Name: olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease
Uploaded: 2014-08-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 27 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease at JoVE.com

This protocol follows any and all animal care and use guidelines and regulations set by IACUC at the University of Cincinnati. This work is funded by NIH/NINDS NS07722 and the Gardner Family Center for Parkinson&#8217;s Disease and Movement Disorders.

Alle Schritte des Protokolls folgen der Tierpflege und verwenden Richtlinien und Vorschriften durch die IACUC von der Universität von Cincinnati eingestellt. 1. Allgemeine Überlegungen <ol><li> Wenn möglich, testen Mäusen während ihrer aktiven Phase in der Dunkel-Zyklus. Typischerweise führen Tests unter schlechten Licht und mindestens 1 Stunde in den dunklen Zyklus. Allerdings, wenn Prüfung in der Dunkel-Zyklus nicht möglich ist, führen alle drei Tests während der Lichtzyklus. Beachten Sie, dass schnüffeln mal abnehmen kann, wenn die Mäuse während der Schlafzyklus getestet werden. HINWEIS: Während des Tests kann während der Schlafzyklus durchgeführt werden, können die Mäuse weniger Interesse an der vergrabenen Pellet, Blöcke, oder Duftpatrone zu zeigen. </li><li> Um eine Wirkung von außen olfaktorischen Signale zu reduzieren, tragen einen Basis Paar Handschuhe zu allen Zeiten überall in jedem Test und legen Sie dann ein sauberes Paar Handschuhe über das Basenpaar für jede Maus und jedes Gericht. Als allgemeine Regel gilt, wenn Sie Zweifel haben, setzen auf eine saubere Reihe von Handschuhen. Haben eine Schachtel mit Handschuhen lesenily verfügbar, da sie häufig gewechselt werden. HINWEIS: Wir verwenden Handschuhe aus Nitril für alle Tier Handhabung. </li><li> Reinigung Testmaterialien und Käfige zwischen Probanden mit einem Desinfektionsmittel / Sterilisationsmittel ist auch ein wichtiger Schritt in diese Reihe von Tests, um das Potenzial für die Verbreitung von Krankheiten zu reduzieren sowie zu entfernen unerwünschte Geruchssinn. </li></ol> 2. Buried Pellet-Test <ol><li> Mindestens zwei Tage vor der Prüfung erfassen das Gewicht der einzelnen Maus und Nahrung zu 90% des Körpergewichts zu beschränken. Vor der Prüfung und bei der Lebensmittelbeschränkung, geben jedem Maus 1-2 Stücke der Pellets während des Tests verwendet werden (zB ein Stück von gesüßten Cerealien). Überspringen Sie diesen Schritt nicht, weil Mäuse sind neophobic mit Nahrung und können nicht für die Pellet während des Tests zu suchen, wenn sie vorher nicht gegessen der Pellets. </li><li> Auf allen Testtagen, zu gewöhnen die Mäuse für 1 Stunde vor der Prüfung, indem sie ihre Käfig in den Testraum ohne Wasserflasche oder Feeder-bin. Haus sie in ihren eigenen Käfig mit nur einem Filter Deckel. </li><li> Während Gewöhnung, eine saubere Maus Käfig ~ 3 cm hoch mit sauberen Betten mit dem bestimmte die Bettwäsche wird gleichmäßig über den Käfig verteilt. Stellen Sie einen Timer für 5 min. </li><li> Nach 1 Stunde der Gewöhnung, begraben 1 gesüßt Getreide Pellet 0,5 cm unter dem Bettzeug, so dass es nicht sichtbar ist. </li><li> Entnehmen Sie die Test Maus aus ihrem Käfig, legen Sie sie in der Mitte des Testkäfig, setzen Sie den Filter Deckel auf den Käfig und starten Sie den Timer. </li><li> Stoppen Sie den Timer, wenn die Maus entdeckt das Pellet und beginnt zu essen. Beachten Sie die Zeit, um das Pellet begraben aufzudecken. </li><li> Wenn die Maus nicht das Pellet in 5 min zu finden, beenden Sie den Versuch und beachten Sie eine Punktzahl von 300 Sekunden für die Maus. Bewegen Sie den Pellet an die Spitze der Einstreu, so dass die Maus hat Zugang zu ihr, und lassen Sie die Maus, um die Pellets zu essen. </li><li> Nach der Studie, die Maus zurück in seinen Heimkäfig. </li><li> Das Bettzeug aus dem Testkäfig entleeren und reinigen Sie die cAlter mit Tierraum Reinigungslösung. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 2,4-2,9 für jede Maus und Handschuhe vor und nach jeder Maus ändern. </li><li> Nachdem alle Mäuse getestet werden, geben ihnen nur genug zu essen, um sie bei 90% Körpergewicht zu halten. </li><li> Führen Sie die Tests an den Tagen 2-5 auf die gleiche Weise als Test Tag 1 mit einer Ausnahme; begraben das Pellet in einem anderen Ort in den Käfig für jeden Versuch. </li><li> Am Testtag 6, führen Sie die Oberfläche Pellet-Studie. </li><li> Für die Oberflächen Pellet-Studie, nach dem gleichen Verfahren für die Prüfung Tag 1, aber statt zu begraben das Pellet unter dem Bettzeug legen Sie es auf der Bettwäsche. Notieren Sie sich die Zeit für die Maus zu finden und anfangen zu essen das Pellet. </li></ol> 3. Block Test <ol><li> Hausmäuse einzeln in saubere Käfige und legen 5 Blocks in den Käfig (mit der Bezeichnung AE), Handschuhwechsel vor der Einrichtung jeden Käfig. </li><li> Führen Sie den Test 24 Stunden später. Bewegen Testmäuse auf den Testbereich, entfernen Sie die Wasserflasche und Feeder bin, und legen all 5 Blöcke aus dem Käfig zusammen mit einer Handvoll von Bettwäsche in einen Plastikbeutel mit Ausweis des Tieres bezeichnet. Legen Sie den verschlossenen Plastikbeutel auf der Oberseite der Maus zu Hause Käfig. </li><li> Gewöhnen die Tiere in ihrem Heimkäfig ohne Wasserflasche, Feeder bin und Blöcke 1 Stunde vor der Prüfung. </li><li> Handschuhe zwischen jedem Käfig so zu ändern, dass die Düfte nicht zwischen Tieren / Blöcke ausgetauscht. </li><li> Richten Sie die Maus Käfige nebeneinander auf einem Tisch mit mindestens 10 cm zwischen den einzelnen Käfig. Positionieren Sie eine Videokamera, so dass die vor dem Käfig (nicht die lange Seite des Käfigs) in klare Sicht. </li><li> Stellen Sie den Timer für 30 Sekunden und beschriften Sie eine Karte mit den wichtigen Experiment (Datum, Maus ID, Versuch, etc.). Videoband das Label für 2-3 Sekunden. </li><li> Entfernen Sie Blöcke AD aus dem Plastikbeutel mit Identifikation, die Maus und legen Sie sie in der Mitte des Käfigs, so dass sie deutlich auf der Videokamera sichtbar. Vergewissern Sie sich, ~ 1 cm of Raum zwischen jedem der Blöcke. Setzen Sie den Filter nach oben zurück auf den Käfig. Starten Sie den Timer und Video für 30 Sekunden. </li><li> Nach 30 sec, stoppen Sie die Aufnahme, und entfernen Sie die Blöcke aus dem Käfig und legt sie zurück in den Plastikbeutel. </li><li> Handschuhe wechseln und fahren Sie dann mit der nächsten Maus, Wiederholung des gleichen Verfahrens für den ersten Versuch verwendet. Tun Sie dies für insgesamt 6 Studien für jede Maus dafür, dass es eine inter-Testintervall von ~ 5 min. </li><li> Am 7. Versuch, den gleichen Vorgang für die Versuche 1-6, außer zu bringen, anstatt Block D von der Maus den eigenen Käfig hinzufügen Block E von einer anderen Maus Käfig, so dass die Maus auf die Blöcke A, B, und C aus seiner ausgesetzt eigenen Käfig und Block E von einer anderen Maus Käfig. Hinweis im Labor Buch, dessen Block E jede Maus an und stell wo Block E ist in jeder Maus Käfig (zB ABCE oder AEBC) platziert ausgesetzt. Nehmen Block E von einer Maus des gleichen Geschlechts, aber nicht von einem ursprünglichen cagemate. Videotape für 30 sek. </li><li> Nach den 7 Studien zurück Tieren zu einem neuen sauberen Käfig mit ihren ursprünglichen Käfiggefährten. Sauber Blöcke im Test mit einem milden Reinigungsmittel und Wasser verwendet und an der Luft trocknen für den Einsatz in späteren Tests. </li></ol> 4. Gewöhnung / Entwöhnung <ol><li> Führen Sie die Gewöhnung / Entwöhnung Test in einer ähnlichen Weise wie die Block-Test aber statt mit Blöcken, die den Geruch einer Maus haben, verwenden Gewebekassetten halten Baumwolle mit verschiedenen Paaren von Extrakten duftend. </li><li> Führen Sie die Schritte 3.1-3.4 mit einem einzigen, fusselfreien Tuch Kartusche statt der Blöcke. </li><li> Gewöhnen Mäuse in den Testraum. </li><li> Die duftenden Gewebekassetten herzustellen, in einem separaten Raum. Setzen Sie einen kleinen Wattebausch in einen sauberen Patrone und fügen Sie dann 5 ul-Extrakt (zB Mandelextrakt) in die Baumwolle. Lassen Sie die Patrone oben über der Baumwolle und in einer eigenen Box oder Tasche mit dem Duft markiert. </li><li> Machen Sie dasselbe Verfahren foder eine zweite Duft (zB Anis-Extrakt). Handschuhe zwischen Umgang mit verschiedenen Düften ändern. Sicherstellen, dass der Wattebausch ist vollständig in das Gewebe Kartusche eingeschlossen. HINWEIS: Exposed Fasern aus dem Wattebausch kann dazu führen, das Tier, das Interesse an der Wattebausch zum Nisten Zwecke statt der Duft selbst haben. </li><li> Dann folgen Sie den Schritten von 3,6 bis 3,10 mit einem duftenden Gewebekassette für die ersten sechs Studien, die zweite Duftpatrone Gewebe für die siebte Studie. </li></ol> 5. Analyse der Videobänder <ol><li> Für den Block und Gewöhnung / Entwöhnung Tests haben eine Rater blind für experimentelle Bedingung messen die Zeit damit verbracht, schnüffeln jeden Block, mit Sniffing definiert als Nasen Kontakt mit diesem Block. Falls gewünscht, messen andere Verhaltensweisen wie Zeit, um die neuen Block (E) während des Test 7 und die Gesamtaktivität (die Anzahl der Bewegungen entlang der Länge und Breite des Heimkäfig) während jedes Test nähern. Ergebnis der aufgewendeten Zeit ein Schnüffelnd Zeit, sich von dem Videoband mit einer Stoppuhr zu nähern. </li><li> Ebenso für die Gewöhnung / Entwöhnung Test, haben ein Rater blind für experimentelle Bedingung messen die Zeit damit verbracht, schnupperte in die Patrone, die Zeit, die Patrone, und der Bewegungsaktivität zu nähern. </li></ol> 6. Statistik <ol><li> Analysieren Sie den Test mit Pellet begraben Nichtparametrische Statistik, da die Latenzzeit des Pellets dazu tendieren, Heterogenität der Varianz zeigen, zu finden. Mitteln die Latenz um das Pellet in 3-5 Tagen zu lokalisieren und dann vergleichen Sie zwischen Gruppen von Mäusen mit Hilfe eines Mann-Whitney-U-Test. Ähnlich zur Oberflächen Pellet Teil des Tests analysieren Latenz, um das Pellet zu finden unter Verwendung eines Mann-Whitney-U-Test, um Genotypen zu vergleichen. </li><li> Für den Block Test, Analyse der Daten von Test 7 (Einführung der neuen duftenden Block). Typischerweise beschäftigen nichtparametrische Analysen, um Heterogenität der Varianz erklären. Um Unterschiede in der Zeit analysieren verbrachte schnüffeln the Roman Block als auch Zeit, um die Blöcke für verschiedene Versuchsgruppen nähern, verwenden Sie den Mann-Whitney-U-Test. Verwenden Sie den Wilcoxon-Test zu Zeit verbrachte Sniffing den Roman Block zu Zeit verbrachte schnüffeln die bekannten Blöcke zu vergleichen. </li><li> Für die Gewöhnung / Dishabituation Test analysiert Verhalten para auf Versuchen 1, 6 und 7, ähnlich zu früheren Studien 20. Wenn Mäuse zeigen wenig bis kein Schnüffeln, verwenden Sie nicht-parametrische Analysen. </li></ol>

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We have no conflicts of interest.

Jede der in dieser Studie beschriebenen Tests messen verschiedene Aspekte der Riech in Mäusen. Die vergrabene Pellet-Test misst die Lebensmittel Motivation Aspekt des Geruchssinns, die Prüfung der Fähigkeit von Hunger (Lebensmittel beschränkt ist, nicht Nahrung entzogen) Mäusen, um eine schmackhafte Stück gesüßt Getreide unter Betten begraben zu erkennen. Der Block Test misst mehr der soziale Aspekt der Riechfunktion, die Prüfung der Fähigkeit von Mäusen, zwischen ihren eigenen Duft und die eines Artgenossen zu unterscheiden. Die Gewöhnung / Entwöhnung Test bewertet die Fähigkeit der Maus, zwischen bekannten und neuartigen, harmlosen Düften zu unterscheiden. Mit mehreren Tests ist wichtig, bei der Charakterisierung eines neuen Modells, weil Anomalien in der Lebensmittel Motivation oder Angst könnte in mutierten Mäusen beobachtet im Vergleich zu Kontrollen Unterschiede beitragen. Zum Beispiel, wenn nur der Block Test durchgeführt und verringerte Schnüffeln des Blocks, der den Geruch eines anderen Maus beobachtet wurde, ist es unklar, ob eine Olfactcher Defizit oder eine verbesserte Reaktion auf die Angst vor Artgenossen, die auf die Vermeidung von diesem Block führen kann. Wenn mehrere Tests durchgeführt und Defizite in allen Tests beobachtet, es unterstützt nachdrücklich eine Interpretation der Geruchsminderung. Allerdings, wenn Unterschiede in nur einem Test, nicht aber die anderen beobachtet, dann kann es zu einer Geruchsminderung subtiler sein, aber es ist unerlässlich, um auszuschließen, andere Erklärungen (dh, erweiterte Angst oder reduzierte Nahrungs Motivation). Weitere wichtige Faktoren im Auge zu behalten, wenn die Prüfung Riechfunktion Mäuse gehören die Hintergrundstamm und Geschlecht der Mäuse. Unterschiedlichen genetischen Hintergrund Stämme (dh C57BL / 6, DBA, etc.) können tief greifende Auswirkungen auf das Verhalten der Maus daher, empfiehlt es sich, jedes Protokoll in Wildtyp-Mäusen aus dem gleichen Hintergrund vor der Durchführung des gesamten Experiments anzupassen. Es wird auch empfohlen, dass männliche und weibliche Mäuse getrennt voneinander getestet, da das männliche olfaktorischen Systems hoch istly empfindlich auf Frauen in Östrus und olfaktorische Erkennung einer Frau in Östrus konnte mit der Leistung in allen drei Tests stören. Einige Schritte sind absolut entscheidend, wenn bei der Prüfung Geruchssinn bei Mäusen zu folgen. Es ist wichtig, bewusst die Gerüche der Experimentator an die Tiere einzuführen ist. Tragen von Handschuhen für die Verfahren ist wesentlich und häufigen Wechseln der Handschuhe zwischen Tieren erforderlich ist. Es ist immer eine gute Übung für den Experimentator nicht nach Köln oder Parfüm auf den Geruchssinn Testtage tragen. Obwohl einige Teile des Verfahrens unflexibel sind, gibt es andere Teile, die modifiziert und angepaßt werden kann, ohne die Gültigkeit oder die Empfindlichkeit des Tests. Zum Beispiel kann die Anzahl der Gewöhnungsversuche erhöht oder verringert werden, je nach Stamm von Mäusen getestet und wie schnell sie auf die Stimuli zu gewöhnen. Die Haupteinschränkung dieser Tests ist, dass sie alle durch eine Form der Motivation angetrieben, dass es Nahrungsmittel oder sozialen, dasses schwierig, völlig aus, Anomalien in der Motivation als Erklärung, wenn eine veränderte Reaktion beobachtet. Dies kann durch Analysieren von zusätzlichen Parametern, wie Aktivität während des Testens und der Zeit auf Reize Ansatz minimiert werden. Einmal gemeistert, können die Tests leicht bei der Prüfung des Phänotyps der neuen Mausmodellen von neurodegenerativen Erkrankungen eingesetzt werden. Darüber hinaus können die Tests, die die höchste Macht haben in präklinischen Studien testet potentielle Therapeutika enthalten sein (für ein Beispiel siehe ref. 25).

Riechstörungen auf einer Vielzahl von neurodegenerativen Störungen, einschließlich Parkinson-Krankheit (PD), Alzheimer-Krankheit und Huntington-Krankheit 1 verbunden. In PD, Riechstörungen sind Defizite bei der Geruchsidentifikation, Detektion und Diskriminierung und werden in bis zu 70-95% der Patienten 2-5 gefunden. Diese Defizite können die Kardinal motorischen Symptome von Parkinson durch bis zu 4 Jahre vorausgehen, was darauf hinweist, dass Riechstörungen können die frühen Stadien der PD 6-10 signalisieren. Das frühe Auftreten von Riechdefizite PD hat zu einem großen Interesse an Riechstörungen und den zugrunde liegenden Mechanismen geführt. In präklinischen Studien an Nagern, könnte Riechstörungen ein sensibler Ergebnis Maßnahme, um das therapeutische Potenzial von neuen therapeutischen Strategien vorherzusagen. Viele Tests wurden entwickelt und umfassend genutzt, um sensomotorischen Beeinträchtigungen in Nagetiermodellen der PD und TES charakterisierent das therapeutische Potenzial von neuartigen Behandlungen 11-15. Auch wenn olfaktorische Defizite sind in PD dokumentiert, Geruchs-Funktion wurde nicht routinemäßig in vielen Modellen gemessen. Diese Ansicht ändert sich aber mit der Entdeckung des genetischen Formen der PD und der Vorstellung, dass mehr akzeptiert PD ist eine systemische Erkrankung, die mehr als nur Sensomotorik. Derzeit gibt es zahlreiche Studien, in der genetischen Mausmodellen der PD und andere neurodegenerative Erkrankungen, die jetzt eine Analyse der Geruchssinn bei der Charakterisierung 16-24. Angesichts des wachsenden Interesses von Riechstörungen bei neurodegenerativen Erkrankungen, haben wir versucht, eine Batterie von Tests, die olfaktorischen verwendet werden können, um neue Modelle der Neurodegeneration sowie Testpotential krankheitsverändernden Therapien in präklinischen Studien charakterisieren zu montieren. Die in der vorliegenden Studie beschriebenen Tests wurden sowohl die Charakterisierung und präklinische Studien 18,25 eingesetzt. Die Tests highlIn dieser Studie wurde gezeigt, ighted in Detektieren Riechstörungen in einem häufig verwendeten alpha-Synuclein-überexprimierenden Maus-Modell der Parkinson-Krankheit 18 empfindlich. Sie umfassen die Test begraben Pellet 26,27, eine angepasste Version des Blocks Test 23,24,28,29, und die Gewöhnung / Entwöhnung Test 30. Es ist wichtig zu beachten, dass es mehrere Anpassungen der in dieser Studie beschriebenen Tests, die empfindlich Maßnahmen Riech bei Mäusen, die, die in dieser Studie werden die Tests Unser Labor hat die meiste Erfahrung mit und routinemäßig.

<table><tbody><tr><td>Cap&#039;n Crunch</td><td>Quaker Oats</td><td>30000065310</td><td></td></tr><tr><td>Wooden Blocks</td><td>Lara&#039;s Crafts</td><td>10144</td><td></td></tr><tr><td>Almond Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110664716</td><td></td></tr><tr><td>Anise Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110615619</td><td></td></tr><tr><td>Banana Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110669919</td><td></td></tr><tr><td>Coconut Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110669889</td><td></td></tr><tr><td>Lemon Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110669957</td><td></td></tr><tr><td>Orange Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>0011110669964</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Cartridges</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z672122-500EA</td><td>Manufactured by Simport no: M490-2</td></tr><tr><td>Cotton Balls</td><td>Kroger</td><td>11110793119</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Cages</td><td>Ancare</td><td></td><td>19 x 29 x 12.7 cm</td></tr><tr><td>Camcorder</td><td>Sony</td><td>HDR-HC9</td><td></td></tr><tr><td>MiniDV Tapes</td><td>Sony DVC premium</td><td>27242523432</td><td>60 minute long play</td></tr></tbody></table>

olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process and may be a useful behavioral marker for early detection. Earlier detection in neurodegenerative disease is a major goal in the field because this is when neuroprotective therapies have the best potential to be effective. Therefore, in preclinical studies testing novel neuroprotective strategies in rodent models of neurodegenerative disease, olfactory assessment could be highly useful in determining therapeutic potential of compounds and translation to the clinic. In the present study we describe a battery of olfactory assays that are useful in measuring olfactory function in mice. The tests presented in this study were chosen because they measure olfaction abilities in mice related to food odors, social odors, and non-social odors. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of Parkinson&#8217;s disease as well as in testing potential disease-modifying therapies.

Die vergrabenen Pellet Block und Gewöhnung / Dishabituation Tests sind sehr vorteilhaft Auswertungen des Geruchssinns bei Mäusen. Unter Verwendung dieser Tests haben wir signifikante Veränderungen in den Geruchssinn in mehreren genetischen Mausmodellen der Parkinson-Krankheit, einschließlich alpha-Synuclein-überexprimierenden (Thy1-ASYN) 18 und ATP13A2 Knockout-Mäusen gefunden. Beide Thy1-ASYN und ATP13A2 Knockout-Mäuse länger dauern, bis das Pellet begraben als die Kontrollen 18 zu finden. Abbildungen 1-3 zeigen Daten aus Wildtyp-und Knockout-Mäusen ATP13A2 gesammelt. In der vergrabenen Pellet-Test, ATP13A2 Knockout-Mäuse zeigen eine erhöhte Latenzzeit, um die vergrabene Pellet Vergleich zum Wildtyp Kontrollmäusen (Abbildung 1) zu finden. Im Block Test sowohl Wildtyp-und Knockout-Mäusen ATP13A2 schnüffeln den Roman Block von einer anderen Maus Käfig verglichen, um Blöcke von zu Hause Käfig (Abbildung 2). In der Gewöhnung / Entwöhnung Testwildtyp-Mäusen zeigen, Gewöhnung an einen Geruch und<html> dann erhöht, wenn ein Roman schnüffelt Geruch wird eingeführt (Abbildung 3). <img alt="Figur 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51804/51804fig1highres.jpg" width="500" /> Abbildung 1. Buried Pellet-Test. Latenz, um das Pellet in Wildtyp-(n = 10) und ATP13A2 KO (n = 14) bei 20-27 m Alter zu finden. * P &lt;0,05, Mann-Whitney-U <img alt="Figur 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51804/51804fig2highres.jpg" width="500" /> Abbildung 2. Blockprüfung Zeit belauscht das neue Block (E) in der Blocktest in Wildtyp-(n = 10) und ATP13A2 KO (n = 12) weiblichen Mäusen bei 20 -. 27m alt. ΔΔ eine p &lt;0,01 im Vergleich zu den Blöcken A, B und C aus dem gleichen Genotyp. Mann-Whitney U &quot;Src =&quot; / files / ftp_upload / 51804 / 51804fig3highres.jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Abbildung 3. Die Gewöhnung / Entwöhnung Test. Mittlere Zeit sniffing eine Duftpatrone in Wildtyp-Mäusen (Alter 9 m, n = 7) auf 6 Versuche und die Einführung einer Patrone mit einem neuen Duft auf Probe 7.

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Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

Riech Assays für Mausmodelle für Neurodegenerative Disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process ...

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21.9K Aufrufe.  University of Cincinnati. Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

Serie: Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Sensitive and reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of potential therapeutic treatments in preclinical trials for many neurodegenerative diseases. In Parkinson's disease, sensorimotor tests sensitive to varying degrees of nigrostriatal dysfunction are fundamental for testing the efficacy of potential therapeutics. Reliable and quite elegant sensorimotor measures exist for rats, however many of these tests measure sensorimotor asymmetry within the rat and are not entirely suitable for the newer genetic mouse models of PD. We have put together a battery of sensorimotor tests inspired by the sensitive tests in rats and adapted for mice. The test battery highlighted in this study is chosen for a) its sensitivity in a wide variety of mouse models of PD, b) its ease in implementing into a study, and c) its low expense. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of PD as well as in testing potential disease-modifying therapies.

In Parkinson's disease and movement disorders in general, sensitive and reliable behavioral assays are essential for testing novel potential therapeutics. Here, we describe a manageable battery of sensorimotor tests for mice that are sensitive to varying degrees of injury to the nigrostriatal system and useful for preclinical studies.

Beurteilung der Sensomotorik in Maus-Modellen der Parkinson-Krankheit

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Forschung

Verhalten

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

Die Prüfung auf Geruch Diskriminierung und Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected with aging and is a strong predictor of neurodegenerative diseases. Thus, olfaction testing is used as a non-invasive diagnostic method to detect neurological deficits early on. In order to understand the mechanisms underlying olfactory network susceptibility, olfactory research in rodents has gained momentum in the past decade.
Here, we present a very simple, time efficient and reproducible olfactory testing method of innate odor perception and sensitivity in mice without the need of any prior food or water restriction. The tests are performed in a familiar environment to the mice, require only the scents and a 2 min session of odorant exposure. The analysis is performed, post-hoc, using computer-assisted commands on ImageJ and can be, therefore, carried out from start to end by one researcher.
This protocol does not require any special hardware or setup and is indicated for any laboratory interested in testing olfactory perception and sensitivity.

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

Einfache und Computergestützte Riechtests für Mäuse

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible circuitry. In addition, this area's unique ability to generate new neurons throughout an organism's lifetime makes it an attractive system for developmental and regenerative biologists alike. Such interest necessitates a means for a quick, yet reliable assessment of olfactory function. Many tests of olfactory ability are complex, variable or not specifically designed for mice. Also, some tests are sensitive to memory deficits as well as defects in olfactory abilities, confounding obtained results.
Here, we describe a simple battery of tests designed to identify defects in olfactory sensitivity and preference. First, an initial general health assessment allows for the identification of animals suitable for further testing. Second, mice are exposed to various dilutions of scents to ascertain whether there is a threshold difference. Third, mice are presented with various scents, both attractive and aversive, that allow for the assessment of olfactory preference. These simple studies should make the initial characterization of olfactory behavior accessible for labs of varied resources and expertise.

Fundamental, yet unique properties of the rodent olfactory system have led to its increasing study among biologists. A relatively simple assessment of its function is then also needed. Here we describe sensitive tests for the characterization of mouse olfactory sensitivity and preference.

Olfaktorische Behavioral Testing in der adulten Maus

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible ...

Biologie

Assessment of Social Transmission of Food Preferences Behaviors

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy aging groups. For example, olfactory dysfunction in AD can present as impairment in olfactory recognition, emerging during early stages of the disease and worsening while the disease progresses. The social transmission of food preferences (STFP) task is based on a rudimentary form of communication between rodents concerning distant foods dependent on the transmission of olfactory cues. Healthy wild-type mice would prefer to eat a novel, flavored food that was previously cued by a conspecific, and this food preference would be hampered in transgenic AD mice, such as the APP/PS1 model. Indeed, a strong preference for the cued food in C57Bl6/J mice of 3 months of age was found, and this was reduced in 3 months old transgenic APP/PS1 mice. In summary, STFP task could be a powerful measure to be integrated in present subclinical detection assays of AD.

This paper presents a protocol for the investigation of social transmission of food preference in mice. The advantages and possible applications for this procedure, for instance, in detecting early changes in AD mouse models, are highlighted. To conclude, interpretation of the results in light of critical details are discussed.

Bewertung der sozialen Übertragung von Essen Vorlieben Verhaltensweisen

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy ...

Beurteilung der Geruchsbeeinträchtigung bei Mäusen durch eingeatmete Umweltschadstoffe

Studying the Effects of Inhaled Environmental Pollutants on Olfactory Function in Mice

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental pollutants exposure may impair olfaction; thereby, there is an urgent need for methods to evaluate the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfaction. Mice are ideal models for olfactory experiments because of their highly developed olfactory system and behavioral characteristics. To assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice, a detailed buried food test and social odor discrimination experiment is provided, including the experiment preparation, the selection and construction of experimental facilities, the testing process, and indexes of time. Meanwhile, timekeeping equipment, operational details, and the experimental environment are discussed to ensure the success of the assay. Zinc sulfate is used as the treatment to demonstrate the feasibility of the experimental approach. The protocol provides a simple and clear operational process for assessing the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice.

Autor im Rampenlicht: Bewertung der olfaktorischen Wirkung von Luftschadstoffen - Tests für vergrabene Lebensmittel und soziale Gerüche

This paper provides a detailed description of the buried food test and social odor discrimination experiment to assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice.

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental ...

Umwelt

<meta charset="utf8"></head><body>Entwicklung eines flexiblen, kostengünstigen Olfaktometers für Geruchsexperimente an Nagetieren

Constructing an Olfactometer for Rodent Olfactory Behavior Studies

The use of olfactometers to study rodent behavior and brain activity during olfactory tasks is crucial for understanding brain circuits. These sophisticated devices allow researchers to precisely control and deliver odor stimuli, enabling the investigation of complex olfactory processes in rodents. Although commercially available olfactometers are convenient, they present challenges when technical issues arise, often requiring costly assistance and potentially disrupting research timelines. This article details the construction of a custom olfactometer specifically designed for mouse olfactory behavior experiments, providing a comprehensive list of parts and step-by-step instructions. The olfactometer is controlled through MATLAB, offering a user-friendly interface for researchers. Importantly, the open-source code allows users to modify and adapt the system, tailoring behavioral tasks to meet specific experimental needs. Building a customized olfactometer empowers users with the knowledge and capability to perform custom experimental design and troubleshooting independently, saving both time and resources. This approach not only enhances research flexibility but also fosters a deeper understanding of the equipment's functionality, ultimately leading to more robust and reliable olfactory studies in rodents.

<meta charset="utf8"></head><body>Bau eines Olfaktometers für Studien zum Geruchsverhalten von Nagetieren Nahinfrarotspektroskopie Hyperscanning-Studie in der psychologischen Beratung

This protocol describes the construction of an olfactometer for go/no-go olfactory behavior experiments. Step-by-step instructions, along with images, are provided to ensure the successful construction of the olfactometer. Information for troubleshooting issues encountered during the process is also included.

Riech Assays für Mausmodelle für Neurodegenerative Disease

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

Beurteilung der Sensomotorik in Maus-Modellen der Parkinson-Krankheit

Die Prüfung auf Geruch Diskriminierung und Habituation in Mice

Einfache und Computergestützte Riechtests für Mäuse

Olfaktorische Behavioral Testing in der adulten Maus

Bewertung der sozialen Übertragung von Essen Vorlieben Verhaltensweisen

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Bau eines Olfaktometers für Studien zum Geruchsverhalten von Nagetieren

Bau eines Olfaktometers für Studien zum Geruchsverhalten von Nagetieren