Diese Arbeit wurde unterstützt von Grants-in-Aid for Scientific Research des japanischen Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften (JSPS), Grant-in-Aid vom Ministerium für Bildung, Kultur, Sport, Wissenschaft und Technologie in Japan, Grants-in- Hilfe von BIRD und CREST der Japan Science and Technology Agency, Grant-in-Aid aus Neuroinformatik Japan Center (NIJC), RIKEN und von Grant-in-Aid for Scientific Research auf Schwerpunktbereiche-Integrative Hirnforschung (Shien) - von MEXT in Japan. Wir danken O&#39;hara &amp; Co. und Mariko Hayashi für ihre Unterstützung bei der Erstellung dieser Film.

Protokoll <ol><li> Die Geräte für die erhöhten Plus-Labyrinth-Test verwendet wird in der Konfiguration der a + und besteht aus zwei offenen Armen (25 x 5 x 0,5 cm) einander gegenüber und senkrecht zu zwei geschlossenen Armen (25 x 5 x 16 cm) mit einem Zentrum Plattform (5 x 5 x 0,5 cm). Die offenen Armen haben einen sehr kleinen (0,5 cm) Wand, um die Anzahl der Stürze zu verringern, während die geschlossenen Arme eine hohe (16 cm) Wand haben, um den Arm legen. Die gesamte Apparatur wird 50 cm über dem Boden (Ohara &amp; Co., Tokyo) und ist in eine leere Rundbecken (100 cm Durchmesser, 35 cm hoch; normalerweise für den Morris Water Maze Aufgabe verwendet) platziert, um die Mäuse, oder Sturz zu schützen Versuch, während des Experiments zu entkommen. Der Apparat besteht aus Kunststoff. Die Plattform ist weiß und die Wände sind transparent. Es ist eine Variation in Materialien und Farben der Vorrichtung der erhöhten Plus-Labyrinth. </li><li> Mäuse mit einer 12-h Licht / Dunkel-Zyklus (Licht an um 07.00 Uhr) untergebracht sind, wie zuvor beschrieben (Takao &amp; Miyakawa, 2006a). Behavioral Tests erfolgt zwischen 9:00 Uhr durchgeführt und 06.00 Uhr. Alle experimentellen Mäuse sind, um das Verhalten Testraum 30 min vor Beginn der ersten Studie, die an die Bedingung des Verhaltens Testraum gewöhnen übertragen. Die Reihenfolge der Versuche wird über Genotypen gegenüber. Es gibt zwei Zwecke der Testversuch mit einer Praxis Tier. Eines ist sicher, dass alles in Ordnung mit der Aufnahme ist. Ein weiterer Grund ist die Testbedingungen so einheitlich wie möglich zu halten. Das heißt, würde die erste Maus in der gesamten Sitzung etwas anders Zustand mit anderen (dh ohne vorherige Geräusche, die durch Tests Operationen und kein Geruch Hinweise aus früheren Studien gemacht) Erfahrung, ohne eine solche Praxis-Studie. Die Tiere sind nach den Richtlinien der Animal Research Committee der Kyoto University gepflegt. </li><li> Das Verhalten Testraum (170 x 210 x 200 cm, Ohara &amp; Co., Tokyo) ist schallisoliert und die Helligkeit liegt bei 100 lux gehalten. Eine Maus ist im mittleren Bereich des Labyrinths mit dem Kopf in Richtung einer geschlossenen Arm gerichtet sein muß. Das Elevated Plus Maze Test erfasst mit einer Videokamera an einen Computer angeschlossen, die von einem Remote-Gerät gesteuert wird. Die Anzahl der Einträge (ein Eintrag als das Zentrum der Masse der Maus in den Arm definiert) in jedem Arm und die Zeit in den offenen Armen verbracht werden aufgezeichnet und diese Messungen dienen als Index der Angst-ähnliches Verhalten. </li><li> Mäuse sind erlaubt, sich frei bewegen das Labyrinth für 10 min. Jede Maus erhält eine Studie in unserem Test-Batterie. Die Anwendung zur Erfassung und Analyse der Verhaltensdaten (Image EP) verwendet wird, auf den öffentlichen Bereich Image J-Programm (entwickelt von Wayne Rasband am National Institute of Mental Health und verfügbar auf <a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/">http://rsb.info.nih.gov/ ij /</a> ), die von Tsuyoshi Miyakawa (verfügbar über O&#39;Hara &amp; Co., Tokyo, Japan) geändert wurde. </li><li> Die Strecke, die Anzahl der Einträge in jedem Arm, verbrachte die Zeit in jedem Arm, und der prozentuale Anteil der Eintritte in die offenen Arme sind von der Bild-EP-Programm berechnet. </li><li> Nach jedem Versuch, alle Armen und im mittleren Bereich mit super unterchlorige Wasser, dass eine effiziente Geruchsbeseitigung Agent ist und relativ schwache Geruch von sich selbst im Vergleich zu anderen Reinigungslösungen, um eine Vorspannung auf Geruchssinn basiert verhindern gereinigt. So können wir die Tests unter kontrollierten Bedingungen bezüglich Geruchssinn leiten. </li></ol>

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	<li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light/dark+transition+test+for+mice.">Light/dark transition test for mice.</a> J Vis Exp. , (2006).</li><li>Aiba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+liaison+for+integrative+brain+research.">Mouse liaison for integrative brain research.</a> Neurosci Res. 58, 103-104 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+knockout+mouse+project.">The knockout mouse project.</a> Nat Genet. 36, 921-924 (2004).</li><li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders:+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice.">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann N Y Acad Sci. 1086, 144-159 (2006).</li><li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+brain-behavior+phenotyping+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders.">Impact of brain-behavior phenotyping of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci Res. 58, 124-1232 (2007).</li><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> What's Wrong With My Mouse? Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , 240 (2007).</li><li>Rodgers, R. J., Dalvi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anxiety,+defense+and+the+elevated+plus-maze.">Anxiety, defense and the elevated plus-maze.</a> Neurosci Behav Rev. 21, 801-810 (1997).</li><li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+'fear'-motivated+behaviour.">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 324, 1-5 (1984).</li><li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+open:closed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat.">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Meth. 14, 149-167 (1985).</li><li>File, S. E., Pellow, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+triazolobenzodiazepines+in+two+animal+tests+of+anxiety+and+in+the+holeboard.">The effects of triazolobenzodiazepines in two animal tests of anxiety and in the holeboard.</a> Br J Pharmac. 86, 729-7235 (1985).</li><li>Lister, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+a+plus-maze+to+measure+anxiety+in+the+mouse.">The use of a plus-maze to measure anxiety in the mouse.</a> Psychopharmacology. 92, 180-185 (1987).</li><li>Miyakawa, T., Yagi, T., Kagiyama, A., Niki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radial+maze+performance,+open-field+and+elevated+plus-maze+behaviors+in+Fyn-kinase+deficient+mice:+further+evidence+for+increased+fearfulness.">Radial maze performance, open-field and elevated plus-maze behaviors in Fyn-kinase deficient mice: further evidence for increased fearfulness.</a> Brain Res Mol Brain Res. 37, 145-150 (1996).</li><li>Manabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+cadherin-11+adhesion+receptor+enhances+plastic+changes+in+hippocampal+synapses+and+modifies+behavioral+responses.">Loss of cadherin-11 adhesion receptor enhances plastic changes in hippocampal synapses and modifies behavioral responses.</a> Mol Cell Neurosci. 15, 534-546 (2000).</li><li>Miyakawa, T., Yamada, M., Duttaroy, A., Wess, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivity+and+intact+hippocampus-dependent+learning+in+mice+lacking+the+M1+muscarinic+acetylcholine+receptor.">Hyperactivity and intact hippocampus-dependent learning in mice lacking the M1 muscarinic acetylcholine receptor.</a> J Neurosci. 21, 5239-5250 (2001).</li><li>Seeger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M2+muscarinic+acetylcholine+receptor+knockout+mice+show+deficits+in+behavioral+flexibility,+working+memory,+and+hippocampal+plasticity.">M2 muscarinic acetylcholine receptor knockout mice show deficits in behavioral flexibility, working memory, and hippocampal plasticity.</a> J Neurosci. 24, 10117-10127 (2004).</li><li>Morishima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+cocaine+responsiveness+and+impaired+motor+coordination+in+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+2+knockout+mice.">Enhanced cocaine responsiveness and impaired motor coordination in metabotropic glutamate receptor subtype 2 knockout mice.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 102, 4170 (2005).</li><li>Miyamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tight+junctions+in+Schwann+cells+of+peripheral+myelinated+axons:+a+lesson+from+claudin-19-deficient+mice.">Tight junctions in Schwann cells of peripheral myelinated axons: a lesson from claudin-19-deficient mice.</a> J Cell Biol. 169, 527-538 (2005).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NFAT+dysregulation+by+increased+dosage+of+DSCR1+and+DYRK1A+on+chromosome+21.">NFAT dysregulation by increased dosage of DSCR1 and DYRK1A on chromosome 21.</a> Nature. 441, 595-600 (2006).</li><li>Hattori, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enriched+environments+influence+depression-related+behavior+in+adult+mice+and+the+survival+of+newborn+cells+in+their+hippocampi.">Enriched environments influence depression-related behavior in adult mice and the survival of newborn cells in their hippocampi.</a> Behav Brain Res. 180, 69-76 (2007).</li><li>Niemann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+ablation+of+NMDA+receptor+subunit+NR3B+in+mouse+reveals+motoneuronal+and+non-motoneuronal+phenotypes.">Genetic ablation of NMDA receptor subunit NR3B in mouse reveals motoneuronal and non-motoneuronal phenotypes.</a> Europ J Neurosci. 26, 1407-1420 (2007).</li><li>Sano, H., Nagai, Y., Miyakawa, T., Shigemoto, R., Yokoi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+social+interaction+in+mice+deficient+of+the+striatal+medium+spiny+neuron-specific+phosphodiesterase+10A2.">Increased social interaction in mice deficient of the striatal medium spiny neuron-specific phosphodiesterase 10A2.</a> J Neurochem. 105, 546-556 (2008).</li><li>Horii, Y., Yamasaki, N., Miyakawa, T., Shiosaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+anxiety-like+behavior+in+neuropsin+(kallikrein-related+peptidase+8)+gene-deficient+mice.">Increased anxiety-like behavior in neuropsin (kallikrein-related peptidase 8) gene-deficient mice.</a> Behav Neurosci. 122, 498-504 (2008).</li><li>Fukuda, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+protocadherin-&#945;,+A+isoforms+in+mice+changes+contextual+fear+conditioning+and+spatial+working+memory.">Down-regulation of protocadherin-&#945;, A isoforms in mice changes contextual fear conditioning and spatial working memory.</a> Eur J Neurosci. , .</li><li>Ikeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+YWHAE,+a+gene+encoding+14-3-3epsilon,+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia.">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Behav Neurosci. , .</li><li>Korte, S. M., De Boer, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+animal+model+of+state+anxiety:+fear-potentiated+behaviour+in+the+elevated+plus-maze.">A robust animal model of state anxiety: fear-potentiated behaviour in the elevated plus-maze.</a> Eur J Phamacol. 463, 163-175 (2003).</li><li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety.">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54, 21-30 (1996).</li><li>Holmes, A., Parmigiani, S., Ferrari, P. F., Palanza, P., Rodgers, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+profile+of+wild+mice+in+the+elevated+plus-maze+test+for+anxiety.">Behavioral profile of wild mice in the elevated plus-maze test for anxiety.</a> Physiol Behav. 71, 509-516 (2000).</li><li>Tsujimura, A., Matsuki, M., Takao, K., Yamanishi, K., Miyakawa, T., Hashimoto-Gotoh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+lacking+the+kf-1+gene+exhibit+increased+anxiety-+but+not+despair-like+behavior.">Mice lacking the kf-1 gene exhibit increased anxiety- but not despair-like behavior.</a> Front. Behav. Neurosci. 10, (2008).</li><li>Nakajima, R., Takao, K., SM, H. u. a. n. g., Takano, J., Iwata, N., Miyakawa, T., Saido, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+Behavioral+Phenotyping+of+Calpastatin-Knockout+Mice.">Comprehensive Behavioral Phenotyping of Calpastatin-Knockout Mice.</a> Molecular Brain. , .</li><li>Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+calcineurin+knockout+mice+exhibit+multiple+abnormal+behaviors+related+to+schizophrenia.">Conditional calcineurin knockout mice exhibit multiple abnormal behaviors related to schizophrenia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 8987-8992 (2003).</li><li>Yamasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factor+analyses+of+large-scale+data+justify+the+behavioral+test+battery+strategy+to+reveal+the+functional+significances+of+the+genes+expressed+in+the+brain.">Factor analyses of large-scale data justify the behavioral test battery strategy to reveal the functional significances of the genes expressed in the brain.</a> , (1985).</li><li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Scienc. 284, 1670-1672 (1999).</li></ol>

Alle Verfahren wurden durch die Verwendung von Tieren und Pflege Ausschuss der Universität Kyoto gebilligt.

Obwohl die Maus-Genom sequenziert wurde, sind die Funktionen der meisten Gene nicht bekannt. Gentechnischer Methoden erlauben das Löschen oder sonstige Manipulation eines bestimmten Gens in Mäusen (Austin et al, 2004;.. Aiba et al, 2007). Der Einfluss eines bestimmten Gens zu einem bestimmten Verhalten kann dann durch die Durchführung Verhaltensanalysen des mutierten Mäusen (.; Takao et al, 2007 Takao und Miyakawa, 2006b) ermittelt werden. Die erhöhten Plus-Labyrinth-Test ist einer der beliebtesten Tests aller derzeit verfügbaren Tiermodellen der Angst (Rodgers und Dalvi, 1997; Crawley, 2007). Dieser Test für Angst-ähnliches Verhalten hat für das Screening und Phänotypisierung transgener und Knockout-Mäusen (Crawley, 1999) und für die Wirkstoffentwicklung eingesetzt (. Hogg et al 1996; Crawley, 2007). Die erhöhten Plus-Labyrinth-Test hat eine starke prognostische Validität für das Screening von Anxiolytika (Rodgers und Dalvi, 1997; Mechiel Korte und De Boer, 2003; Crawley, 2007); Anxiolytika gezielt zu erhöhen, und anxiogenen Medikamente gezielt zu verringern, die Anzahl der Einträge in die offenen Arme und die Zeit dort verbracht. Die Gesamtzahl der Einträge Partitur und Gesamtstrecke werden als ein brauchbarer Index der allgemeinen Aktivität. Insgesamt Einträge der Gäste ist auch ein Index der Angst, und die Prozentsätze der Einträge und die Uhrzeit in jedem Arm verbracht bilden den Index der primären Angst (Rodgers und Dalvi, 1997, Mechiel Korte und De Boer, 2003). Die offenen und geschlossenen Arme sind als die gleichen explorative Laufwerk hervorrufen, daher Vermeidung des offenen Armen wird als eine Folge der Induktion von höheren Ebenen der Angst (Rodgers und Dalvi, 1997). Es wird vermutet, dass die Abneigung von Mäusen um die offenen Arme des Labyrinths zu entdecken, ist von der Angst vor offenen und erhöhten Räumen verursacht. Im Jahr 1984 berichteten Handley und Mithani auf Vorarbeiten mit der erhöhten X (plus) Labyrinth-Test beschrieben. Die ursprüngliche Prüfgerät wurde 70 cm über dem Boden erhoben, und bestand aus zwei geschlossenen und zwei offenen Armen, von denen jede 45 cm lang und 10 cm breite gemessen. In ihrer ersten Studien, berichteten sie das Verhältnis von offen / total arm Einträge (Handley und Mithani, 1984). Anschließend wurden andere Indizes entwickelt, enthalten die Anzahl der Einträge in den geschlossenen und offenen Armen und die Zeit in der geschlossenen und offenen Armen für Ratten (Pellow et al, 1985; Pellow und File, 1986) verbrachte und Mäuse (Lister, 1987) . Änderungen an den Elevated Plus Maze Test beinhaltet eine Verlängerung sowohl der offenen Armen (50 x 10 cm) und geschlossenen Arme (50 x 10 x 40 cm) mit hohen umgebenden Wände und offenem Dach auf die geschlossenen Arme, und das gesamte Labyrinth wurde erhöht zu einer Höhe von 50 cm (Pellow et al, 1985; Pellow und File, 1986). Derzeit in unserem Labor ist das Elevated Plus Maze Test Apparat in der Form a + konfiguriert, mit zwei offenen Armen (25 x 5 cm, mit einem sehr leichten, 0,5-cm-, Wand-) einander gegenüber und senkrecht zu zwei Manabe et al, 2000;; Miyakawa et al, 2001; Seeger et al, 2004; Morishima et al, 2005 geschlossenen Arme (25 x 5 x 16 cm) und ist 50 cm über dem Boden (Miyakawa et al, 1996 erhöht; Miyamoto et al, 2005; Pfeil et al, 2006; Hattori et al, 2007; Niemann et al, 2007; Sano et al, 2008; Horii et al, 2008; Fukuda et al, 2008; Ikeda et al; 2008). Die Maus ist in der Mitte der + (5 cm x 5 cm) platziert und erlaubt ist, um das Labyrinth frei erkunden. Obwohl 5 min Aufnahme ist üblich, ist das Verhalten für 10 min in unserem Protokoll aufgezeichnet, um die Möglichkeit, den Phänotyp zu erkennen zu erhöhen. Die offenen und geschlossenen angehobenen Armen induzieren ein Explorations-Konflikt (Mechiel Korte und De Boer, 2003; Crawley, 2007). Die Maßnahmen der erhöhten Plus-Labyrinth-Test werden durch einen Beobachter während des Experiments aufgezeichnet. In unserem Labor wird der Test mit einer Videokamera an einen Computer angeschlossen und die Verhaltensdaten (Image EP) werden erfasst und analysiert mit dem Image EP-Programm aufgenommen. Anzahl der Einträge auf den offenen Armen im Vergleich zur Anzahl der insgesamt Arm-Einträge, und die Zeit auf den offenen Armen gegenüber geschlossenen Armen verbracht, liefern die Maßnahmen der Angst-ähnliches Verhalten. Wir beurteilen mehr als 90 Stämme von gentechnisch mutierten Mäusen unter Verwendung des Protokolls in dem Film gezeigt und haben eine große Menge von Rohdaten für mehr als 5000 Mäuse (einschließlich Wildtyp-und mutierten Mäusen). In unserem Test-Batterie sind Wildtyp-Geschwister in der Regel als Kontrolle verwendet. Als Hintergrund-Stamm, sind C57BL/6J-Mäuse weit verbreitet. Wir sammelten die Daten von C57BL/6J-Mäuse in den Verhaltenstests. Die Werte aus C57BL/6J-Mäuse in unserer Elevated Plus Maze Test erhalten sind wie folgt (n = 914; bedeuten, SEM); insgesamt zurückgelegte Strecke: 1.547,55 14.27 cm; Dauer der Zeit: 56,49 2,42 s (offenen Armen), 384,02 3,13 s (geschlossenen Arme), 161,90 2,17 s (Labyrinth-Zentrum); verbrachte Verhältnis der Zeit in die offenen Arme: 9.19 0.36%, das Verhältnis der Zeit in der geschlossenen Armen verbracht: 63,82 0,52%; Anzahl der Einträge: 7.64 0.21 (offenen Armen), 24,32 0,28 (geschlossenen Arme);% geöffnet Arm Einträge: 21,9 0,05% geschlossenen Arme Einträge: 78,1 0,05. C57BL/6J-Mäuse verbringen weniger Zeit in offenen Armen als in geschlossenen Arme (p &lt;0,0001, n = 914, paired-t test). Dies deutet darauf hin, dass C57BL/6J-Mäuse um die offenen Arme meiden, und dass die Zeit in die offenen Arme ist ein gültiger Index der Angst-ähnliches Verhalten. Darüber hinaus ist die Reihenfolge der Versuche über Genotypen ausgeglichen, weil der Prozess Anzahl wirkt sich auf die Zeit in den offenen Armen und der Center-Plattform ausgegeben. Das heißt, die Indizes aller zu erhöhen während die 3. und 4. Mäusen im Vergleich zum 1. Mäusen (p = 0,0089, n = 476) (unveröffentlichte Daten). Mit unserem Protokoll, zeigte die Analyse von mehr als 1661 Mäuse, die die Reihenfolge der Mäuse in einem Käfig getestet keinen signifikanten Einfluss auf den offenen Arm Verweildauer (unveröffentlichte Daten). Das heißt, die Leistungen der ersten Mäuse aus dem Käfig genommen nicht wesentlich von denen der zweiten unterscheiden, die dritte oder die letzte Mäusen. Obwohl die erhöhten Plus-Labyrinth-Test und der Hell / Dunkel-Übergangs-Test sowohl für die Beurteilung der Angst-Verhalten eingesetzt werden, sind die Ergebnisse nicht immer zwischen ihnen (in Übereinstimmung Holmes et al, 2000; Tujimura et al, 2008; Nakajima et al, in press ) Zum Beispiel verbringen Vorderhirn-spezifischen Calcineurin-Knockout-Mäusen eine verminderte Menge an Zeit in das Licht Kammer in der Hell / Dunkel-Übergangs-Test, aber eine erhöhte Menge an Zeit in die offenen Arme in die Elevated Plus Maze Test (Miyakawa et al. , 2003). Factor Analyse unserer Verhaltenstest Batterie anzeigt, dass die erhöhten Plus-Labyrinth-Test und der Hell / Dunkel-Übergangs-Test verschiedene Aspekte von Angst-ähnliches Verhalten, wie hell-Raum-Angst in der Hell / Dunkel-Übergang Test-und Open-Space-Angst-wie beurteilen Verhalten im Freiland testen (Takao und Miyakawa, 2006b; Yamasaki et al, 2006). Dementsprechend sind sowohl die Hell / Dunkel-Übergangs-Test und der erhöhten Plus-Labyrinth-Test in unserem Verhalten Testbatterie beinhaltete. Crabbe und seine Kollegen berichteten, dass unkontrollierte Variablen und Experimente charakterisieren Mutanten können die Ergebnisse, die spezifisch für ein bestimmtes Labor (Crabbe et al., 1999) sind zu erhalten. Die verfahrensrechtlichen Unterschiede zwischen den Labors gibt es schwierig zu replizieren oder vergleichen Sie die Ergebnisse unter ihnen. Gründung visuelle Dokumentation des Protokolls wird die Förderung eines besseren Verständnisses der experimentellen Verfahren, beurteilt ermöglicht eine Standardisierung der Protokolle über Labors und für Vergleiche des Verhaltens Phänotypen verschiedener Stämme von mutierten Mäusen verwendet mit diesen Tests. Wir zuvor veröffentlichten Film Protokoll der Hell / Dunkel-Übergangs-Test (Takao und Miyakawa, 2006a). Ebenso, Filme von anderen Protokollen, wie für den offenen Feldversuch, der Porsolt Swim Test gezwungen, und Angstkonditionierung Tests, die wir in unserem Verhalten Testbatterie werden derzeit zur Veröffentlichung als zukünftige Video Zeitschriftenartikeln gemacht.

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<td>Elevated plus maze</td>
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<td>O&#x2019;hara & Co.</td>
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elevated plus maze for mice

Obwohl die Maus-Genom ist nun vollständig sequenziert sind die Funktionen der meisten Gene im Gehirn exprimiert nicht bekannt. Der Einfluss eines bestimmten Gens zu einem bestimmten Verhalten durch Verhaltensanalyse von mutierten Mäusen bestimmt werden. Wenn ein Ziel-Gen im Gehirn exprimiert wird, könnte Verhaltensphänotyp des mutierten Mäusen verdeutlichen die genetischen Mechanismen der normalen Verhaltensweisen. Die erhöhten Plus-Labyrinth-Test ist eine der am häufigsten verwendeten Tests zur Messung von Angst-ähnliches Verhalten. Der Test basiert auf der natürlichen Abneigung der Mäuse für einen offenen und erhöhten Flächen, sowie auf ihre natürliche spontane Erkundungsverhalten in neue Umgebungen. Der Apparat besteht aus offenen Armen und geschlossenen Arme, in der Mitte senkrecht zueinander gekreuzt und einem mittleren Bereich. Mäuse haben Zugang zu allen von den Armen gegeben und dürfen sich frei bewegen zwischen ihnen. Die Zahl der Eintritte in die offenen Arme und die Zeit in den offenen Armen verbracht werden als Indizes von Freiflächen-induzierte Angst bei Mäusen verwendet. Leider machen die verfahrensrechtlichen Unterschiede zwischen den Labors gibt es schwierig zu kopieren und vergleichen Sie die Ergebnisse von Labor zu Labor. Hier präsentieren wir eine ausführliche Film demonstriert unser Protokoll für den erhöhten Plus-Labyrinth-Test. In unserem Labor haben wir mehr als 90 Stämme von mutierten Mäusen unter Verwendung des Protokolls in dem Film gezeigt, beurteilt. Diese Daten werden als Teil einer öffentlichen Datenbank, die wir jetzt bauen werden offen gelegt werden. Visualisierung des Protokolls wird die Förderung eines besseren Verständnisses der Details des gesamten experimentellen Verfahren, ermöglicht eine Standardisierung der Protokolle in verschiedenen Labors und Vergleiche der Verhaltens-Phänotypen der verschiedenen Stämme von mutierten Mäusen beurteilten mit Hilfe dieses Tests.

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Elevated Plus Maze for Mice

Die erhöhten Plus-Labyrinth-Test ist eine der am häufigsten verwendeten Tests zur Messung von Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen. Hier präsentieren wir einen Film zeigen, die Modalitäten für die Durchführung des Tests.

Elevated Plus Maze für Mäuse

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given ...

Research

JoVE Journal

Biology

90.2K Aufrufe.  Graduate School of Medicine, Kyoto University. Die erhöhten Plus-Labyrinth-Test ist eine der am häufigsten verwendeten Tests zur Messung von Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen. Hier präsentieren wir einen Film zeigen, die Modalitäten für die Durchführung des Tests.

Serie: Elevated Plus Maze for Mice

Light/dark Transition Test for Mice

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, however, can be used to delete or manipulate a specific gene in mice. The influence of a given gene on a specific behavior can then be determined by conducting behavioral analyses of the mutant mice. As a test for behavioral phenotyping of mutant mice, the light/dark transition test is one of the most widely used tests to measure anxiety-like behavior in mice. The test is based on the natural aversion of mice to brightly illuminated areas and on their spontaneous exploratory behavior in novel environments. The test is sensitive to anxiolytic drug treatment. The apparatus consists of a dark chamber and a brightly illuminated chamber. Mice are allowed to move freely between the two chambers. The number of entries into the bright chamber and the duration of time spent there are indices of bright-space anxiety in mice. To obtain phenotyping results of a strain of mutant mice that can be readily reproduced and compared with those of other mutants, the behavioral test methods should be as identical as possible between laboratories. The procedural differences that exist between laboratories, however, make it difficult to replicate or compare the results among laboratories. Here, we present our protocol for the light/dark transition test as a movie so that the details of the protocol can be demonstrated. In our laboratory, we have assessed more than 60 strains of mutant mice using the protocol shown in the movie. Those data will be disclosed as a part of a public database that we are now constructing.

Visualization of the protocol will facilitate understanding of the details of the entire experimental procedure, allowing for standardization of the protocols used across laboratories and comparisons of the behavioral phenotypes of various strains of mutant mice assessed using this test.

The light/dark transition test is one of the most widely used tests to measure anxiety-like behavior in mice. Here, we present a movie that shows detailed procedures on how we conduct the test.

Hell / Dunkel Transition Test für Mäuse

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Forschung

Biologie

Morris Water Maze Experiment

The Morris water maze is widely used to study spatial memory and learning. Animals are placed in a pool of water that is colored opaque with powdered non-fat milk or non-toxic tempera paint, where they must swim to a hidden escape platform. Because they are in opaque water, the animals cannot see the platform, and cannot rely on scent to find the escape route. Instead, they must rely on external/extra-maze cues. As the animals become more familiar with the task, they are able to find the platform more quickly. Developed by Richard G. Morris in 1984, this paradigm has become one of the "gold standards" of behavioral neuroscience.

The Morris water maze is a well-accepted tool used to document the involvement of the hippocampus in a behavioral task.

Morris Water Maze-Experiment

The Morris water maze is widely used to study spatial memory and learning. Animals are placed in a pool of water that is colored opaque with powdered ...

Polymerase Chain Reaction: Basic Protocol Plus Troubleshooting and Optimization Strategies

In the biological sciences there have been technological advances that catapult the discipline into golden ages of discovery. For example, the field of microbiology was transformed with the advent of Anton van Leeuwenhoek&#39;s microscope, which allowed scientists to visualize prokaryotes for the first time. The development of the polymerase chain reaction (PCR) is one of those innovations that changed the course of molecular science with its impact spanning countless subdisciplines in biology. The theoretical process was outlined by Keppe and coworkers in 1971; however, it was another 14 years until the complete PCR procedure was described and experimentally applied by Kary Mullis while at Cetus Corporation in 1985. Automation and refinement of this technique progressed with the introduction of a thermal stable DNA polymerase from the bacterium Thermus aquaticus, consequently the name Taq DNA polymerase.
PCR is a powerful amplification technique that can generate an ample supply of a specific segment of DNA (i.e., an amplicon) from only a small amount of starting material (i.e., DNA template or target sequence). While straightforward and generally trouble-free, there are pitfalls that complicate the reaction producing spurious results. When PCR fails it can lead to many non-specific DNA products of varying sizes that appear as a ladder or smear of bands on agarose gels. Sometimes no products form at all. Another potential problem occurs when mutations are unintentionally introduced in the amplicons, resulting in a heterogeneous population of PCR products. PCR failures can become frustrating unless patience and careful troubleshooting are employed to sort out and solve the problem(s). This protocol outlines the basic principles of PCR, provides a methodology that will result in amplification of most target sequences, and presents strategies for optimizing a reaction. By following this PCR guide, students should be able to: 
 
&#9679; Set up reactions and thermal cycling conditions for a conventional PCR experiment 
&#9679; Understand the function of various reaction components and their overall effect on a PCR experiment 
&#9679; Design and optimize a PCR experiment for any DNA template 
&#9679; Troubleshoot failed PCR experiments

PCR has emerged as a common technique in many molecular biology laboratories. Provided here is a quick guide to several conventional PCR protocols. Because each reaction is a unique experiment, optimal conditions required to generate a product vary. Understanding the variables in a reaction will greatly enhance troubleshooting efficiency, thereby increasing the chance to obtain the desired result.

Polymerase Chain Reaction: Basic Protocol Plus Fehlersuche und Optimierungsstrategien

In the biological sciences there have been technological advances that catapult the discipline into golden ages of discovery. For example, the field of ...

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

Milchauffangmethoden für Mäuse und Reeves Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

Intravenous Injections in Neonatal Mice

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are technically feasible and routine. However, some mouse models can have early onset of disease with a rapid progression that makes administration of potential therapies difficult. The temporal (or facial) vein is just anterior to the ear bud in mice and is clearly visible for the first two days after birth on either side of the head using a dissecting microscope. During this window, the temporal vein can be injected with volumes up to 50 &#956;l. The injection is safe and well tolerated by both the pups and the dams. A typical injection procedure is completed within 1-2 min, after which the pup is returned to the home cage. By the third postnatal day the vein is difficult to visualize and the injection procedure becomes technically unreliable. This technique has been used for delivery of adeno-associated virus (AAV) vectors, which in turn can provide almost body-wide, stable transgene expression for the life of the animal depending on the viral serotype chosen.

Animal models of pediatric disease can experience early onset and aggressive disease progression. Clinically relevant therapy delivery to young mouse models can be technically difficult. This protocol describes a non-invasive intravenous injection method for newborn mice within the first two postnatal days of life.

Intravenöse Injektionen in neugeborenen Mäusen

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are ...

Subcloning Plus Insertion (SPI) - A Novel Recombineering Method for the Rapid Construction of Gene Targeting Vectors

Gene targeting refers to the precise modification of a genetic locus using homologous recombination. The generation of novel cell lines and transgenic mouse models using this method necessitates the construction of a &#8216;targeting&#8217; vector, which contains homologous DNA sequences to the target gene, and has for many years been a limiting step in the process. Vector construction can be performed in vivo in Escherichia coli cells using homologous recombination mediated by phage recombinases using a technique termed recombineering. Recombineering is the preferred technique to subclone the long homology sequences (>4kb) and various targeting elements including selection markers that are required to mediate efficient allelic exchange between a targeting vector and its cognate genomic locus. Typical recombineering protocols follow an iterative scheme of step-wise integration of the targeting elements and require intermediate purification and transformation steps. Here, we present a novel recombineering methodology of vector assembly using a multiplex approach. Plasmid gap repair is performed by the simultaneous capture of genomic sequence from mouse Bacterial Artificial Chromosome libraries and the insertion of dual bacterial and mammalian selection markers. This subcloning plus insertion method is highly efficient and yields a majority of correct recombinants. We present data for the construction of different types of conditional gene knockout, or knock-in, vectors and BAC reporter vectors that have been constructed using this method. SPI vector construction greatly extends the repertoire of the recombineering toolbox and provides a simple, rapid and cost-effective method of constructing these highly complex vectors.

Subcloning Plus Insertion SPI - A Novel Recombineering Method for the Rapid Construction of Gene Targeting Vectors

Gene targeting methodologies can be used to generate transgenic mice with knockout, knock-in and tagged alleles. Here, we describe an improved method of recombineering in E. coli, that we term &#8216;subcloning plus insertion&#8217;, which can be used to generate custom gene targeting vectors rapidly.

Subklonierung Plus-Insertion (SPI) - A Novel Recombineering Verfahren zur schnellen Bau der Gene Targeting Vektoren

Gene targeting refers to the precise modification of a genetic locus using homologous recombination. The generation of novel cell lines and transgenic ...

A Strategy to Validate the Role of Callose-mediated Plasmodesmal Gating in the Tropic Response

The plant hormone auxin plays an important role in many growth and developmental processes, including tropic responses to light and gravity. The establishment of an auxin gradient is a key event leading to phototropism and gravitropism. Previously, polar auxin transport (PAT) was shown to establish an auxin gradient in different cellular domains of plants. However, Han et al. recently demonstrated that for proper auxin gradient formation, plasmodesmal callose-mediated symplasmic connectivity between the adjacent cells is also a critical factor. In this manuscript, the strategy to elucidate the role of particular genes, which can affect phototropism and gravitropism by altering the symplasmic connectivity through modulating plasmodesmal callose synthesis, is discussed. The first step is to screen aberrant tropic responses from 3-day-old etiolated seedlings of mutants or over-expression lines of a gene along with the wild type. This preliminary screening can lead to the identification of a range of genes functioning in PAT or controlling symplasmic connectivity. The second screening involves the sorting of candidates that show altered tropic responses by affecting symplasmic connectivity. To address such candidates, the movement of a symplasmic tracer and the deposition of plasmodesmal callose were examined. This strategy would be useful to explore new candidate genes that can regulate symplasmic connectivity directly or indirectly during tropic responses and other developmental processes.

This article describes the methods for screening the genes controlling plasmodesmal permeability and hence auxin gradient during tropic response. This includes the measurement of the degree of tropic response in hypocotyl of Arabidopsis thaliana and checking plasmodesmal permeability by 8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid (HPTS) loading and finally callose level assessment.

Eine Strategie zur Validierung der Rolle der Kallose-vermittelten Plasmodesmal Gating im Tropic Antwort

The plant hormone auxin plays an important role in many growth and developmental processes, including tropic responses to light and gravity. The ...

Nasal Potential Difference to Quantify Trans-epithelial Ion Transport in Mice

The nasal potential difference test has been used for almost three decades to assist in the diagnosis of cystic fibrosis (CF). It has proven to be helpful in cases of attenuated, oligo- or mono-symptomatic forms of CF usually diagnosed later in life, and of CF-related disorders such as congenital bilateral absence of vas deferens, idiopathic chronic pancreatitis, allergic bronchopulmonary aspergillosis, and bronchiectasis. In both clinical and preclinical settings, the test has been used as a biomarker to quantify responses to targeted therapeutic strategies for CF. Adapting the test to a mouse is challenging and can entail an associated mortality. This paper describes the adequate depth of anesthesia required to maintain a nasal catheter in situ for continuous perfusion. It lists measures to avoid broncho-aspiration of solutions perfused in the nose. It also describes the animal care at the end of the test, including administration of a combination of antidotes of the anesthetic drugs, leading to rapidly reversing the anesthesia with full recovery of the animals. Representative data obtained from a CF and a wild-type mouse show that the test discriminates between CF and non-CF. Altogether, the protocol described here allows reliable measurements of the functional status of trans-epithelial chloride and sodium transporters in spontaneously breathing mice, as well as multiple tests in the same animal while reducing test-related mortality.

Here, we present a protocol to measure nasal potential difference in mice. The test quantifies the function of transmembrane ion transporters such as the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator and the epithelial sodium channel. It is valuable to evaluate the efficacy of novel therapies for cystic fibrosis.

Nasale Potentialdifferenz, Trans-epithelialen Ionentransport bei Mäusen zu quantifizieren

The nasal potential difference test has been used for almost three decades to assist in the diagnosis of cystic fibrosis (CF). It has proven to be helpful ...

An Antegrade Perfusion Method for Cardiomyocyte Isolation from Mice

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating cardiomyocytes from rabbits, guinea pigs or rats has been performed via retrograde perfusion of the heart with enzymes using a Langendorff apparatus. However, a high degree of skill is required when this method is used with a small mouse heart. An antegrade perfusion method that does not use a Langendorff apparatus was recently reported for the isolation of mouse cardiomyocytes. We herein report a complete protocol for the improved antegrade perfusion of the excised heart to isolate individual heart cells from adult mice (8 - 108 weeks old). Antegrade perfusion is performed by injecting perfusate near the apex of the left ventricle of the excised heart, the aorta of which was clamped, using an infusion pump. All procedures are carried out on a pre-warmed heater mat under a microscope, which allows for the injection and perfusion processes to be monitored. The results suggest that ventricular and atrial myocytes, and fibroblasts can be well isolated from a single adult mouse simultaneously.

We developed a simple method for isolating high quality individual mouse heart cells by the antegrade perfusion technique. This method is Langendorff-free and useful for isolating ventricular and atrial myocytes or interstitial cells, such as cardiac fibroblasts or progenitors.

Eine antegrade Perfusionsmethode zur Kardiomyozytenisolation von Mäusen

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating ...

Terminal H-reflex Measurements in Mice

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits after injuries such as spinal cord damage or stroke. An increase of the H-reflex response, together with symptoms like non-voluntary muscle contractions, pathologically augmented stretch reflex, and hypertonia in the corresponding muscle, is an indicator of post-stroke spasticity (PSS).
In contrast to rather nerve-unspecific transcutaneous measurements, here, we present a protocol to quantify the H-reflex directly at the ulnar and median nerves of the forepaw, which is applicable, with minor modifications, to the tibial and sciatic nerve of the hindpaw. Based on the direct stimulation and the adaptation to different nerves, the method represents a reliable and versatile tool to validate electrophysiological changes in spasticity-related disease models.

The clinical evaluation of spasticity based on the Hoffmann reflex (H-reflex) and using electrical stimulation of peripheral nerves is an established method. Here, we provide a protocol for a terminal and direct nerve stimulation for H-reflex quantification in the mouse forepaw.

Terminale H-Reflex-Messungen bei Mäusen

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits ...