Work in Dr. Ogunwobi&#8217;s laboratory is supported by a Research Centers in Minority Institutions Program grant from the National Institute on Minority Health and Health Disparities (MD007599) of the National Institutes of Health. The contents of this manuscript are solely the responsibility of the authors and do not necessarily represent the official views of the NIMHD or the NIH.

Ethik Hinweise: Alle Tierversuche wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) des Hunter College der City University of New York zugelassen. 1. Pre-Experiment Procedures <ol><li> Nach der Ankunft in der Tierhaltung, zunächst beherbergen 3 BALB / c Mäusen mit einem Käfig mit einem gefilterten oben und Hackschnitzel Betten. Stellen Sie sicher, dass die Mäuse freien Zugang zu Nahrung, Purina Nagetierfutter und Wasser. Bettzeug und Lebensmittel sollte zweimal pro Woche gewechselt werden, während Käfige sollten einmal pro Woche gereinigt werden. </li><li> Induzieren Narkose bei Mäusen unter Verwendung eines Isofluran Verdampfer zusammen mit Sauerstoff mit einer konstanten Strömungsrate von 1 l pro min. Das System ist selbstständig und enthält eine Präzisions Vaporizer. </li><li> Position Tier in einer Kunststoff-Box, die die Genauigkeit Verdampfer und Gas / Narkosesystem mit ihm verbunden ist. Anfangs des Verdampfers eingestellt auf 2,5 bis Tier bewusstlos ist, an welchem ​​Punkt senken den Verdampfer bis 2. </li><li> Zu dieser Zeit wechseln dieVentilleitung, Abdichtung an die Box und an den Nasenkegel öffnen. </li><li> Bewegen Sie das Tier zum Vorbereitungsbereich, mit dem Nasenkegel ordnungsgemäß aufgestellt und angeschlossen (zur Aufrechterhaltung der Narkose). </li><li> Vorbereitung 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1 Maus HCC-Zellen für die Implantation per Maus. BNL 1ME A.7R.1 sollte in Medium wachsen (10% hitzeinaktiviertem FBS, 1% Penicillin / Streptomycin und 2 mM L-Glutamin) Inkubation in einer Zellkulturschale bei 37 ° C in einem befeuchteten Inkubator mit Luft und 5% CO 2. </li><li> Mit einer Spritze mit einer 20 G Nadel, das Implantat 100 ul PBS, enthaltend 5 × 10 6 BNL 1ME A.7R.1 Mausleberkarzinomzellen in einen Lappen der Leber von Balb / c-Mäusen, die primären Tumoren zu erzeugen. Nach der Implantation, Haus die BALB / c Mäuse in einem Käfig mit den gleichen Haus Anforderungen vor der Implantation. </li><li> Bei der experimentellen Endpunkt, klinische Hinweise auf Leberzellkarzinom zu beobachten, wie signifikante Reduktion der KörperzustandTor (in der Regel nach 4 Wochen festgestellt). An diesem Punkt gibt es eine Wahrscheinlichkeit, dass die primäre Tumoren in der Leber entwickelt, während Metastasen in der Lunge gebildet haben. Danach beginnt das Verfahren der Isolierung und Vermehrung der zirkulierenden Tumorzellen. </li></ol> 2. Sammeln von Vollblut für die zirkulierenden Tumorzellisolation HINWEIS: ausreichend bereinigt den OP-Bereich und stellen Sie sicher, es ist übersichtlich gestaltet. Autoklaven alle chirurgischen Instrumenten oder genießen in einem Desinfektionsmittel nach Empfehlung des Herstellers <ol><li> Opfern Mäusen durch humane Sterbehilfe bei experimentellen Endpunkt (klinische Anzeichen einer Tumorentwicklung). Euthanasie von Mäusen sollte beinhalten CO 2 Ersticken. Beachten Sie die Maus richtig an Anästhesie zu bestätigen korrekt verteilt. Kohlendioxid sollte langsam in die Kammer über einen Zeitraum von 5 veröffentlicht werden - 10 min, was zu Atemstillstand. Folgen Sie durch intra Ausbluten und cervical Dislokation. 5 </li><li> Verwenden Sie eine 25 G Nadel in eine 1 ml Spritze für die Sammlung von Vollblut angebracht. Heparanize die Spritze mit 0,01 ml Heparin. Punktion der Haut sofort mit der Nadel schlechter als die xyphisternum bei ca. 45 ° -Winkel. Voran Nadel langsam, um das Herz zu durchstechen, und senken Sie dann den Winkel der Nadel. Stetig halten Sie die Nadel und Spritze in Position, und ziehen Sie 500 ul - 1000 &amp; mgr; l Vollblut aus dem Herzen. </li><li> Entfernen Sie die Spritze und Nadel und übertragen Sie das Blut in eine pre-markierten 1,5 ml pyrogenfreien Röhre. Zentrifugieren Sie das Vollblut in 1,5 ml pyrogenfreien Röhrchen gesammelt bei 1.167 xg für 5 min. HINWEIS: Die Zentrifugation trennt das Vollblut-Probe in drei Schichten: der Boden oder Hämatokrit Schicht aus roten Blutzellen, eine dünne Zwischenschicht aus buffy coat und einen oberen Plasmaschicht. </li><li> Entfernen Sie die Plasma sorgfältig durch Pipettieren und sammeln sie in einem separaten 1,5 ml pyrogenfreien Röhre für Fürther Experimente wie Nachweis von zellfreien Nukleinsäuren 7. </li><li> Für die Isolierung von zirkulierenden Tumorzellen (CTC), zur Erhebung der Buffy-Coat in einen separaten 1,5 ml pyrogenfreien Röhre in Vorbereitung auf roten Blutzellen (RBC) Lyse. Dies ist notwendig, um restliche RBCs in der Buffy-Coat-Schicht zu entfernen. </li></ol> 3. Rezept für Rotes Blutkörperchen (RBC) Lysepuffer <ol><li> Machen Sie einen 1 l-Lösung von RBC Lysispuffer. </li><li> Machen Sie ein 500 ml Ammoniumchlorid und 500 ml Tris. Dann mischen, um eine 1 l-Lösung von RBC Lysepuffers mit einer Endkonzentration von 155 mM Ammoniumchlorid und 10 mM Tris erstellen. </li><li> Puffern der Lösung auf einen pH-Wert von 7,5 auf. Bewahren Sie die RBC Lysispuffer bei +2 bis +8 ° C, und bringen auf RT unmittelbar vor der Verwendung. </li></ol> 4. RBC Lyse von Buffy Coat <ol><li> 1 ml RBC Lysepuffer dem sterilen pyrogenfreien 1,5 ml Röhrchen mit dem gesammelten Buffy-Coat. </li><li> Den Inhalt des Rohres durchUmdrehen mehrmals. Die gemischte Inhalt des Röhrchens für 5 min bei RT auf der Bank zu inkubieren. Zentrifugieren der gemischten Inhalt für 5 min bei 1.167 x g. </li><li> Nach der Zentrifugation wird eine weißliche Pellets erhalten werden. Entsorgen Sie die rötliche Überstand langsam und vorsichtig in 10% Bleichmittel ohne Unterbrechung zu dem Pellet. Wenn das Pellet nicht weißlich, erneut führen Sie die Schritte 3,1-3,5. Erhöhung der Inkubationszeit in RBC Lysepuffer 10-15 min kann ebenfalls hilfreich sein. </li><li> Entsorgen Sie die biologischen Abfall einmal Dekontamination von biologischen Abfällen in 10% Bleichmittel nach 24 Stunden abgeschlossen ist. </li></ol> 5. Vermehrung in Zellkultur HINWEIS: Die Tumorzellen werden in der Regel schnell wachsende Zellen weiße Blutkörperchen, die reichlich in der ursprünglichen Mischung von Zellen in die Schale überimpft werden. Nach wiederholter Wechsel des Mediums, und nachfolgende Passagen CTCs, werden alle weißen Blutzellen entfernt und eine relativ reine Population von CTCs bleibt. <ol><li> NachVerwerfen des Überstandes in 10% Bleichmittel, wäscht den weißlich Pellet in 1 ml phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) mindestens einmal und Resuspension in komplettem Kulturmedium zur Vermehrung in Zellkultur. </li><li> Einmal Waschen abgeschlossen ist, wird 1 ml der vollständigen BNL 1ME A.7R.1 Kulturmedium (10% hitzeinaktiviertem FBS, 1% Penicillin / Streptomycin und 2 mM L-Glutamin), um das Pellet und das Pellet in dem Kulturmedium. </li><li> Samen der resuspendiert Mischung von Zellen in einer Zellkulturschale. Inkubieren der Zellkulturschale bei 37 ° C in einem befeuchteten Inkubator mit Luft und 5% CO 2. </li><li> Ändern Sie den Zellkulturmedium alle zwei bis drei Tage. Nach fünf bis sieben Tagen wird CTCs zu der Zellkulturschale eingehalten und gestartet haben wuchernden. Diese Zellen lebensfähig über 25 Passagen und nach mehrmaligem Einfrieren und Auftauen Zyklen 5 bleibt. </li></ol> 6. Prüfung von Leberzellkarzinom zirkulierenden Tumorzelllinie <ol><li> Führen apolymerase Kettenreaktion (PCR) basierende Methode, um nur einen bestimmten DNA-Abschnitt des Maus-β-Globin-Gens zu verstärken, um zu bestätigen, dass der Roman gegründet CTC Zelllinien sind Maus-Zellen, wie das Original implantiert BNL 1ME A.7R.1 HCC Linie. Methode wurde ursprünglich beschrieben und Steube et al validiert. 5,8 </li><li> Zuführen Immunofärbung für den Hepatozyten-spezifischer Marker cAMP responsive element binding protein 3-like 3 (CREB3L3) unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers. Dies wird diesen Roman gegründet CTCs sind in der Tat Hepatozyten wie das Original implantiert BNL 1ME A.7R.1 Zelllinie zu bestätigen. 5 </li></ol>

<ol>
	<li>Ashworth, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+case+of+cancer+in+which+cells+similar+to+those+in+the+tumors+were+seen+in+the+blood+after+death.">A case of cancer in which cells similar to those in the tumors were seen in the blood after death.</a> Australian Medical Journal. 1869, 146-147 (14).</li><li>van de Stolpe, A., den Toonder, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+Tumor+Cells:+What+Is+in+It+for+the+Patient?+A+Vision+towards+the+Future.">Circulating Tumor Cells: What Is in It for the Patient? A Vision towards the Future.</a> Cancers. 6, 1195-1207 (2014).</li><li>Sheng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capture,+release+and+culture+of+circulating+tumor+cells+from+pancreatic+cancer+patients+using+an+enhanced+mixing+chip.">Capture, release and culture of circulating tumor cells from pancreatic cancer patients using an enhanced mixing chip.</a> Lab on a chip. 14, 89-98 (2014).</li><li>George, T. J., Ogunwobi, O. O., Sheng, W., Fan, Z. H., Liu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#34;Tissue+is+the+issue&#34;:+circulating+tumor+cells+in+pancreatic+cancer.">&#34;Tissue is the issue&#34;: circulating tumor cells in pancreatic cancer.</a> Journal of gastrointestinal cancer. , (2014).</li><li>Ogunwobi, O. O., Puszyk, W., Dong, H. J., Liu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+upregulation+of+HGF+and+c-Met+drives+metastasis+in+hepatocellular+carcinoma.">Epigenetic upregulation of HGF and c-Met drives metastasis in hepatocellular carcinoma.</a> PloS one. 8, e63765 (2013).</li><li>Cheng, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transparent,+biocompatible+nanostructured+surfaces+for+cancer+cell+capture+and+culture.">Transparent, biocompatible nanostructured surfaces for cancer cell capture and culture.</a> International journal of nanomedicine. 9, 2569-2580 (2014).</li><li>Yu, M., Stott, S., Toner, M., Maheswaran, S., Haber, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+tumor+cells:+approaches+to+isolation+and+characterization.">Circulating tumor cells: approaches to isolation and characterization.</a> The Journal of cell biology. 192, 373-382 (2011).</li><li>Steube, K. G., Koelz, A. L., Drexler, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+verification+of+rodent+cell+lines+by+polymerase+chain+reaction.">Identification and verification of rodent cell lines by polymerase chain reaction.</a> Cytotechnology. 56, 49-56 (2008).</li><li>Pantel, K., Alix-Panabieres, C., Riethdorf, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+micrometastases.">Cancer micrometastases.</a> Nature reviews. Clinical oncology. 6, 339-351 (2009).</li><li>Pantel, K., Brakenhoff, R. H., Brandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection,+clinical+relevance+and+specific+biological+properties+of+disseminating+tumour+cells.">Detection, clinical relevance and specific biological properties of disseminating tumour cells.</a> Nature reviews. Cancer. 8, 329-340 (2008).</li><li>Cristofanilli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+tumor+cells,+disease+progression,+and+survival+in+metastatic+breast+cancer.">Circulating tumor cells, disease progression, and survival in metastatic breast cancer.</a> The New England journal of medicine. 351, 781-791 (2004).</li><li>De Giorgi, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+tumor+cells+and+bone+metastases+as+detected+by+FDG-PET/CT+in+patients+with+metastatic+breast+cancer.">Circulating tumor cells and bone metastases as detected by FDG-PET/CT in patients with metastatic breast cancer.</a> Annals of oncology : official journal of the European Society for Medical Oncology / ESMO. 21, 33-39 (2010).</li><li>Eloubeidi, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopic+ultrasound-guided+fine+needle+aspiration+biopsy+of+patients+with+suspected+pancreatic+cancer:+diagnostic+accuracy+and+acute+and+30-day+complications.">Endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration biopsy of patients with suspected pancreatic cancer: diagnostic accuracy and acute and 30-day complications.</a> The American journal of gastroenterology. 98, 2663-2668 (2003).</li><li>O'Toole, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+complications+of+EUS-guided+fine-needle+aspiration.">Assessment of complications of EUS-guided fine-needle aspiration.</a> Gastrointestinal endoscopy. 53, 470-474 (2001).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

In this study, how to isolate and propagate CTCs from the whole blood of a syngeneic mouse with HCC were described. The objective of this work is to enhance the ongoing studies of the mechanisms of cancer metastasis. 
A factor that contributes to the poor prognosis of many cancers is the lack of timely detection and consequent widespread dissemination of the malignancy3. CTCs originate from primary cancers and spread via the blood stream to distant organs. As such, CTCs are importan...

The cancer research community has known of the existence of circulating tumor cells (CTCs) since first being observed by Thomas Ashworth in 18691. Since then, CTCs have been shown to be important in tumor metastasis and disease progression2-5. Today, solid tumors are a major cause of morbidity and mortality worldwide. CTCs are rare cells that originate from primary tumors and travel through the blood stream to different organs of which only a small fraction ultimately develop into metastasis2-5. Notably, there is positive correlation between tumor size and CTC number3,4. 
An understanding of CTC biology can contribute to the search for targeted therapy. Furthermore, CTCs may have diagnostic applications. To achieve these potential clinical applications, one needs to overcome some current challenges to studying CTCs. One challenge is related to the fact that CTCs may be present as single cells or as clusters and they may even be able to change their phenotype in response to the blood microenvironment2. Moreover, detection can be very challenging, in part, due to the low count of CTCs (a few to hundreds per milliliter) among one billionhematologic cells per milliliterin the blood6. Nevertheless, in recent years, research into the potential clinical applications of CTCs from solid organ cancers has intensified.
Despite these efforts, the challenges of studying and understanding the role of CTCs persist due to the rarity of CTCs and the inadequacy of the technological tools currently available. Despite these challenges, the tremendous potential for clinical applications continues to be an incentive to pursue research into the role of CTCs in cancer metastasis.
We were recently successful in isolating and propagating in cell culture CTCs from an orthotopic syngeneic mouse model of hepatocellular carcinoma (HCC) metastasis5. The purpose of the current paper is to describe in detail all aspects of the successful methodology. The significance of this methodology lies in the fact that this approach may be modified in order to successfully isolate and propagate in culture human CTCs, thus enhancing the possibility of in vitro studies of CTC biology. 
There are multiple potential clinical applications for the use of CTCs. CTCs may be useful for prognosis, response monitoring, screening, dynamic monitoring of tumor molecular alterations, and personalized therapy4. Therefore, a better understanding of the biology of CTCs has high potential for clinical impact.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Heparin Sodium Salt 1G</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89508-852</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BTX Tube Micro 1.5mL Clear NS</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89511-254</td>
			<td>1.5mL&#160; pyrogen-free eppendorf Tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Sterile Disp BD 25GX1IN</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD305125</td>
			<td>25G Needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slp Tip SRNG 1ml 200 each per pack</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309659</td>
			<td>1mL syringe tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 1ml leur lok Pk 100</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309628</td>
			<td>1 mL syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Forceps Tissue 6</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-446</td>
			<td>Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyromold intrm 15X15X5MM PK 100</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25608-924</td>
			<td>Cyromold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryo-oct compund 4oz</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25608-930</td>
			<td>Oct compound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Slide sprfrst 25X75MM PK72</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48311-703</td>
			<td>Slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Cover Glass #2 22X5oMM OZ</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48-382-128</td>
			<td>Cover Glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Slide Box True North Fm Pu</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89140-278</td>
			<td>Slide Box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super HT PAP Pen</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89427-058</td>
			<td>PAP pen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water RNASe and DNAse free 2L</td>
			<td>VWR</td>
			<td>101454-204</td>
			<td>Nuclease Free Water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buffer Tris Ultra Pure Grade 500G</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97061-796</td>
			<td>Tris Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium Chloride ACS Grade 2&#160; 5KG</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-048</td>
			<td>Ammonium Chloride Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Tissue Culture Dish 60 x 15mm Style polystyrene</td>
			<td>VWR</td>
			<td align="right">353002</td>
			<td>Tissue Culture Dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clorox&#174; Germicidal Bleach, Regular</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89501-620</td>
			<td>Clorox Bleach</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS, 1X (Phosphate-Buffered Saline) without calcium &#38; magnesium (500mL)</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td>PBS, 1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, 1X&#160; with 4.5 g/L glucose &#38; L-glutamine without sodium pyruvate</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>10-017-CV</td>
			<td>DMEM 1X media for BNL 1ME A.7R.1 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Seru8m</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>35-010-CV</td>
			<td>FBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin Streptomycin Solution, 100X</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>30-002-Cl</td>
			<td>Penicillin Streptomycin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Biofuge pico</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td align="right">75002411</td>
			<td>13000rpm Centrifuge</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and propagation of circulating tumor cells from a mouse cancer model

Cancer metastasis is the foremost cause of cancer-associated deaths. Recent studies have shown that circulating tumor cells (CTCs) are important in cancer metastasis. Indeed, the number of CTCs correlates with tumor size. Here, a detailed description is provided of a methodology for isolation and propagation of CTCs from a syngeneic mouse model of hepatocellular carcinoma (HCC) which allows for downstream analysis of potentially important molecular mechanisms of solid organ tumor metastasis. This method is efficient and reproducible. It is a non-invasive technique and, therefore, has potential to replace the invasive biopsy of tissues from humans which may be associated with complications. Therefore, the method discussed here allows for the isolation and propagation of CTCs from whole blood samples such that they can be examined and characterized. This has potential for future adaptation for clinical applications such as diagnosis, and personalized targeted therapy.

Die hier beschriebene Methode hat gezeigt, dass CTC isoliert werden kann. Die Mäuse wurden auf humane Weise zu experimentellen Endpunkt euthanasiert. Der Prozess beteiligt Erstickung mit Kohlendioxid, intra-kardialen Ausbluten und Genickbruch. Ein Schema der wesentlichen Schritte des Verfahrens sind in Fig. 2 dargestellt ist Vollblutproben durch intrakardiale Ausbluten gesammelt wurden, unter Verwendung des oben beschriebenen Protokolls verarbeitet. Nach dem, wurde Zentrifugation verwe...

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Isolation and Propagation of Circulating Tumor Cells from a Mouse Cancer Model

Circulating tumor cells (CTCs) have been shown to play an important role in tumor metastasis. Here, a method for the isolation and propagation of CTCs from the whole blood of a syngeneic mouse tumor model of hepatocellular carcinoma (HCC) metastasis is described.

Isolierung und Vermehrung von zirkulierenden Tumorzellen aus einer Maus Cancer

Cancer metastasis is the foremost cause of cancer-associated deaths. Recent studies have shown that circulating tumor cells (CTCs) are important in cancer ...

isolation-propagation-circulating-tumor-cells-from-mouse-cancer

Research

JoVE Journal

Medicine

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