Bildung von Neuralleisten aus humanen pluripotenten Stammzellen für die Erforschung des enterischen Nervensystems

Um die Bildung von Neuralleisten zu induzieren, ersetzen Sie das Erhaltungsmedium der humanen pluripotenten Stammzellkultur durch 200 Mikroliter Medium A pro Quadratzentimeter der Well-Oberfläche. Inkubieren Sie die Kultur zwei Tage lang unter 5%iger Kohlendioxidzugabe bei 37 Grad Celsius. Saugen Sie das Medium vorsichtig aus den Vertiefungszellen mit 100 % Konfluenz ab und pipettieren Sie dann etwa 200 Mikroliter Medium B pro Quadratzentimeter der Vertiefungsoberfläche.

Füttern Sie die Zellen am vierten Tag mit 200 Mikrolitern Medium B pro Quadratzentimeter der Well-Oberfläche. Inkubieren Sie die Zellen für zwei weitere Tage, dann ersetzen Sie das Medium B durch 400 Mikroliter pro Quadratzentimeter Medium C.