Beginnen Sie damit, den gewünschten gealterten Maiskeimling mit einem kleinen Messer oder einer Schere am Mesokotylgewebe zu schneiden. Reinigen Sie den Sämling mit einem Pinsel. Halten Sie dann die Abisolierzange mit den Backen zur Rutsche.
Positionieren Sie die Rutsche am ausgewählten Loch und drücken Sie die Abstreifergriffe zusammen. Schieben Sie den Abstreifer von der Rutsche weg, um den oberen Teil der Blätter abzuschneiden. Verwenden Sie ein Lineal, um die Länge von der Spitze des Primordiums bis zur Basis der Rutsche zu messen.
Um mit der Blattprimordium-Bildgebung zu beginnen, halten Sie die Rutsche unter einem Stereomikroskop bei etwa 0,8-facher Vergrößerung stabil auf einer glatten Oberfläche. Machen Sie mit einer Rasierklinge oder einem Skalpell einen ersten Schnitt etwas oberhalb des Zielbereichs, um den distalen Teil der Rutsche zu entfernen. Anschließend erhalten Sie etwa 0,25 bis 0,8 Millimeter dünne Schliffe an den gewünschten Stellen entlang der Länge des Primordiums.
Wenn Sie fertig sind, montieren Sie den Blattabschnitt auf einem sauberen Glasobjektträger. Tragen Sie ein paar Tropfen Wasser mit einer Pipette direkt auf den Abschnitt auf. Und legen Sie ein Deckglas darauf.
Tragen Sie bei Bedarf noch ein paar Tropfen durch die Ränder des Deckglases auf. Legen Sie den Objektträger auf den Tisch des Epifluoreszenzmikroskops und passen Sie die Einstellungen an, um den Fluorophor sichtbar zu machen. Mit dieser Methode wurde die zufällige Resektionsprobenahme standardisiert, indem die Primordien vor der Schnittung gemessen wurden.
Es wurde ein Trend entdeckt, der zeigte, dass die verschwindende Quaste zwei breitere Primordien und mehr Adern als normal aufwies, was darauf hindeutet, dass der Defekt in der Mutante früh in der Blattentwicklung begann. Diese Methode ermöglichte auch die systematische Untersuchung der Expressionsmuster von fluoreszierenden Proteinreportern der Hormonantwort in den Blattprimordien.
