Diese Arbeit wurde finanziell durch Zuschüsse von Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan de Cock Kornelis Stichting und Tekke Huizingafonds vorgesehen, die alle in den Niederlanden unterstützt. Wir sind dankbar für alle niederländischen Transplantation Koordinatoren für die Ermittlung der potentiellen verworfen Leber und informierte Zustimmung erhalten.

Dieses Protokoll wurde von der Medizinischen Ethikkommission (Medisch Ethische Toetsingscommissie) des University Medical Center Groningen, Niederlande zugelassen. 1. Herstellung der Perfusionsflüssigkeit Hinweis: Das Gesamtvolumen des für normothermic Maschine Perfusion gemäß diesem Protokoll hergestellt Perfusionsflüssigkeit 2.233 ml und die gezielte Osmolarität der Perfusionsflüssigkeit 302 mOsmol / l. <ol><li> Von den Komponenten der in Tabelle 1 beschrieben Perfusionsflüssigkeit, halten Sie die menschlichen Erythrozytenkonzentrat, Frischplasma und Humanalbumin getrennt. Mischen Sie die restlichen Komponenten steril und speichern Sie die Lösung in einem sterilen Beutel für den Transport in den OP (OR). Tun Sie dies in einer sterilen Umgebung (im Idealfall eine Good Manufacturing Practice Anlage) oder in einer Sterilbank in einem Kulturraum. </li></ol><table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Components </td><td fo:width="2in" style="width:80px"> Menge </td></tr><tr><td> Lunch roten Blutkörperchen (Hämatokrit 60%) </td><td style="text-align:right"> 840 ml </td></tr><tr><td> Fresh Frozen Plasma </td><td style="text-align:right"> 930 ml </td></tr><tr><td> Humanalbumin 200 g / L (Albuman, Sanquin) </td><td style="text-align:right"> 100 ml </td></tr><tr><td> Geändert parenterale Ernährung (Clinimix N17G35E, Baxter International Inc.) </td><td style="text-align:right"> 7,35 ml </td></tr><tr><td> Multivitamine für Infusion (Cernevit, Baxter International Inc.) </td><td style="text-align:right"> 7 ul </td></tr><tr><td> Konzentrierte Spurenelemente zur Infusion (Nutritrace, B. Braun Melsungen AG) </td><td style="text-align:right"> 7,35 ml </td></tr><tr><td> Metronidazol für die iv-Gabe (5 mg / ml) (Flagyl, Sanofi-Aventis) </td><td style="text-align:right">40 ml </td></tr><tr><td> Cefazolin 1.000 mg Kolben 5 ml Pulver zur IV-Verabreichung (Servazolin, Sandoz) </td><td style="text-align:right"> 2 ml </td></tr><tr><td> Schnell wirkendes Insulin (100 IU / ml) (Actrapid®, Novo Nordisk) </td><td style="text-align:right"> 20 ml </td></tr><tr><td> Calciumglubionat, intravenöse Lösung 10% 137,5 mg / ml (Sandoz) </td><td style="text-align:right"> 40 ml </td></tr><tr><td> Sterilem H 2 O </td><td style="text-align:right"> 51,3 ml </td></tr><tr><td> NaCl 0,9% Lösung </td><td style="text-align:right"> 160 ml </td></tr><tr><td> Natriumbicarbonat 8,4% Lösung </td><td style="text-align:right"> 31 ml </td></tr><tr><td> Heparin 5000 IE / ml für die iv-Gabe </td><td style="text-align:right"> 4 ml </td></tr><tr><td> Gesamt </td><td style="text-align:right"> 2.233 ml </td></tr></tbody></table> Tabelle 1: Components der Perfusionsflüssigkeit 16. <ol start="2"><li> Übertragungs menschlichen gepackten roten Blutkörperchen (840 ml), frisch gefrorenem Plasma (930 ml), Humanalbumin 200 g / l (100 ml) und die in Schritt 1.1 zu dem ODER hergestellten Lösung, um die Perfusionsvorrichtung verabreicht werden. </li></ol> 2. Grundierung der Perfusionsvorrichtung <ol><li> Die Komponenten der Perfusionsflüssigkeit, einschließlich der menschlichen gepackten roten Blutzellen, frisch gefrorenem Plasma, Humanalbumin und die in Schritt 1.1 hergestellten Lösung auf die Maschine über den Verbinder auf der Oberseite der Oxygenatoren und entferne alle Luftblasen aus dem Schlauch. </li><li> Schalten Sie die Venenpumpe und folgen Sie den Anweisungen des Herstellers auf dem Bildschirm. Schalten Sie dann den arteriellen Pumpe und folgen Sie den Anweisungen des Herstellers auf dem Bildschirm. </li><li> NULL Die Druckmessgeräte gegen Atmosphärendruck indem Sie die Anweisungen auf dem Bildschirm. Dies stellt sicher, daß der Druck während der perfus gemessenenIon das wirklichen Druck auf der Ebene der Pfortader und die Leberarterie. </li><li> Starten Sie die Beatmung mit Carbogen (95% O 2 + 5% CO 2) bei einer Strömungsgeschwindigkeit von 4 l / min. Der Luftstrom wird zu den beiden Oxygenatoren unterteilt werden (2 L / min pro Oxygenator), und dies sollte in einem pO 2 von etwa 60 kPa (oder 450 mmHg) in der Perfusionsflüssigkeit führen. Länger Perfusionen, ist es ratsam, getrennten Quellen von Sauerstoff und Kohlendioxid zu verwenden. Dies ermöglicht kleine Einstellungen in der O 2 / CO 2 -Verhältnis, die verwendet werden können, um den pH und pCO 2 der Perfusionsflüssigkeit einzustellen. </li><li> Nehmen Sie eine Perfusion Probe für die Blutgasmessung 15-20 Minuten, nachdem das Gerät wurde grundiert und den pH-Wert und Elektrolyten entsprechend zu überwachen. HINWEIS: Achten Sie darauf, über 3 ml Perfusionsflüssigkeit, bevor sie die Proben zu verwerfen, da diese Flüssigkeit ist in der Umfangsrohre und nicht die Perfusionsflüssigkeit im System zu repräsentieren. Fügen Sie eine 8,4% Natriumbicarbonat sÖSUNG für Pufferkapazität, mit dem Ziel für einen physiologischen pH-Wert (7,35 bis 7,45). Fügen Sie beispielsweise 25 bis 35 ml einer 8,4% Natriumhydrogencarbonat-Lösung und den pH-Wert und Bicarbonat-Spiegel in der Perfusionsflüssigkeit durch die Entnahme von Proben für die Blutgasmessung in regelmäßigen Abständen. </li></ol> 3. Beschaffung und Herstellung von Spenderlebern Hinweis: Beschaffen Sie die Orgel mit dem Standard-Technik der in situ Kühlung und spülen Sie mit kaltem Konservierungsfluid (0-4 ° C) 19. Zur Kanülierung der Arterie zu erleichtern, lassen ein Segment des supratruncal Aorta der Leberarterie (2A) befestigt ist. <ol><li> Spülen die Gallengänge mit dem Konservierungsfluid (dh, University of Wisconsin Lösung). Ligieren Cysticus mit einem chirurgischen Nahtmaterials. </li><li> Verpacken und verstauen die Orgel in einem Standard-sterile Spenderorgan Beutel und Box mit crushed ice für die anschließende Transport zum MP-Center. </li><li> Startdie Rückseite Tabelle Verfahren unmittelbar nach der Ankunft der Spenderleber in den Operationssaal. <ol><li> Nehmen Sie eine Probe von mindestens 10 ml des Konservierungsflüssigkeit für die mikrobiologische Untersuchung. </li><li> Entfernen Sie die Zwerchfell-Anhänge auf dem nackten Bereich der Leber sowie alle übrigen Herzmuskel von der oberen Manschette der Hohlvene mit chirurgischer Schere. </li><li> Präparieren Sie die Arterie und Pfortader mit Präparierscheren und Ligat Seitenäste mit chirurgischen Nähten oder Hemoclips. </li><li> Schließen des distalen Endes des supratruncal Aorta-Segment mit einem nicht resorbierbaren monofilen Faden (zB 3-0 Prolene). Legen Sie die Arterienkanüle in das proximale Ende des supratruncal Aorta und mit Nähten (2A). Verwenden der Kanüle in der Wegwerfpackung bereitgestellt, wie vom Hersteller des Perfusionsvorrichtung geliefert. </li><li> Legen Sie die Venenkanüle in die Pfortader und mit Nähten. Verwenden Sie die Kanüle in den dispos bereitgestelltLage Paket. Die Lebervenen bleibt uncannulated. </li><li> Spülen Sie die Gallengang mit der Konservierungslösung. Legen Sie eine Silizium-Katheter in den Gallengang und mit Nähten. Hinweis: Die Katheter zu tief in den Gallengang einlegen nicht, da dies zu Verletzungen der Gallen Epithels führen. </li><li> Spülen Sie die Leber mit 0,9% NaCl-Lösung über die Pfortader Kanüle wie folgt: <ol><li> Wenn das Transplantat in University of Wisconsin-Lösung als Konservierungslösung konserviert worden, spülen, die Leber mit 2000 ml kaltem (0-4 ° C) 0,9% NaCl-Lösung, gefolgt von 500 ml warmem (37 ° C) 0,9% NaCl Lösung. </li><li> Wenn das Transplantat in Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat-Lösung als Konservierungslösung erhalten, spülen, die Leber mit 1000 ml kaltem (0-4 ° C) 0,9% NaCl-Lösung, gefolgt von 500 ml warmem (37 ° C) 0,9 % NaCl-Lösung. Der Zweck des Warm bündig ist, um einen signifikanten Abfall in der Temperatur des zu verhindernPerfusionsflüssigkeit. </li><li> Führen Sie die warme bündig unmittelbar vor dem Anschluss der Leber zum Perfusionsvorrichtung. HINWEIS: Halten Sie die Dauer zwischen warmen und bündig Beginn NMP weniger als 1-2 min. </li></ol></li></ol></li></ol><table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Spendereigenschaften (n = 12) </td><td> Anzahl (%) oder Median (IQR) </td></tr><tr><td> Alter (Jahre) </td><td> 61 (50-64) </td></tr><tr><td> Männlich) </td><td> 8 (67%) </td></tr><tr><td> Art des Spenders DCD, Maastricht Typ III DBD </td><td> 10 (83%) 2 (17%) </td></tr><tr><td> Body-Mass-Index (BMI) </td><td> 27 (25-35) </td></tr><tr><td> Absagegrund DCD + Alter&gt; 60 Jahre DCD + hoher BMI DCD + verschiedene Gründe * Schwere Steatose </td><td> 5 (41%) 3 (25%) 2 (17%) <br<html> /&gt; 2 (17%) </td></tr><tr><td> Konservierungslösung UW-Lösung HTK-Lösung </td><td> 6 (50%) 6 (50%) </td></tr><tr><td> Donor warme Ischämiezeit in DCD (min) </td><td> 14 (17-20) </td></tr><tr><td> Kalte Ischämie Zeit (min) </td><td> 389 (458-585) </td></tr><tr><td> Donor Risikoindex (DRI) </td><td> 2,35 (2,01-2,54) </td></tr></tbody></table> Tabelle 2: Eigenschaften * Donor Spender Geschichte der intravenöse Drogenmissbrauch für ein Transplantat und verlängerte Spender SO 2 &lt;30% nach Abzug der Lebenserhaltung für ein weiteres Transplantat.. Abkürzungen: DCD, Spende nach Kreislauf Tod; DBD, Spende nach Hirntod; UW, University of Wisconsin, HTK, Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat <html> g2.jpg &quot;/&gt; Abbildung 2: (A) Bilder eines menschlichen Spendertransplantat, die auf der Rückseite Tisch und hergestellt worden ist, (B - D) wurde anschließend normothermically perfundiert. (A) Die Arterienkanüle wird in die Aorta eingeführt surpratruncal und die venöse Kanüle in die Pfortader eingeführt. Der Gallengang wird mit einer Siliciumgallenkatheter kanüliert. (B) Die Leber ist in der Organkammer mit seiner Vorderfläche nach unten und Kanülen sind mit den Rohrleitungen der Perfusionsvorrichtung angeschlossen positioniert. (C) 30 min nach dem Start der Maschine normothermic Perfusion. (D) 6 Stunden nach dem Beginn der Perfusion normothermic Maschine. Im Betrieb wird der Organkammer ist von einer transparenten Abdeckung bedeckt ist, um eine sterile feuchte Umgebung für die Leber (in diesen Abbildungen gezeigt) aufrechtzuerhalten.&quot;&gt; Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen. 4. normothermen Maschine Perfusion <ol><li> Positionieren Sie die Leber in der Organkammer mit der Vorderseite nach unten zeigt. Sofort eine Verbindung in der Leber auf die grundierte Perfusionsvorrichtung durch Verbinden der Pfortader Kanüle zum Portal Anströmrohr der Perfusion Vorrichtung und der arteriellen Kanüle zum arteriellen Zulaufrohr des Gerätes. </li><li> Starten Perfusion sowohl auf Portal und arteriellen Seite, indem Sie den Anweisungen des Herstellers auf dem Bildschirm. Stellen Sie den mittleren arteriellen Druck bei 70 mmHg und der mittleren Portalvenendruck bei 11 mmHg. </li><li> Nehmen Perfusionsflüssigkeit Proben alle 30 Minuten für die sofortige Analyse der Blutgasparameter (pO 2, pCO 2, SO 2, HCO 2 - und pH) und biochemische Parameter (Glukose, Calcium, Lactat, Kalium und Natrium) unter Verwendung eines herkömmlichen Blutgasanalysator . Achten Sie darauf, über 3 ml Perfusion verwerfenFlüssigkeit vor der Entnahme von Proben, da diese Flüssigkeit ist in der Umfangsrohre und nicht die Perfusionsflüssigkeit in dem System darstellen. <ol><li> Zu ergreifen, diese Proben absaugen Perfusionsflüssigkeit mit einer 1-ml-Spritze aus den Stichproben Anschlüsse, die ein Teil der Einwegschlauchsatz des Perfusionsvorrichtung sind. Für jede Probe verwenden Sie eine neue Spritze und entfernen Sie sofort alle Luftblasen aus der Spritze auf Aspiration von Perfusionsflüssigkeit. Dann legen Sie die Spritze im Blutgasanalysegerät und folgen Sie den Anweisungen des Herstellers in der Bedienungsanleitung des Analysegeräts zur Verfügung gestellt. </li></ol></li><li> Sammeln von Plasma aus der Perfusionsflüssigkeit, Einfrieren und Lagerung bei -80 ° C zur Bestimmung der alkalischen Phosphatase (AlkP), Gamma-Glutamyltransferase (gamma-GT), Alanin-Aminotransferase (ALT), Harnstoff und Gesamt-Bilirubin. Sammeln Plasma nach 5 min Zentrifugation der Perfusionsflüssigkeit bei 1.500 × g und 4 ° C. </li></ol>

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	<li>Plaats, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+machine+preservation+in+liver+transplantation+revisited:+Concepts+and+criteria+in+the+new+millennium.">Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium.</a> Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).</li><li>op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+of+bile+ducts+in+liver+transplantation:+Looking+beyond+ischemia.">Protection of bile ducts in liver transplantation: Looking beyond ischemia.</a> Transplantation. 92 (4), 373-379 (2011).</li><li>Seehofer, D., Eurich, D., Veltzke-Schlieker, W., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+complications+after+liver+transplantation:+Old+problems+and+new+challenges.">Biliary complications after liver transplantation: Old problems and new challenges.</a> Am. J. Transplant. 13 (2), 253-265 (2013).</li><li>Buis, C. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonanastomotic+biliary+strictures+after+liver+transplantation,+part+1:+Radiological+features+and+risk+factors+for+early+vs.+late+presentation.">Nonanastomotic biliary strictures after liver transplantation, part 1: Radiological features and risk factors for early vs. late presentation.</a> Liver. Transpl. 13 (5), 708-718 (2007).</li><li>Karimian, N., op den Dries, S., Porte, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+biliary+strictures+after+liver+transplantation:+Is+it+the+amount+of+epithelial+injury+or+insufficient+regeneration+that+counts.">The origin of biliary strictures after liver transplantation: Is it the amount of epithelial injury or insufficient regeneration that counts.</a> J. Hepatol. 58 (6), 1065-1067 (2013).</li><li>Gastaca, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation:+A+review+of+incidence+and+risk+factors.">Biliary complications after orthotopic liver transplantation: A review of incidence and risk factors.</a> Transplant. Proc. 44 (6), 1545-1549 (2012).</li><li>Sanchez-Urdazpal, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic-type+biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation.">Ischemic-type biliary complications after orthotopic liver transplantation.</a> Hepatology. 16 (1), 49-53 (1992).</li><li>Dubbeld, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Similar+liver+transplantation+survival+with+selected+cardiac+death+donors+and+brain+death+donors.">Similar liver transplantation survival with selected cardiac death donors and brain death donors.</a> Br. J. Surg. 97 (5), 744-753 (2010).</li><li>Guarrera, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+machine+preservation+in+human+liver+transplantation:+The+first+clinical+series.">Hypothermic machine preservation in human liver transplantation: The first clinical series.</a> Am. J. Transplant. 10 (2), 372-381 (2010).</li><li>Henry, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+machine+preservation+reduces+molecular+markers+of+ischemia/reperfusion+injury+in+human+liver+transplantation.">Hypothermic machine preservation reduces molecular markers of ischemia/reperfusion injury in human liver transplantation.</a> Am. J. Transplant. 12 (9), 2477-2486 (2012).</li><li>Schlegel, A., Rougemont, O., Graf, R., Clavien, P. A., Dutkowski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+mechanisms+of+end-ischemic+cold+machine+perfusion+in+DCD+liver+grafts.">Protective mechanisms of end-ischemic cold machine perfusion in DCD liver grafts.</a> J. Hepatol. 58 (2), 278-286 (2013).</li><li>op den Dries, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+oxygenated+machine+perfusion+prevents+arteriolonecrosis+of+the+peribiliary+plexus+in+pig+livers+donated+after+circulatory+death.">Hypothermic oxygenated machine perfusion prevents arteriolonecrosis of the peribiliary plexus in pig livers donated after circulatory death.</a> PLoS. One. 9 (2), e88521 (2014).</li><li>Tolboom, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subnormothermic+machine+perfusion+at+both+20+degrees+C+and+30+degrees+C+recovers+ischemic+rat+livers+for+successful+transplantation.">Subnormothermic machine perfusion at both 20 degrees C and 30 degrees C recovers ischemic rat livers for successful transplantation.</a> J. Surg. Res. 175 (1), 149-156 (2012).</li><li>Gringeri, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subnormothermic+machine+perfusion+for+non-heart-beating+donor+liver+grafts+preservation+in+a+swine+model:+A+new+strategy+to+increase+the+donor+pool?+Transplant.">Subnormothermic machine perfusion for non-heart-beating donor liver grafts preservation in a swine model: A new strategy to increase the donor pool? Transplant.</a> Proc. 44 (7), 2026-2028 (2012).</li><li>Bruinsma, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subnormothermic+machine+perfusion+for+ex+vivo+preservation+and+recovery+of+the+human+liver+for+transplantation.">Subnormothermic machine perfusion for ex vivo preservation and recovery of the human liver for transplantation.</a> Am. J. Transplant. 14 (6), 1400-1409 (2014).</li><li>op den Dries, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+normothermic+machine+perfusion+and+viability+testing+of+discarded+human+donor+livers.">Ex vivo normothermic machine perfusion and viability testing of discarded human donor livers.</a> Am. J. Transplant. 13 (5), 1327-1335 (2013).</li><li>Sutton, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+for+viability+assessment+of+discarded+human+donor+livers+during+ex+vivo+normothermic+machine+perfusion.">Criteria for viability assessment of discarded human donor livers during ex vivo normothermic machine perfusion.</a> PLoS. One. 9 (11), (2014).</li><li>Minor, T., Efferz, P., Fox, M., Wohlschlaeger, J., Luer, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+oxygenated+rewarming+of+cold+stored+liver+grafts+by+thermally+graduated+machine+perfusion+prior+to+reperfusion.">Controlled oxygenated rewarming of cold stored liver grafts by thermally graduated machine perfusion prior to reperfusion.</a> Am. J. Transplant. 13 (6), 1450-1460 (2013).</li><li>Makowka, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+of+orthotopic+liver+transplantation.">Surgical technique of orthotopic liver transplantation.</a> Gastroenterol. Clin. North. Am. 17 (1), 33-51 (1988).</li><li>Hansen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+examination+and+evaluation+of+donor+bile+ducts+received+during+orthotopic+liver+transplantation--a+morphological+clue+to+ischemic-type+biliary+lesion?.">Histological examination and evaluation of donor bile ducts received during orthotopic liver transplantation--a morphological clue to ischemic-type biliary lesion?.</a> Virchows Arch. 461 (1), 41-48 (2012).</li><li>Monbaliu, D., Brassil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Machine+perfusion+of+the+liver:+Past,+present+and+future.">Machine perfusion of the liver: Past, present and future.</a> Curr. Opin. Organ. Transplant. 15 (2), 160-166 (2010).</li><li>Oldani, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-retrieval+reperfusion+decreases+cancer+recurrence+after+rat+ischemic+liver+graft+transplantation.">Pre-retrieval reperfusion decreases cancer recurrence after rat ischemic liver graft transplantation.</a> J. Hepatol. 61 (2), 278-285 (2014).</li><li>Tromans, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temperature+and+pressure+dependent+solubility+of+oxygen+in+water:+A+thermodynamic+analysis.">Temperature and pressure dependent solubility of oxygen in water: A thermodynamic analysis.</a> Hydrometallurgy. 48 (3), 327-342 (1998).</li></ol>

Die Autoren des Manuskripts habe keinen Interessenkonflikt offen zu legen.

Dieses Video bietet eine Schritt für Schritt-Protokoll für normothermen Maschine Perfusion des menschlichen Spenderlebern mit einem Gerät, das druckgesteuerten Zwei Perfusion durch die Leberarterie und Pfortader ermöglicht. Während nach diesem Protokoll, habe technische Störungen der Perfusion Maschine nicht auf, und alle Transplantate waren gut perfundierten und gut mit Sauerstoff. Die Ex-situ perfundierten Lebern hatte stabile Hämodynamik und waren metabolisch aktiv, wie die Produktion von Gallenflüss...

Die aktuelle Methode der Organkonservierung in Lebertransplantation ist spülen mit und anschließende Lagerung von Spenderlebern in kaltem (0-4 ° C) Konservierungsfluid (wie University of Wisconsin Lösung oder Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat-Lösung). Dieses Verfahren wird als statisches Kühllager (SCS) bezeichnet. Obwohl die Stoffwechselrate von Lebern bei 0-4 ° C sehr gering ist, besteht immer noch die Nachfrage nach Sauerstoff 0,27 umol / min / g Lebergewebe, die bei der SCS 1 nicht bereitgestellt werden kann. Das herkömmliche Verfahren zum SCS führt daher zu einem gewissen Grad von (zusätzlichen) Verletzung des Spenderlebern. Während diese Menge an Konservierungsschaden ist nicht ein Problem in Spenderlebern von guter Qualität kann eine kritische und begrenzende Faktor bei suboptimalen Lebern, die bereits einen gewissen Grad der Schädigung im Spender erlitten werden. Aus diesem Grund werden Lebern mit suboptimaler Qualität oder sogenannten erweiterten Kriterien Donor (ECD) Leber zur Transplantation häufig das Risiko, o abgelehntf frühen Transplantatversagen wird als zu hoch zu sein. Hohe verzögerten Transplantatfunktion, primäre nicht-Funktion, und nicht-Anastomosen Gallengangstenosen (NAS) haben bei Empfängern von Lebern von der Spende nach dem Kreislauf Tod (DCD), ältere Spender oder Empfänger von Transplantaten steatotic 2 beschrieben. NAS sind eine Hauptursache von Morbidität und Mortalität nach einer Lebertransplantation. NAS kann in beiden extra- und intrahepatischen Gallengänge Spender auftreten und kann durch intraduktale Gallenschlamm und Guss Bildung 3,4 begleitet werden. Obwohl die Ätiologie von NAS wird gedacht multifaktoriell zu sein, hat Ischämie / Reperfusion Verletzungen der Gallengänge bei Transplantaterhaltung und Transplantation als eine wichtige zugrunde liegende Mechanismus 2,5 identifiziert. Transplantation eines DCD Transplantats wurde als einer der stärksten Risikofaktoren für die Entwicklung von NAS identifiziert. Die Kombination von einer Periode warmer Ischämie in einem DCD Donor Kaltischämiezeit während Organkonservierung und nachfolgende ReperfusionVerletzung im Empfänger gedacht für irreversible Schädigung der Gallenwege, die in Kombination mit einem schlechten regenerative Kapazität der Gallenwege, ergibt fibrotische Narbenbildung und Verengung der Gallengänge nach einer Lebertransplantation 2,5 verantwortlich. NAS wurden in bis zu 30% der Patienten, die eine Leber DCD 6-8 berichtet. Es ist deutlich geworden, dass die aktuelle Methode der SCS von Lebertransplantationen für eine Transplantation nicht ausreichend für preinjured ECD Lebern wie die von DCD Spender ist. Alternative Methoden nötig sind, um zu steigern und optimieren den Einsatz von ECD Lebern für Transplantationen. Maschine Perfusion (MP) ist ein Verfahren zur Organkonservierung, die eine bessere Konservierung von Spenderorganen bereitstellen kann, verglichen mit SCS. MP kann zur Konservierung von Transplantaten ECD besonders relevant sein. Ein wichtiger Vorteil der MP ist die Möglichkeit, Sauerstoff an das Transplantat während der Konservierungsdauer bereitzustellen. MP kann bei verschiedenen Temperaturen durchgeführt werden,die als hypo (0-10 ° C), subnormothermic (10-36 ° C) und normothermic (36-37 ° C), MP (NMP) klassifiziert wurden. Je nach dem für MP verwendeten Temperatur, hat die Art der Perfusionsflüssigkeit angepaßt werden und mit steigender Temperatur mehr Sauerstoff zugeführt werden sollte. Die erste klinische Anwendung von MP in menschlichen Lebertransplantation wurde am hypothermen Perfusion ohne aktive Sauerstoffversorgung des Perfusionsflüssigkeit 9,10 basiert. In Tiermodellen hat hypo oxygenierten MP (0-10 ° C) wurde gezeigt, dass schützenden Wirkungen gegen Ischämie / Reperfusion von Lebertransplantationen 11 und eine bessere Konservierung des peribiliären Gefäßplexus von den Gallengängen 12 zur Verfügung zu stellen. Subnormothermic oxygenierten MP bei 20 ° C oder 30 ° C ist auch in Tiermodellen untersucht worden, und es wurde gezeigt, um eine schnellere Genesung von Transplantatfunktion DCD Lebern bereitzustellen, im Vergleich zu 13,14 SCS. Die Machbarkeit subnormothermic Sauerstoff angereichert MP menschlicher Lebern war recständig in einer Reihe von sieben verworfen menschlichen Spenderlebern 15 gemeldet. NMP (37 ° C) ist für die Beurteilung der Transplantatüberlebensfähigkeit und Funktionalität vor der Transplantation 16,17. Darüber hinaus ermöglicht die schrittweise MP Wiedererwärmung des Transplantats vor der Transplantation, die gezeigt wurde, dass die Verwertung und Wiederbelebung des Transplantats 18 zu erleichtern. Die Perfusionsvorrichtung im aktuellen Protokolls für hepatische Perfusion Maschine verwendet ermöglicht Dual Perfusion (über die Pfortader und die Leberarterie) mit zwei Kreiselpumpen, die einen kontinuierlichen Pfortaderflusses und eine pulsierende arterielle Strömung bereitzustellen. Das System ist druckgesteuert, so dass die automatische Regulierung der Strömung durch die Leber, in Abhängigkeit von der intrahepatischen Beständigkeit. Zwei Hohlfasermembran-Oxygenatoren ermöglichen die Sauerstoffversorgung des Transplantats, als auch für die Entfernung von CO 2. Die Temperatur kann auf Basis der beabsichtigten Art der MP (Minimum temperat eingestellt werden<html> ure von 10 ° C). Fluss, Druck und Temperatur werden auf der Vorrichtung in Echtzeit, die eine kontinuierliche Kontrolle der Perfusion Vorgangs angezeigt. Eine neue sterile Einweg-Schlauchsatz, Behälter und Oxygenatoren für die Perfusion von jedem Transplantat (Abbildung 1) zur Verfügung. Das Ziel dieses Artikels ist es, Video eine Schritt für Schritt-Protokoll für ex situ normothermen Maschine Perfusion des menschlichen Spenderlebern mit dieser neu entwickelten Leberperfusion Maschine bereitzustellen. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/52688/52688fig1.jpg" /> Figur 1: (A) Eine schematische Zeichnung, (B) ein Foto der Perfusion Maschine (C) eine genauere Ansicht des Oxygenators, und (D) Zentrifugalpumpe zum normothermic Perfusion von menschlichem Spenderlebern verwendet.bekommen = &quot;_ blank&quot;&gt; Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Liver Assist</td>
			<td>Organ Assist</td>
			<td>OA.Li.Li.140</td>
			<td>Perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liver Assist disposable package</td>
			<td>Organ Assist</td>
			<td>OA.Li.DP.540</td>
			<td>Disposable set and cannulas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meredith No.8</td>
			<td>Vygon Nederlands B.V.</td>
			<td>1362082</td>
			<td>Bile duct cannula</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human albumin 200g/l / ALBUMAN</td>
			<td>Sanquin</td>
			<td>15522598</td>
			<td>100 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified parenteral nutrition</td>
			<td>Baxter Nederland B.V.</td>
			<td>N14G30E</td>
			<td>7.35 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multivitamins for infusion / CERNEVIT</td>
			<td>Baxter International Inc.</td>
			<td>9800927</td>
			<td>7 ul</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentrated trace elements for infusion / NUTRITRACE</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG</td>
			<td>14811332</td>
			<td>7.35 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metronidazole 5mg/ml</td>
			<td>Baxter Nederland B.V.</td>
			<td>98181882</td>
			<td>40 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazoline / SERVAZOLIN</td>
			<td>Sandoz B.V.</td>
			<td>15611337</td>
			<td>2 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast acting insulin&#160;</td>
			<td>various vendors</td>
			<td></td>
			<td>20 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium glubionate, intravenous solution 10%, 137.5 mg/mL</td>
			<td>Sandoz</td>
			<td>97038695</td>
			<td>40 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile H2O</td>
			<td>Fresenius Kabi Nederland B.V.</td>
			<td>98084453</td>
			<td>51.3 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9%</td>
			<td>Baxter Nederland B.V.</td>
			<td>15262510</td>
			<td>160 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin 5000 IE/ml for i.v. administration</td>
			<td>LEO Pharma B.V.</td>
			<td>98026178</td>
			<td>4 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate 8,4%</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG</td>
			<td>97973874</td>
			<td>The amount depends on the pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Packed red blood cell (in SAGM)</td>
			<td>Blood bank (Sanquin)</td>
			<td>N0012000</td>
			<td>750 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fresh frozen plasma</td>
			<td>Blood bank (Sanquin)</td>
			<td>N04030A0/N04030B0</td>
			<td>900 ml</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex situ normothermic machine perfusion of donor livers

Im Gegensatz zu herkömmlichen statischen kalten Konservierung (0-4 ° C), kann ex situ-Perfusion Maschine eine bessere Konservierung von Spenderlebern. Kontinuierliche Perfusion von Organen die Möglichkeit bietet, Organqualität zu verbessern und ermöglicht ex situ Lebensfähigkeit Beurteilung der Spenderlebern vor der Transplantation. Dieses Video Artikel enthält eine Schritt für Schritt-Protokoll für Ex-situ-normothermen Maschine Perfusion (37 ° C) der menschlichen Spenderlebern mit einem Gerät, das einen Druck und Temperatur gesteuert pulsatile Perfusion der Leberarterie und kontinuierliche Perfusion der Pfortader stellt. Die Perfusionsflüssigkeit wird durch zwei Hohlfasermembran-Oxygenatoren mit Sauerstoff angereichert und die Temperatur zwischen 10 ° C und 37 ° C geregelt werden. Während der Perfusion kann die metabolische Aktivität in der Leber als auch der Grad der Schädigung durch die biochemische Analyse von Proben aus der Perfusionsflüssigkeit genommen beurteilt werden. Maschinendurchblutung ist ein sehr vielversprechendes Werkzeugum die Anzahl von Lebern, die zur Transplantation geeignet sind, zu erhöhen.

12 menschliche Lebern, die für die Transplantation aus verschiedenen Gründen abgelehnt wurden, wurden nach dem Erhalt informierte Zustimmung für die Forschung aus Spenderfamilien verwendet. Spender-Eigenschaften sind in Tabelle 2 unter Verwendung des in diesem Dokument beschriebenen Protokoll beschrieben. Die menschlichen Spenderlebern wurden normothermically 6 h perfundiert. Die Qualität der Lebertransplantate wurden durch Überwachung der makroskopische Homogenität Leberperfusion (- D 2A)...

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Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Hier präsentieren wir ein Protokoll beschreibt, sauerstoffreiches ex situ Maschine Perfusion der Spenderleber Transplantate. Dieser Artikel enthält eine Schritt für Schritt-Protokoll zu beschaffen und bereiten den Lebertransplantat für Maschinendurchblutung, bereiten Sie die Perfusionsflüssigkeit, prime die Perfusion Maschine und durchzuführen, mit Sauerstoff angereicherten normothermen Maschine Perfusion des Transplantats.

Ex-situ-normothermen Maschine Perfusion von Spenderlebern

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

ex-situ-normothermic-machine-perfusion-of-donor-livers

Research

JoVE Journal

Medicine

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

11.1K Aufrufe.  University of Groningen, University Medical Center Groningen.  Hier präsentieren wir ein Protokoll beschreibt, sauerstoffreiches ex situ Maschine Perfusion der Spenderleber Transplantate. Dieser Artikel enthält eine Schritt für Schritt-Protokoll zu beschaffen und bereiten den Lebertransplantat für Maschinendurchblutung, bereiten Sie die Perfusionsflüssigkeit, prime die Perfusion Maschine und durchzuführen, mit Sauerstoff angereicherten normothermen Maschine Perfusion des Transplantats. 

Serie: Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a serious problem. Therefore, the acceptance criteria for organ donors have been extended leading to the usage of marginal kidney grafts. These marginal organs tolerate cold storage poorly resulting in increased preservation injury and higher rates of delayed graft function. To overcome the limitations of cold storage, extensive research is focused on alternative normothermic preservation methods.
Ex vivo normothermic organ perfusion is an innovative preservation technique. The first experimental and clinical trials for ex vivo lung, liver, and kidney perfusions demonstrated favorable outcomes.
In addition to the reduction of cold ischemic injury, the method of normothermic kidney storage offers the opportunity for organ assessment and repair. This manuscript provides information about kidney retrieval, organ preservation techniques, and isolated ex vivo normothermic kidney perfusion (NEVKP) in a porcine model. Surgical techniques, set up for the perfusion solution and the circuit, potential assessment options, and representative results are demonstrated.

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

The severe organ shortage has resulted in increased use of marginal kidney grafts for transplantation. This has triggered interest in alternative storage methods, since marginal grafts especially tolerate cold storage poorly. The technique of normothermic ex vivo kidney perfusion (NEVKP) represents a novel preservation method for kidney grafts prior to &#160;transplantation.

Normothermen<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Kidney Perfusion für die Erhaltung der Nierentransplantate vor der Transplantation

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

Forschung

Medizin

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been introduced as a method to evaluate and modify organ function. NEVLP has many advantages in comparison to hypothermic and subnormothermic perfusion including reduced preservation injury, restoration of normal organ function under physiologic conditions, assessment of organ performance, and as a platform for organ repair, remodeling, and modification. Both murine and porcine NEVLP models have been described. We demonstrate a rat model of NEVLP and use this model to show one of its important applications &#8212; the use of a therapeutic molecule added to liver perfusate. Catalase is an endogenous reactive oxygen species (ROS) scavenger and has been demonstrated to decrease ischemia-reperfusion in the eye, brain, and lung. Pegylation has been shown to target catalase to the endothelium. Here, we added pegylated-catalase (PEG-CAT) to the base perfusate and demonstrated its ability to mitigate liver preservation injury. An advantage of our rodent NEVLP model is that it is inexpensive in comparison to larger animal models. A limitation of this study is that it does not currently include post-perfusion liver transplantation. Therefore, prediction of the function of the organ post-transplantation cannot be made with certainty. However, the rat liver transplant model is well established and certainly could be used in conjunction with this model. In conclusion, we have demonstrated an inexpensive, simple, easily replicable NEVLP model using rats. Applications of this model can include testing novel perfusates and perfusate additives, testing software designed for organ evaluation, and experiments designed to repair organs.

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant liver donor shortage, and criteria for liver donors have been expanded. Normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been developed to evaluate and modify organ function. This study demonstrates a rat model of NEVLP and tests the ability of pegylated-catalase, to mitigate liver preservation injury.

Ein kleines Tier Modell der Ex Vivo Normothermic Leber Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Normothermic Ex Situ Heart Perfusion in Working Mode: Assessment of Cardiac Function and Metabolism

The current standard method for organ preservation (cold storage, CS), exposes the heart to a period of cold ischemia that limits the safe preservation time and increases the risk of adverse post-transplantation outcomes. Moreover, the static nature of CS does not allow for organ evaluation or intervention during the preservation interval. Normothermic ex situ heart perfusion (ESHP) is a novel method for preservation of the donated heart that minimizes cold ischemia by providing oxygenated, nutrient-rich perfusate to the heart. ESHP has been shown to be non-inferior to CS in the preservation of standard-criteria donor hearts and has also facilitated the clinical transplantation of the hearts donated after the circulatory determination of death. Currently, the only available clinical ESHP device perfuses the heart in an unloaded, non-working state, limiting assessments of myocardial performance. Conversely, ESHP in working mode provides the opportunity for comprehensive evaluation of cardiac performance by assessment of functional and metabolic parameters under physiologic conditions. Moreover, earlier experimental studies have suggested that ESHP in working mode may result in improved functional preservation. Here, we describe the protocol for ex situ perfusion of the heart in a large mammal (porcine) model, which is reproducible for different animal models and heart sizes. The software program in this ESHP apparatus allows for real-time and automated control of the pump speed to maintain desired aortic and left atrial pressure and evaluates a variety of functional and electrophysiological parameters with minimal need for supervision/manipulation.

Normothermic ex situ heart perfusion (ESHP), preserves the heart in a beating, semi-physiologic state. When performed in a working mode, ESHP provides the opportunity to perform sophisticated assessments of donor heart function and organ viability. Here, we describe our method for myocardial performance evaluation during ESHP.

Normothermic Ex-Situ Herz Perfusion im Arbeitsmodus: Beurteilung der Herzfunktion und Stoffwechsel

The current standard method for organ preservation (cold storage, CS), exposes the heart to a period of cold ischemia that limits the safe preservation ...

Normothermic Negative Pressure Ventilation Ex Situ Lung Perfusion: Evaluation of Lung Function and Metabolism

Lung transplantation (LTx) remains the standard of care for end-stage lung disease. A shortage of suitable donor organs and concerns over donor organ quality exacerbated by excessive geographic transportation distance and stringent donor organ acceptance criteria pose limitations to current LTx efforts. Ex situ lung perfusion (ESLP) is an innovative technology that has shown promise in attenuating these limitations. The physiologic ventilation and perfusion of the lungs outside of the inflammatory milieu of the donor body affords ESLP several advantages over traditional cold static preservation (CSP). There is evidence that negative pressure ventilation (NPV) ESLP is superior to positive pressure ventilation (PPV) ESLP, with PPV inducing more significant ventilator-induced lung injury, pro-inflammatory cytokine production, pulmonary edema, and bullae formation. The NPV advantage is perhaps due to the homogenous distribution of intrathoracic pressure across the entire lung surface. The clinical safety and feasibility of a custom NPV-ESLP device have been demonstrated in a recent clinical trial involving extender criteria donor (ECD) human lungs. Herein, the use of this custom device is described in a juvenile porcine model of normothermic NPV-ESLP over a 12 h duration, paying particular attention to management techniques. Pre-surgical preparation, including ESLP software initialization, priming, and de-airing of the ESLP circuit, and the addition of anti-thrombotic, anti-microbial, and anti-inflammatory agents, is specified. The intraoperative techniques of central line insertion, lung biopsy, exsanguination, blood collection, cardiectomy, and pneumonectomy are described. Furthermore, particular focus is paid to anesthetic considerations, with anesthesia induction, maintenance, and dynamic modifications outlined. The protocol also specifies the custom device's initialization, maintenance, and termination of perfusion and ventilation. Dynamic organ management techniques, including alterations in ventilation and metabolic parameters to optimize organ function, are thoroughly described. Finally, the physiological and metabolic assessment of lung function is characterized and depicted in the representative results.

Normothermic Negative Pressure Ventilation Ex Situ Lung Perfusion: Evaluation of Lung Function and Metabolism

This paper describes a porcine model of negative pressure ventilation ex situ lung perfusion, including procurement, attachment, and management on the custom-made platform. Focus is made on anesthetic and surgical techniques, as well as troubleshooting.

Normotherme Unterdruckbeatmung ex situ Lungenperfusion: Beurteilung der Lungenfunktion und des Lungenstoffwechsels

Lung transplantation (LTx) remains the standard of care for end-stage lung disease. A shortage of suitable donor organs and concerns over donor organ ...

Normothermic Ex Vivo Pancreas Perfusion for the Preservation of Pancreas Allografts before Transplantation

Pancreas transplantation (PTx) is a curative treatment for people who live with the burden of a diagnosis of diabetes mellitus (DM). However, due to organ shortages and increasing numbers of patients being listed for PTx, new strategies are needed to increase the number of available grafts for transplantation. 
Static cold storage (SCS) is considered the gold standard for standard criteria organs. However, standard criteria donors (SCD) are becoming scarce and new strategies that can increase the rate of organ acceptance from extended criteria donors (ECD) are urgently needed. 
Normothermic ex vivo perfusion (NEVP) is one of the strategies that has become increasingly popular over the past couple of decades. This preservation method has already been used successfully in other organs (liver, kidneys, and lungs) but has been minimally explored in pancreas transplantation. The few papers that describe the method for pancreas show little success, edema being one of the major issues. The following manuscript describes the successful NEVP method and setup developed by our group to perfuse swine pancreas.

Normothermic Ex Vivo Pancreas Perfusion for the Preservation of Pancreas Allografts before Transplantation

Normothermic ex vivo machine perfusion (NEVP) has scarcely been explored for the preservation of pancreas allografts. We present an innovative preservation technique for pancreas allografts before transplantation.

Normotherme ex vivo Pankreasperfusion zur Konservierung von Pankreas-Allotransplantaten vor der Transplantation

Pancreas transplantation (PTx) is a curative treatment for people who live with the burden of a diagnosis of diabetes mellitus (DM). However, due to organ ...

Lung Rapid Recovery Procurement Combined with Abdominal Normothermic Regional Perfusion in Controlled Donation after Circulatory Death

Controlled donation after circulatory death (cDCD) has contributed to increasing donor numbers all over the world. Experiences published in the last years confirm that the outcomes after lung transplantation from cDCD are similar to those from brain death donors; however, the utilization of lungs from asystole donors remains low. Several reasons may be involved: different legal frameworks among countries and centers with different premortem interventions, inadequate lung donor care before procurement, or even poor experience with cDCD procedures and protocols.
Initially, the rapid recovery technique was commonly employed for the procurement of thoracic and abdominal organs in cDCD, but, in the last decade, abdominal normothermic regional perfusion (ANRP) with extracorporeal membrane oxygenation devices has become a useful method to restore blood flow to abdominal organs, allowing their quality improvement and their functional assessment prior to transplantation. This makes the donation procedure more complex and generates doubts about injury to the grafts due to dual temperature.
The aim of this article is to describe a protocol based on a single center experience with Maastricht III donors combining lung cooling rapid recovery in the thorax and abdominal normothermic regional perfusion. Tips and tricks focused on premortem interventions and lung procurement procedure techniques are explained. This may help to minimize the reluctance among professionals to use this combined technique and encourage other donor centers to use it, despite the increased complexity of the procedure.

The protocol combines a lung cooling rapid recovery technique with abdominal normothermic regional perfusion for abdominal graft procurement in controlled asystole donors, which is a safe and useful method to expand the donor pool.

Schnelle Genesung der Lunge in Kombination mit abdominaler normothermer regionaler Perfusion bei kontrollierter Spende nach Kreislauftod

Controlled donation after circulatory death (cDCD) has contributed to increasing donor numbers all over the world. Experiences published in the last years ...

Functional Assessment of the Donor Heart During Ex Situ Perfusion: Insights from Pressure-Volume Loops and Surface Echocardiography

Heart transplantation remains the gold standard treatment for advanced heart failure. However, the current critical organ shortage has resulted in the allocation of a growing number of donor hearts with extended criteria. These marginal grafts are associated with a high risk of primary graft failure and may benefit from ex situ perfusion before transplant. This technology allows for extended organ preservation using warm oxygenated blood perfusion with continuous metabolic monitoring. The only NESP device currently available for clinical practice perfuses the organ in an unloaded non-working state, which does not allow for functional assessment of the beating heart. We therefore developed an original platform of NESP in working mode conditions with adjustment of left ventricular preload and afterload. This protocol was applied in porcine hearts. Ex situ functional assessment of the heart was achieved with intracardiac conductance catheterization and surface echocardiography. Along with a description of the experimental protocol, we herein report the main results, as well as pearls and pitfalls associated with the acquisition of pressure-volume loops and myocardial power during NESP. Correlations between hemodynamic findings and ultrasound variables are of major interest, especially for further rehabilitation of donor hearts before transplantation. This protocol aims to improve the assessment of donor hearts to both increase the donor pool and reduce the incidence of primary graft failure.

Functional Assessment of the Donor Heart During Ex Situ Perfusion: Insights from Pressure-Volume Loops and Surface Echocardiography

A reliable noninvasive approach for functional assessment of the donor heart during normothermic ex situ heart perfusion (NESP) is lacking. We herein describe a protocol for ex situ assessment of myocardial performance using the epicardial echocardiography and conductance catheter method.

Funktionsbeurteilung des Spenderherzens während der Ex-situ-Perfusion : Erkenntnisse aus Druck-Volumen-Schleifen und Oberflächenechokardiographie

Heart transplantation remains the gold standard treatment for advanced heart failure. However, the current critical organ shortage has resulted in the ...

Rat Model of Normothermic Ex-Situ Perfused Heterotopic Heart Transplantation

Heart transplantation is the most effective therapy for end-stage heart failure. Despite the improvements in therapeutic approaches and interventions, the number of heart failure patients waiting for transplantation is still increasing. The normothermic ex situ preservation technique has been established as a comparable method to the conventional static cold storage technique. The main advantage of this technique is that donor hearts can be preserved for up to 12 h in a physiologic condition. Moreover, this technique allows resuscitation of the donor hearts after circulatory death and applies required pharmacologic interventions to improve donor function after implantation. Numerous animal models have been established to improve normothermic ex situ preservation techniques and eliminate preservation-related complications. Although large animal models are easy to handle compared to small animal models, it is costly and challenging. We present a rat model of normothermic ex situ donor heart preservation followed by heterotopic abdominal transplantation. This model is relatively cheap and can be accomplished by a single experimenter.

Here, we present an assessment protocol of a heterotopically implanted heart after normothermic ex situ preservation in the rat model.

Rattenmodell der normothermischen Ex-situ-perfundierten heterotopen Herztransplantation

Heart transplantation is the most effective therapy for end-stage heart failure. Despite the improvements in therapeutic approaches and interventions, the ...

<meta charset="utf8"></head><body>Weiterentwicklung der Lungentransplantation mit PolyhHb-basierter Perfusion in EVLP-Modellen von Ratten

Exploring Alternative Perfusion Solutions Using Next-Generation Polymerized Hemoglobin-Based Oxygen Carriers in a Model of Rat Ex Vivo Lung Perfusion

Lung transplantation is hampered by the lack of suitable donors. Previously, donors that were thought to be marginal or inadequate were discarded. However, new and exciting technology, such as ex vivo lung perfusion (EVLP), offers lung transplant providers extended assessment for marginal donor allografts. This dynamic assessment platform has led to an increase in lung transplantation and has allowed providers to use donors that were previously discarded, thus expanding the donor pool. Current perfusion techniques use cellular or acellular perfusates, and both have distinct advantages and disadvantages. Perfusion composition is critical to maintaining a homeostatic environment, providing adequate metabolic support, decreasing inflammation and cellular death, and ultimately improving organ function. Perfusion solutions must contain sufficient protein concentration to maintain appropriate oncotic pressure. However, current perfusion solutions often lead to fluid extravasation through the pulmonary endothelium, resulting in inadvertent pulmonary edema and damage. Thus, it is necessary to develop novel perfusion solutions that prevent excessive damage while maintaining proper cellular homeostasis. Here, we describe the application of a polymerized human hemoglobin (PolyhHb)-based oxygen carrier as a perfusate and the protocol in which this perfusion solution can be tested in a model of rat EVLP. The goal of this study is to provide the lung transplant community with key information in designing and developing novel perfusion solutions, as well as the proper protocols to test them in clinically relevant translational transplant models.

<meta charset="utf8"></head><body>Autor im Rampenlicht: Verwendung von polymerisiertem humanem Hämoglobin der nächsten Generation für eine verbesserte Bewertung und Konservierung der Spenderlunge b

Here, we describe the application of a polymerized human hemoglobin (PolyhHb)-based oxygen carrier as a perfusate and the protocol in which this perfusion solution can be tested in a model of rat ex vivo lung perfusion.

Erforschung alternativer Perfusionslösungen unter Verwendung von polymerisierten hämoglobinbasierten Sauerstoffträgern der nächsten Generation in einem Modell der ex vivo Lungenperfusion von Ratten