automatically stored in the &#34;cloud&#34; and on in-lab computers. Thus, the progress of individual mice is visualized and quantified daily. The data-analysis code talks to the protocol-control code, permitting the automated advance from protocol to protocol of individual subjects. The behavioral protocols implemented are matching, autoshaping, timed hopper-switching, risk assessment in timed hopper-switching, impulsivity measurement, and the circadian anticipation of food availability. Open-source protocol-control and data-analysis code makes the addition of new protocols simple. Eight test environments fit in a 48 in x 24 in x 78 in&#160;cabinet; two such cabinets (16 environments) may be controlled by one computer.

Fully automated system for measuring physiologically meaningful properties of the mechanisms mediating spatial localization, temporal localization, duration, rate&#160;and probability estimation, risk assessment, impulsivity, and the accuracy and precision of memory, in order to assess the effects of genetic and pharmacological manipulations on foundational mechanisms of cognition in mice.

Automatisierte, Quantitative Kognition / Verhalten Screening der Mäuse: Für Genetik, Pharmakologie, Animal Cognition und Undergraduate-Unterricht

We describe a high-throughput, high-volume, fully automated, live-in 24/7 behavioral testing system for assessing the effects of genetic and ...

Measuring Circadian and Acute Light Responses in Mice using Wheel Running Activity

Circadian rhythms are physiological functions that cycle over a period of approximately 24 hours (circadian- circa: approximate and diem: day)1, 2. They are responsible for timing our sleep/wake cycles and hormone secretion. Since this timing is not precisely 24-hours, it is synchronized to the solar day by light input. This is accomplished via photic input from the retina to the suprachiasmatic nucleus (SCN) which serves as the master pacemaker synchronizing peripheral clocks in other regions of the brain and peripheral tissues to the environmental light dark cycle3-7. The alignment of rhythms to this environmental light dark cycle organizes particular physiological events to the correct temporal niche, which is crucial for survival8. For example, mice sleep during the day and are active at night. This ability to consolidate activity to either the light or dark portion of the day is referred to as circadian photoentrainment and requires light input to the circadian clock9. Activity of mice at night is robust particularly in the presence of a running wheel. Measuring this behavior is a minimally invasive method that can be used to evaluate the functionality of the circadian system as well as light input to this system. Methods that will covered here are used to examine the circadian clock, light input to this system, as well as the direct influence of light on wheel running behavior.

This article will review methods that can be used to determine circadian function and light responsiveness in mice.

Mess-und Circadian Akute Licht Responses in Mäuse mit Rad Laufen Activity

Circadian rhythms are physiological functions that cycle over a period of approximately 24 hours (circadian- circa: approximate and diem: day)1, 2.  They ...

Neurowissenschaften

Elevated Plus Maze for Mice

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given gene on a specific behavior can be determined by behavioral analysis of mutant mice. If a target gene is expressed in the brain, behavioral phenotype of the mutant mice could elucidate the genetic mechanism of normal behaviors. The elevated plus maze test is one of the most widely used tests for measuring anxiety-like behavior. The test is based on the natural aversion of mice for open and elevated areas, as well as on their natural spontaneous exploratory behavior in novel environments. The apparatus consists of open arms and closed arms, crossed in the middle perpendicularly to each other, and a center area. Mice are given access to all of the arms and are allowed to move freely between them. The number of entries into the open arms and the time spent in the open arms are used as indices of open space-induced anxiety in mice. Unfortunately, the procedural differences that exist between laboratories make it difficult to duplicate and compare results among laboratories. Here, we present a detailed movie demonstrating our protocol for the elevated plus maze test. In our laboratory, we have assessed more than 90 strains of mutant mice using the protocol shown in the movie. These data will be disclosed as a part of a public database that we are now constructing.
Visualization of the protocol will promote better understanding of the details of the entire experimental procedure, allowing for standardization of the protocols used in different laboratories and comparisons of the behavioral phenotypes of various strains of mutant mice assessed using this test. 


The elevated plus maze test is one of the most widely used tests for measuring anxiety-like behavior in mice. Here, we present a movie showing the detailed procedures for conducting the test.

Elevated Plus Maze für Mäuse

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given ...

Biologie

Light Preference Assay to Study Innate and Circadian Regulated Photobehavior in Drosophila Larvae

Light acts as environmental signal to control animal behavior at various levels. The Drosophila larval nervous system is used as a unique model to answer basic questions on how light information is processed and shared between rapid and circadian behaviors. Drosophila larvae display a stereotypical avoidance behavior when exposed to light. To investigate light dependent behaviors comparably simple light-dark preference tests can be applied. In vertebrates and arthropods the neural pathways involved in sensing and processing visual inputs partially overlap with those processing photic circadian information. The fascinating question of how the light sensing system and the circadian system interact to keep behavioral outputs coordinated remains largely unexplored. Drosophila is an impacting biological model to approach these questions, due to a small number of neurons in the brain and the availability of genetic tools for neuronal manipulation. The presented light-dark preference assay allows the investigation of a range of visual behaviors including circadian control of phototaxis.

Light Preference Assay to Study Innate and Circadian Regulated Photobehavior in Drosophila Larvae

Here we describe a light-dark preference test for Drosophila larva. This assay provides information about innate and circadian regulation of light sensing and processing photobehavior.

Licht Vorlieben Assay zur angeborenen und Circadian geregelten Photobehavior in Studie<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven

Light acts as environmental signal to control animal behavior at various levels. The Drosophila larval nervous system is used as a unique model to answer ...

Investigating Migraine-Like Behavior Using Light Aversion in Mice

Migraine is a complex neurological disorder characterized by headache and sensory abnormalities, such as hypersensitivity to light, observed as photophobia. Whilst it is impossible to confirm that a mouse is experiencing migraine, light aversion can be used as a behavioral surrogate for the migraine symptom of photophobia. To test for light aversion, we utilize the light/dark assay to measure the time mice freely choose to spend in either a light or dark environment. The assay has been refined by introducing two critical modifications: pre-exposures to the chamber prior to running the test procedure and adjustable chamber lighting, permitting the use of a range of light intensities from 55 lux to 27,000 lux. Because the choice to spend more time in the dark is also indicative of anxiety, we also utilize a light-independent anxiety test, the open field assay, to distinguish anxiety from light-aversive behavior. Here, we describe a modified test paradigm for the light/dark and open field assays. The application of these assays is described for intraperitoneal injection of calcitonin gene-related peptide (CGRP) in two mouse strains and for optogenetic brain stimulation studies.

Rodents are not able to report migraine symptoms. Here, we describe a manageable test paradigm (light/dark and open field assays) to measure light aversion, one of the most common and bothersome symptoms in patients with migraines.

Untersuchung von migräneähnlichem Verhalten mit Lichtaversion bei Mäusen

Migraine is a complex neurological disorder characterized by headache and sensory abnormalities, such as hypersensitivity to light, observed as ...

A Phenotyping Regimen for Genetically Modified Mice Used to Study Genes Implicated in Human Diseases of Aging

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to lessen the impact of debilitating conditions but remain elusive in many cases. Only by understanding the causes and pathology of diseases associated with aging, can scientists begin to identify potential therapeutic targets and develop strategies for intervention. The most common age-related conditions are neurodegenerative disorders such as Parkinson's disease and blindness. Age-related macular degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the elderly. Genome wide association studies have previously identified loci that are associated with increased susceptibility to this disease and identified two regions of interest: complement factor H (CFH) and the 10q26 locus, where the age-related maculopathy susceptibility 2 (ARMS2) and high-temperature requirement factor A1 (HtrA1) genes are located. CFH acts as a negative regulator of the alternative pathway (AP) of the complement system while HtrA1 is an extracellular serine protease. ARMS2 is located upstream of HtrA1 in the primate genome, although the gene is absent in mice. To study the effects of these genes, humanized knock-in mouse lines of Cfh and ARMS2, knockouts of Cfh, HtrA1, HtrA2, HtrA3 and HtrA4 as well as a conditional neural deletion of HtrA2 were generated. Of all the genetically engineered mice produced only mice lacking HtrA2, either systemically or in neural tissues, displayed clear phenotypes. In order to examine these mice thoroughly and systematically, an initial phenotyping schedule was established, consisting of a series of tests related to two main diseases of interest: AMD and Parkinson's. Genetically modified mice can be subjected to appropriate experiments to identify phenotypes that may be related to the associated diseases in humans. A phenotyping regimen with a mitochondrial focus is presented here alongside representative results from the tests of interest.

A reverse-genetics approach to understanding gene families associated with human disease is presented, using mouse as a model system, and the subsequent mouse phenotyping schedule is described. Because mice defective in a gene of interest, HtrA2, manifested Parkinsonian symptoms, the phenotyping regimen is focused on identifying neurological defects.

Eine Phänotypisierung Regimen für genetisch modifizierte Mäuse verwendet, um Gene in menschlichen Krankheiten des Alterns Beteiligt Study

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to ...

Medizin

A Custom Multiphoton Microscopy Platform for Live Imaging of Mouse Cornea and Conjunctiva

Conventional histological analysis and cell culture systems are insufficient to simulate in vivo physiological and pathological dynamics completely. Multiphoton microscopy (MPM) has become one of the most popular imaging modalities for biomedical study at cellular levels in vivo, advantages include high resolution, deep tissue penetration and minimal phototoxicity. We have designed an MPM imaging platform with a customized mouse eye holder and a stereotaxic stage for imaging ocular surface in vivo. Dual fluorescent protein reporter mouse enables visualization of cell nuclei, cell membranes, nerve fibers, and capillaries within the ocular surface. In addition to multiphoton fluorescence signals, acquiring second harmonic generation (SHG) simultaneously allows for the characterization of collagenous stromal architecture. This platform can be employed for intravital imaging with accurate positioning across the entire ocular surface, including cornea and conjunctiva.

Presented here is a multiphoton microscopic platform for live mouse ocular surface imaging. Fluorescent transgenic mouse enables the visualization of cell nuclei, cell membranes, nerve fibers and capillaries within the ocular surface. Non-linear second harmonic generation signals derived from collagenous structures provide label-free imaging for stromal architectures.

Eine benutzerdefinierte Multiphotonen-Mikroskopie-Plattform für Live-Bildgebung von Maus-Cornea und Konjunktiva

Conventional histological analysis and cell culture systems are insufficient to simulate in vivo physiological and pathological dynamics completely. ...

Biotechnik

Light Spot-Based Assay for Analysis of Drosophila Larval Phototaxis

The larvae of Drosophila melanogaster show obvious light-avoiding behavior during the foraging stage. Drosophila larval phototaxis can be used as a model to study animal avoidance behavior. This protocol introduces a light-spot assay to investigate larval phototactic behavior. The experimental set-up includes two main parts: a visual stimulation system that generates the light spot, and an infrared light-based imaging system that records the process of larval light avoidance. This assay allows tracking of the behavior of larva before entering, during encountering, and after leaving the light spot. Details of larval movement including deceleration, pause, head casting, and turning can be captured and analyzed using this method.

Light Spot-Based Assay for Analysis of Drosophila Larval Phototaxis

This protocol introduces a light-spot assay to investigate Drosophila larval phototactic behavior. In this assay, a light spot is generated as light stimulation, and the process of larval light avoidance is recorded by an infrared light-based imaging system.

Licht-Spot-basierter Assay zur Analyse von Drosophila Larval Phototaxis

The larvae of Drosophila melanogaster show obvious light-avoiding behavior during the foraging stage. Drosophila larval phototaxis can be used as a model ...

Light-Dark Preference Test: A Method to Study Anxiety-Related Behavior in Zebrafish

Source: Holcombe, A., et al. <a href="https://www.jove.com/v/51851/" target="_blank">A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish (Danio rerio) and the Quantification of Withdrawal</a>. &#160;J. Vis. Exp.&#160;(2014)
The video describes the light-dark preference assay to study the anxiety-related behavior in zebrafish following the exposure to ethanol.

Hell-Dunkel-Präferenztest: Eine Methode zur Untersuchung von Angstverhalten bei Zebrafischen

Source: Holcombe, A., et al. A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish (Danio rerio) and the Quantification of Withdrawal. &#160;J. Vis. ...