Name: Serie: Video Imaging and Spatiotemporal Maps to Analyze Gastrointestinal Motility in Mice
Uploaded: 2016-02-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: 13.9K Aufrufe. The University of Melbourne. This article describes a video imaging technique and high-resolution spatiotemporal mapping to identify changes in the neural regulation of colonic motility in adult mice. Subtle effects on gastrointestinal (GI) function can be detected using this approach in isolated tissue preparations to advance our understanding of GI disease.

JCB und ELH-Y wurden durch das US Department of Defense CDMRP Autism Research Program (AR11034) unterstützt. NHMRC (1047674) zu ELH-Y.The Mai Stewart Bursary-Universität von Melbourne Vertrauen Stipendium für MS finanziert. Wir danken Ali Taher, Fátima Ramalhosa und Gracia Seger für technische Beiträge.

Tier Handhabung und Genickbruch der Tiere vor allen Versuchen waren streng durchgeführt nach Protokollen, die von der Tierversuchskommission für die University of Melbourne (Ethik-ID: 1.212.494,7) genehmigt 1. Gewebeentnahme und Dissection <ol><li> Euthanize erwachsene Mäuse durch Genickbruch. Wenn möglich Anästhesie vermeiden Einflüsse auf die Darmfunktion über Rezeptoren auf neuronalen Populationen des Interesses zu verhindern. </li><li> Notieren Sie die Gesamtkörpergewicht des Tieres, pin den Körper (über die vier Pfoten, ausgesetzt Bauchseite zu Experimentator) fest mit einer Dissektion Bord mit Injektionsnadeln (Größe: 20 G). </li><li> Mit Pinzette und Schere; Einen Einschnitt durch die Haut der unteren Bauchmuskelschichten überlagern. Weiter die Zange und Schere zu verwenden, um die Bauchhöhle entlang der Mittellinie des Bauches bis zum Brustbein zu öffnen. </li><li> Um die Gewebeentwässerungs verhindern, gießen physiological Salzlösung (Krebs-Lösung: 118 NaCl, 4,6 KCl, 2,5 CaCl 2, 1.2 MgSO 4, 1 NaH 2 PO 4, 25 NaHCO 3, 11 D-Glucose in mM - bei RT mit Carbogen Gas geperlt, 95% O 2 und 5 CO 2% für mindestens 20 min) auf Bauch-Inhalte in regelmäßigen Abständen (zB alle 30-60 sec) während der Präparation Prozess. </li><li> Um den Dickdarm isolieren, während an den Blinddarm und Mastdarm befestigt, halten Sie den Blinddarm (angrenzend an das proximale Ende des Dickdarms) sanft Pinzette mit ca. 4-5 cm über dem Körper des Tieres, während das Gekröse Trimmen feinen Sezierung Schere. </li><li> Achten Sie darauf, nicht zu handhaben, strecken oder den Magen-Darm-Gewebe geschnitten, während die angrenzenden Mesenterium entfernen. </li><li> Überschüssiges Gewebe (dh, der Harnblase und Hoden). Mit groben Präparierschere, machen zwei vertikale Einschnitte (dh ungefähr 0,5 cm von der Mittellinie), um den Beckenknochen auf ea zu schneidench Seite des Dickdarms. </li><li> Verwenden einer feinen Schere das Rektum von angrenzenden Becken Gewebe zu trennen und zu trimmen Muskel aus dem Dickdarm umgibt. </li><li> Legen Sie das in voller Länge Doppelpunkt (von Blinddarm zu Rektum) in ein Becherglas mit physiologischer Kochsalzlösung (vorher mit Carbogen mit Sauerstoff angereichert) und weiter bei RT mit Sauerstoff anzureichern. Entfernen Sie den Blinddarm und Mastdarm mit feinen Dissektionsscheren und in Becherglas ersetzen. </li><li> Leere Stuhl Pellets / Darminhalt von Kolon-Präparate durch sanfte Überdruck in der mündlichen Ende Aufbringen einer 5 ml Spritze an einem 200 ul Pipettenspitze mit physiologischer Kochsalzlösung gefüllt. Um das Gewebe in der Zukunft zu orientieren, verwenden Sie ein Insekt Stift am meisten proximale Ende des Dickdarms zu kennzeichnen, in denen Rillen in der Schleimhaut sichtbar sind. <ol><li> Ändern Sie den Kunststoffpipettenspitze die 5-ml-Spritze durch Entfernen von etwa 1 cm von der breitesten / proximalen Ende zu passen mit einer Rasierklinge. Um die Fließgeschwindigkeit zu erhöhen, erweitern das distale / kleinere Ende von auf einem ang Schneidle (ca. 45 ° C) mit einer Rasierklinge. </li></ol></li><li> Fassen Sie den Doppelpunkt Gewebe sanft an seinem proximalen Ende mit Pinzette, legen Sie die Pipettenspitze in das Lumen des Dickdarms und bündig physiologischer Kochsalzlösung durch das Lumen. </li></ol> 2. Herstellung von Dickdarmgewebe und Versuchsaufbau für Video Imaging <ol><li> Flush physiologischer Kochsalzlösung durch alle Rohre zu einem Zweikammer Organbad befestigt einrichten (Abbildung 1 und Abbildung 3), mit einer Spritze an einem 200 ul Pipettenspitze. Dieser Schritt entfernt jeglichen Schmutz innerhalb der Rohrleitung, die den Fluss der Lösung blockieren könnte. Für Schläuche siehe technische Daten zum Materialtabelle. </li><li> Sicherstellen, dass die Kammern des Organbad kontinuierlich mit physiologischer Kochsalzlösung geperlt mit Carbogen (95% O 2 und 5% CO 2 Durchflussrate von 5 ml min -1) superfundiert werden. Mit einem Temperaturfühler in regelmäßigen Abständen, sicherzustellen, dass die temperature des Bades zwischen 33 ° C -37 ° C gehalten. </li><li> Füllen Sie das Zulaufreservoir über einen 3-Wegehahn mit dem Einlassrohr mit etwa 20-30 ml physiologischer Kochsalzlösung eine 50 ml Spritze. </li><li> Während des Experiments, halten den Druck in der Zulaufbehälter mit arubber Stopfen mit einem Glasrohr (5 mm Innendurchmesser) durch seine Mitte eingesetzt. Stellen Sie sicher, dass die obere Öffnung des Einlaufbehälter sicher verschlossen (mit der inneren Glasröhre unversiegelt bleibt). </li><li> Setzen Sie den Doppelpunkt (Länge 5-7 cm) in das Organbad Kammer, um sicherzustellen, dass sie vollständig in physiologische Kochsalzlösung eingetaucht ist. </li><li> Kanülieren jedes Ende des Kolon-Segment mit den beiden eingetauchten Einlass / Auslass-Rohre (Einlass / Auslass-Rohre unterschiedlichen Durchmessers kann je nach Größe des Gewebelumens zB geändert werden. Postnatal Gewebe, erwachsenen Mäusen und Meerschweinchen) in dem Bad unter Verwendung von Standard Baumwolle Nähgarn. Befestigen des proximalen Endes des Dickdarms zu dem Einlaßrohr und dasdistalen Ende des Dickdarms zu dem Auslassrohr (verbunden über ein 3-Wege-Hahn in eine vertikale Abflußrohr; 6 cm in der Höhe). Stellen Sie sicher, dass das Gewebe nicht überdehnt oder zu entspannt nach Kanülierung Interferenz mit zukünftigen Messungen und Analysen zu vermeiden. </li><li> Nehmen die Länge des Dickdarms durch den Abstand zwischen dem proximalen und distalen Kanülierungen Messen einer 15 cm Lineal. Dies ist wichtig für Änderungen in Kontraktion Länge Ausbreitungsgeschwindigkeit und Kontraktion Initiationspunkten zu interpretieren. </li><li> Achten Sie auf eine stabile Grundlinie Lumendruck (cm H 2 O) hergestellt wird, bevor das Experiment beginnt. luminalen Druck berechnen, indem der vertikale Abstand von dem Gewebe zu dem Meniskus der physiologischen Kochsalzlösung in das Glasrohr der Zulaufbehälter (oral) Messung und der vertikalen Abflußrohr (anal). </li><li> Pflegen Gewebezubereitungen mit einer konstanten intraluminale Druck (zB 1-2 cm H 2 O), indem sichergestellt wird, dass der Zufluss-Anschlagdichtung pressuRe konstant gehalten wird und dass keine Blockaden, die in der Einrichtung sind. </li><li> Lassen Sie den Doppelpunkt in physiologischer Kochsalzlösung ins Gleichgewicht für 30 Minuten vor dem Darmbewegungen aufzuzeichnen. Prüfen Sie, ob Verstopfungen in den Zu- bzw. Abgänge aus Rohren ergeben, und entfernen Sie sie von Druck durch den Zufluss Reservoir Anwendung oder durch Wieder Kanülierung der oralen und analen Enden des Dickdarms. </li></ol> 3. Bilderfassung und experimentelles Protokoll <ol><li> Nehmen Darmbewegungen als Video-Dateien mit einer Videokamera (30 Bilder / s, 640 x 840 Pixel), die 10 bis 15 cm über dem Organbad auf einem Standard-Labor Retorte stehen (Abbildung 1). </li><li> Öffnen Sie Virtual Dub (Video-Capture-Software) über das Symbol auf dem Desktop. Von der &quot;Datei&quot; Tab wählen &quot;Capture AVI &#39;das Kamerabild zu sehen. Auf der Registerkarte &#39;Audio&#39; abwählen &#39;ermöglichen Audio-Aufnahme &quot;den Ton abzuschalten. <ol><li> In der Video-Registerkarte &quot;Kompression&quot; und &quot;DivX6.9.2. Codec &amp; #39; Videodateien zu minimieren Nutzung des Speicherplatzes zu komprimieren. Diese Funktion wird bei der Installation der Kompressionssoftware &#39;DivX&#39; verfügbar sind. </li></ol></li><li> Sie manuell die Kameraposition so einstellen, dass die gesamte Kanüle versehen Kolonsegment (mit einer Kanüle versehen Regionen unmittelbar angrenzend an den vertikalen Kanten des Videobildes) über die Video-Capture-Software-Fenster zu sehen ist (siehe Abbildung 1). Um die Bildqualität und minimieren Reflexionen zu verbessern, fügen Sie eine Papier / Pappe Schild an der Kamera Unterstützung Fremdlicht auf das Organbad zu blockieren. Videoqualität optimieren, indem Sie die Helligkeit, Kontrast und Belichtungseinstellungen Einstellen der Kamera-Software-Schnittstelle. <ol><li> Vor der Aufnahme legen Sie eine bestimmte Dateinamen; im &quot;Datei&quot; Tab wählen &#39;Set-Capture-Datei&#39; und einen eindeutigen Namen für das Video festlegen. </li><li> Start der Videoaufnahme von &quot;Capture-Datei&quot; von der &quot;Capture &#39;Werkzeugleiste drücken. So stoppen recordinG Wählen Sie den &quot;Capture stoppen&quot; Taste oder die &quot;Esc&quot; -Taste auf der Tastatur. </li></ol></li><li> Ersetzen Sie die physiologische Kochsalzlösung in den Zulauf Reservoir mit frischem physiologischer Kochsalzlösung enthalten alle 30 Minuten. <ol><li> Nehmen Lumendruck (siehe 2.9) und einen Temperaturfühler verwenden, beachten Sie die Orgel Badetemperatur. Wiederholen Sie diese Schritte während des gesamten Versuchs (dh alle 30 Minuten), um sicherzustellen, dass diese Variablen konstant sind. </li></ol></li><li> Nehmen Kolon-Aktivität insgesamt 3 Stunden (einschließlich Medikamentenapplikation und Auswaschen Dauer). Zur Datensicherung, Datensatzdaten in 15 Minuten Videosegmente. Eine vollständige Experiment wird in der Regel von 12 x 15 Minuten Videoaufnahmen zusammengesetzt sein. <ol><li> Nehmen Aktivität für 1 Stunde unter Kontrollbedingungen (physiologische Kochsalzlösung). </li><li> Wenden Sie das Medikament (entweder strömt in der Badewanne oder in das Lumen über den Zulauf Reservoir verabreicht) für 30 Minuten bis 1 Stunde. Hinweis: Verschiedene Arten der Verabreichung können yELD unterschiedliche Auswirkungen 23. </li><li> Bewerben frischen physiologischer Kochsalzlösung in das Bad oder Lumen bei einer 1 Std Auswaschphase. </li></ol></li></ol> 4. Datenverarbeitung und Erzeugung von Raum-Zeit-Karten <ol><li> Prozess jede Videoaufzeichnung offline Inhouse-Software in Matlab geschrieben mit (R2012a, Version 7.4, auf Anfrage), um Raum-Zeit-Karten veranschaulicht Kolonmotilität zu erzeugen. <ol><li> Offene Analysesoftware über das Symbol auf dem Desktop. </li><li> Im Befehlsfenster, geben Sie &quot;Analyse2&quot;, um die Analyse Systemsteuerung zu öffnen. </li></ol></li><li> Nutzen Sie die Kantenerkennungsfunktion zu raumzeitlichen Karten generieren, indem &quot;Kantenerkennung für AVI-Dateien&quot; in der Systemsteuerung klicken. Diese Funktion wird die Analysesoftware ermöglichen der neu kodierte Videos in Audio Video Interleaved (AVI) Format zu lesen. </li><li> Führen Sie die folgenden Schritte nacheinander Raum-Zeit-Karten zu erzeugen, unter Verwendung eines adaptive Kantendetektionsalgorithmus. <ol><li> Offene aufgenommenen Videodateien durch die Registerkarte &quot;Dateien hinzufügen&quot; auswählen, legen Sie &quot;Open Video&quot; und die Position der Videodateien wählen. </li><li> Aus den Video-Dateien innerhalb der Analyse-Software enthalten sind, wählen Sie die Datei von Interesse. </li><li> Wählen Sie eine rechteckige Region von Interesse in dem Rahmen des Videos, beispielsweise die gesamte Länge des Dickdarms, von dem Punkt, an dem der Dickdarm oral an den analen Kanülierung einer Kanüle versehen ist. Sicherstellen, dass die proximalen und distalen Kanülierung Punkte an den vertikalen Grenzen der Region von Interesse benachbart sind. Kantenerkennung Linien (rot und grün) erscheint automatisch auf dem Echtzeitbild überlagert. </li><li> Sicherstellen, dass die Kantenerkennungsschwelle Leitungen mit dem Doppelpunkt unmittelbar benachbart sind sowohl an den oberen und unteren Grenzen des Colongewebe (dies kann für jeden Video optimiert werden durch Verändern Detektionsschwellenwerten auf der Steuertafel). Stellen Sie sicher, dass die Kantenerkennung lines sind entlang der Länge des Dickdarms Bild kontinuierlich durch den Kontrast anpassen und Helligkeit über das Bedienfeld. </li><li> Geben Sie den vollständigen Länge des Dickdarms (mm) in der Breite Dialogfeld (wie in Schritt aufgezeichnet 2.7). Wählen Sie dann &quot;Heatmap erzeugen&quot;. </li><li> In der Pop-up-Fenster, wählen Sie einen Speicherort für die Datei einen Dateinamen für die Raum-Zeit-Karte gespeichert werden und zu spezifizieren. </li><li> Wählen Sie den &quot;.su2 &#39;Format und wählen Sie&quot; In den Warteschlange &quot;. Hinweis: .su2 Format komprimiert die Daten auf eine kleinere Dateigröße und mehrere Video-Dateien können in der Warteschlange hinzugefügt werden. </li><li> Wählen Sie &quot;Start Erkennung&quot; auf raumzeitliche Karten erzeugen. </li></ol></li></ol> 5. Analyse der Raum-Zeit-Karten <ol><li> Nutzen Raum-Zeit-Karten-Parameter zu schätzen, wie Frequenz, Ausbreitungsgeschwindigkeit, Länge und Dauer der CMMCs, Darmdurchmesser und dem Punkt der Initiierung und Leitung von Kontraktionen. <ol><li> So starten Raum-Zeit-AnalyseKarten, Typ &#39;analyse2 &quot;im Befehlsfenster, wie im vorherigen Abschnitt beschrieben. Anstelle von &quot;Kantenerkennung&quot;, wählen Sie die &quot;Heat Kartenanalyse&quot; -Taste. </li><li> Offene Raumzeit-Map-Dateien (.su2 Dateien), indem Sie die &quot;Dateien hinzufügen&quot; Tab und die Position des zuvor erhaltenen .su2 Dateien angeben. </li><li> Sobald der Raum-Zeit-Karte auf dem Bildschirm sichtbar ist, geben Sie einen Farbbereich auf dem Bedienfeld gewährleistet, dass die Mindest auf 1 gesetzt ist. Man beachte, dass die maximale 5-10 gemäß der Kontraktionsfähigkeit des Gewebes reichen kann. </li><li> Wählen Sie &#39;Lock Farbpalette &quot;, um sicherzustellen, alle Karten aus einem einzigen Experiment werden unter den gleichen Bedingungen untersucht. </li><li> Stellen Sie sicher, dass der Zeitrahmen Einstellungen für alle Raum-Zeit-Karten von einem bestimmten Experiment konstant sind. </li></ol></li><li> Um CMMC Frequenz zu bestimmen, manuell Kontraktionen zählt, die mehr als 50% der Länge des Dickdarms durchlaufen. Diese Kontraktionen kann visualized als rot / orange Streifen (Standard HSV-Farbindex) auf dem Raum-Zeit-Karte (Abbildung 2 für ein Beispiel siehe). Andere Kontraktionen, die kürzer sind oder nicht ausbreiten kann auch identifiziert und quantifiziert werden. </li><li> Falls gewünscht, führen weitere Analyse mit einer höheren Auflösung von diesen Karten. Beispielsweise detaillierten Eigenschaften einschließlich der Geschwindigkeit und der Dauer jeder Kontraktion untersucht werden. <ol><li> Um die Geschwindigkeit und Dauer zu messen, wählen Sie die &quot;Anmerken Kontraktionswellen&quot; auf der Heatmap-Analyse Bedienfeld. </li><li> Als nächstes vergrößern durch Klicken auf die Taste &quot;Zoom&quot; auf jeden ZMMK in und den interessierenden Bereich auswählen. Dann wählen Sie die &quot;Manuelle kommentieren&quot;, um jeder Kontraktion zu annotieren mit Hilfe der Maus eine Linie von der die meisten Ausgangsposition bis zum Ende jeder Kontraktion zu ziehen. Dieses Verfahren verwendet werden können, um die scheinbare Ausbreitungsgeschwindigkeit und Dauer der Streckungen zu messen, die (zum Beispiel zu verbreiten scheinen, sehen einal Ende Karten in 2A, 2B). Hinweis: Die Daten für Geschwindigkeit und Dauer unter dem Ergebnisfenster angezeigt. Diese Werte können durch Auswahl des &quot;Exportdaten&quot; in eine Tabellenkalkulation von Interesse übertragen werden. Unerwünschte Kommentare können durch Klicken auf den &quot;Entfernen ausgewählten Anmerkungen&quot; Taste entfernt werden. </li></ol></li><li> Falls gewünscht, verwenden, um die x und y Koordinaten der Raum-Zeit-Karten (Zeit und Position entlang des Dickdarms, beziehungsweise) die Position der Einleitung kleinen Kontraktionen oder CMMCs zu bestimmen. </li><li> In ähnlicher Weise, um Intervalle zwischen den Kontraktionen zu bestimmen und nutzen die &quot;Beschriften&quot; Funktion, die Dauer zwischen den Wehen zu messen. Wie zuvor können diese Ergebnisse in eine Tabelle exportiert werden, indem die &quot;Exportdaten&quot; auswählen. </li><li> Um den Ruhe Darm Breite zu messen, wählen Sie die &quot;Take Querschnitt&quot; auf der Heatmap-Analyse-Panel. <ol><li> Wählen Sie &quot;Add9; zum zeitlichen Querschnitte Panel. Doppelklicken Sie an einer beliebigen Stelle innerhalb der Karte eine horizontale Linie auf dem Wärme Karte überlagert zu erzeugen. Gut Durchmesser Daten werden nun in einem neuen Fenster angezeigt. </li><li> Um gut Durchmesser messen, setzen Sie den Cursor auf einer Spitze und angrenzende Mulde durchschnittlich gut Breite für einen bestimmten experimentellen Bedingungen zu erhalten. Veränderungen im Darm Durchmesser zwischen experimentellen Bedingungen verglichen werden. </li></ol></li></ol>

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	<li>Powell, A. K., O'Brien, S. D., Fida, R., Bywater, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+integrity+is+essential+for+the+propagation+of+colonic+migrating+motor+complexes+in+the+mouse.">Neural integrity is essential for the propagation of colonic migrating motor complexes in the mouse.</a> Neurogastroenterol Motil. 14, 495-504 (2002).</li><li>Furness, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+enteric+nervous+system+and+neurogastroenterology.">The enteric nervous system and neurogastroenterology.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9, 286-294 (2012).</li><li>Gwynne, R. M., Bornstein, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+underlying+nutrient-induced+segmentation+in+isolated+guinea+pig+small+intestine.">Mechanisms underlying nutrient-induced segmentation in isolated guinea pig small intestine.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 292, G1162-G1172 (2007).</li><li>Bush, T. G., Spencer, N. J., Watters, N., Sanders, K. M., Smith, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+migrating+motor+complexes+occur+in+both+the+terminal+ileum+and+colon+of+the+C57BL/6+mouse+in+vitro.">Spontaneous migrating motor complexes occur in both the terminal ileum and colon of the C57BL/6 mouse in vitro.</a> Auton Neurosci. 84, 162-168 (2000).</li><li>Fida, R., Lyster, D. J., Bywater, R. A., Taylor, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonic+migrating+motor+complexes+(CMMCs)+in+the+isolated+mouse+colon.">Colonic migrating motor complexes (CMMCs) in the isolated mouse colon.</a> Neurogastroenterol Motil. 9, 99-107 (1997).</li><li>Neal, K. B., Parry, L. J., Bornstein, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-specific+genetics,+anatomy+and+function+of+enteric+neural+serotonergic+pathways+in+inbred+mice.">Strain-specific genetics, anatomy and function of enteric neural serotonergic pathways in inbred mice.</a> J Physiol. 587, 567-586 (2009).</li><li>Roberts, R. R., Murphy, J. F., Young, H. M., Bornstein, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+colonic+motility+in+the+neonatal+mouse-studies+using+spatiotemporal+maps.">Development of colonic motility in the neonatal mouse-studies using spatiotemporal maps.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 292, G930-G938 (2007).</li><li>Spencer, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+migrating+motor+activity+in+the+colon.">Control of migrating motor activity in the colon.</a> Curr Opin Pharmacol. 1, 604-610 (2001).</li><li>Spencer, N. J., Bywater, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nerve+stimulation+evokes+a+premature+colonic+migrating+motor+complex+in+mouse.">Enteric nerve stimulation evokes a premature colonic migrating motor complex in mouse.</a> Neurogastroenterol Motil. 14, 657-665 (2002).</li><li>Roberts, R. R., Bornstein, J. C., Bergner, A. J., Young, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbances+of+colonic+motility+in+mouse+models+of+Hirschsprung's+disease.">Disturbances of colonic motility in mouse models of Hirschsprung's disease.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, G996-G1008 (2008).</li><li>Tough, I. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+peptide+YY+and+neuropeptide+Y+inhibit+colonic+ion+transport,+contractility+and+transit+differentially+via+Y(1)+and+Y(2)+receptors.">Endogenous peptide YY and neuropeptide Y inhibit colonic ion transport, contractility and transit differentially via Y(1) and Y(2) receptors.</a> Br J Pharmacol. 164, 471-484 (2011).</li><li>Hennig, G. W., Costa, M., Chen, B. N., Brookes, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+peristalsis+in+the+guinea-pig+small+intestine+using+spatio-temporal+maps.">Quantitative analysis of peristalsis in the guinea-pig small intestine using spatio-temporal maps.</a> J Physiol. 517 (Pt 2), 575-590 (1999).</li><li>Hoffman, J. M., Brooks, E. M., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gastrointestinal+Motility+Monitor+(GIMM).">Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM).</a> J Vis Exp. , (2010).</li><li>Smith, T. K., Gershon, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rebuttal+from+Terence+K.+Smith+and+Michael+D.+Gershon.">Rebuttal from Terence K. Smith and Michael D. Gershon.</a> J Physiol. 593, 3233 (2015).</li><li>Spencer, N. J., Sia, T. C., Brookes, S. J., Costa, M., Keating, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CrossTalk+opposing+view:+5-HT+is+not+necessary+for+peristalsis.">CrossTalk opposing view: 5-HT is not necessary for peristalsis.</a> J Physiol. 593, 3229-3231 (2015).</li><li>Tabuchi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+neuroligin-3+mutation+implicated+in+autism+increases+inhibitory+synaptic+transmission+in+mice.">A neuroligin-3 mutation implicated in autism increases inhibitory synaptic transmission in mice.</a> Science. 318, 71-76 (2007).</li><li>Jamain, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+of+the+X-linked+genes+encoding+neuroligins+NLGN3+and+NLGN4+are+associated+with+autism.">Mutations of the X-linked genes encoding neuroligins NLGN3 and NLGN4 are associated with autism.</a> Nat Genet. 34, 27-29 (2003).</li><li>Chaidez, V., Hansen, R. L., Hertz-Picciotto, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gastrointestinal+problems+in+children+with+autism,+developmental+delays+or+typical+development.">Gastrointestinal problems in children with autism, developmental delays or typical development.</a> J Autism Dev Disord. 44, 1117-1127 (2014).</li><li>Ibrahim, S. H., Voigt, R. G., Katusic, S. K., Weaver, A. L., Barbaresi, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+gastrointestinal+symptoms+in+children+with+autism:+a+population-based+study.">Incidence of gastrointestinal symptoms in children with autism: a population-based study.</a> Pediatrics. 124, 680-686 (2009).</li><li>Kohane, I. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+co-morbidity+burden+of+children+and+young+adults+with+autism+spectrum+disorders.">The co-morbidity burden of children and young adults with autism spectrum disorders.</a> PloS One. 7, e33224 (2012).</li><li>McElhanon, B. O., McCracken, C., Karpen, S., Sharp, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gastrointestinal+symptoms+in+autism+spectrum+disorder:+a+meta-analysis.">Gastrointestinal symptoms in autism spectrum disorder: a meta-analysis.</a> Pediatrics. 133, 872-883 (2014).</li><li>Peters, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rigid-compulsive+behaviors+are+associated+with+mixed+bowel+symptoms+in+autism+spectrum+disorder.">Rigid-compulsive behaviors are associated with mixed bowel symptoms in autism spectrum disorder.</a> J Autism Dev Disord. 44, 1425-1432 (2014).</li><li>Ellis, M., Chambers, J. D., Gwynne, R. M., Bornstein, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serotonin+and+cholecystokinin+mediate+nutrient-induced+segmentation+in+guinea+pig+small+intestine.">Serotonin and cholecystokinin mediate nutrient-induced segmentation in guinea pig small intestine.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 304, G749-G761 (2013).</li><li>Parracho, H. M., Bingham, M. O., Gibson, G. R., McCartney, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+between+the+gut+microflora+of+children+with+autistic+spectrum+disorders+and+that+of+healthy+children.">Differences between the gut microflora of children with autistic spectrum disorders and that of healthy children.</a> J Med Microbiol. 54, 987-991 (2005).</li><li>Buie, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation,+diagnosis,+and+treatment+of+gastrointestinal+disorders+in+individuals+with+ASDs:+a+consensus+report.">Evaluation, diagnosis, and treatment of gastrointestinal disorders in individuals with ASDs: a consensus report.</a> Pediatrics. 125, S1-S18 (2010).</li><li>Etherton, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autism-linked+neuroligin-3+R451C+mutation+differentially+alters+hippocampal+and+cortical+synaptic+function.">Autism-linked neuroligin-3 R451C mutation differentially alters hippocampal and cortical synaptic function.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 108, 13764-13769 (2011).</li><li>Etherton, M. R., Tabuchi, K., Sharma, M., Ko, J., Sudhof, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+autism-associated+point+mutation+in+the+neuroligin+cytoplasmic+tail+selectively+impairs+AMPA+receptor-mediated+synaptic+transmission+in+hippocampus.">An autism-associated point mutation in the neuroligin cytoplasmic tail selectively impairs AMPA receptor-mediated synaptic transmission in hippocampus.</a> EMBO J. 30, 2908-2919 (2011).</li><li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+neurexin+and+neuroligin+in+the+enteric+nervous+system+and+their+down-regulated+expression+levels+in+Hirschsprung+disease.">Expression of neurexin and neuroligin in the enteric nervous system and their down-regulated expression levels in Hirschsprung disease.</a> Mol Biol Rep. 40, 2969-2975 (2013).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+and+significance+of+neuroligins+in+myenteric+cells+of+Cajal+in+Hirschsprung's+disease.">Expression and significance of neuroligins in myenteric cells of Cajal in Hirschsprung's disease.</a> PloS One. 8, e67205 (2013).</li><li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+down-regulation+of+neuroligin-2+and+the+correlative+clinical+significance+of+serum+GABA+over-expression+in+Hirschsprung's+disease.">The down-regulation of neuroligin-2 and the correlative clinical significance of serum GABA over-expression in Hirschsprung's disease.</a> Neurochem Res. 39, 1451-1457 (2014).</li><li>Roberts, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+first+intestinal+motility+patterns+in+fetal+mice+are+not+mediated+by+neurons+or+interstitial+cells+of+Cajal.">The first intestinal motility patterns in fetal mice are not mediated by neurons or interstitial cells of Cajal.</a> J Physiol. 588, 1153-1169 (2010).</li><li>Barnes, K. J., Spencer, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+colonic+migrating+motor+complexes+occur+in+mice+lacking+the+endothelin-3+gene?.">Can colonic migrating motor complexes occur in mice lacking the endothelin-3 gene?.</a> Clin Exp Pharmacol Physiol. 42, 485-495 (2015).</li><li>Chambers, J. D., Bornstein, J. C., Thomas, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+neural+oscillators+and+muscle+feedback+are+required+for+the+intestinal+fed+state+motor+program.">Multiple neural oscillators and muscle feedback are required for the intestinal fed state motor program.</a> PloS One. 6, e19597 (2011).</li><li>Heredia, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Important+role+of+mucosal+serotonin+in+colonic+propulsion+and+peristaltic+reflexes:+in+vitro+analyses+in+mice+lacking+tryptophan+hydroxylase+1.">Important role of mucosal serotonin in colonic propulsion and peristaltic reflexes: in vitro analyses in mice lacking tryptophan hydroxylase 1.</a> J Physiol. 591, 5939-5957 (2013).</li><li>Chambers, J. D., Bornstein, J. C., Thomas, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+mechanisms+of+intestinal+segmentation+in+guinea+pigs:+a+combined+computational+modeling+and+in+vitro+study.">Insights into mechanisms of intestinal segmentation in guinea pigs: a combined computational modeling and in vitro study.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 295, G534-G541 (2008).</li><li>Huizinga, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+segmentation+motor+activity+in+the+intestine.">The origin of segmentation motor activity in the intestine.</a> Nat Commun. 5, 3326 (2014).</li><li>Neild, T. O., Shen, K. Z., Surprenant, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasodilatation+of+arterioles+by+acetylcholine+released+from+single+neurones+in+the+guinea-pig+submucosal+plexus.">Vasodilatation of arterioles by acetylcholine released from single neurones in the guinea-pig submucosal plexus.</a> J Physiol. 420, 247-265 (1990).</li></ol>

The authors have nothing to disclose

Mit diesem Video-Imaging-Technik, wurde ZMMK Frequenz als Hinweis auf Kolonmotilität gemessen in Wildtyp und NL3 R451C Mäusen, einem Mausmodell für Autismus-Spektrum-Störung 17. Unsere Ergebnisse zeigen eine Verringerung in der Anzahl der CMMCs in mutierten Mäusen NL3 R451C im Vergleich zu Wildtypmäusen in Gegenwart des 5HT-Rezeptorantagonist Tropisetron 3/4 darauf hindeutet, dass NL3 R451C Mäusen eine erhöhte Empfindlichkeit gegen Tropisetron aufweisen. Wir...

Die enterische Nervensystem (ENS) ist die intrinsische neuronale Netzwerk des Gastrointestinaltraktes und moduliert verschiedene Funktionen wie Verdauung von Darminhalt, der Absorption von Nährstoffen und die Sekretion und Resorption von Flüssigkeit. Neuronen der ENS sind in den myentericus und submuköse Plexus entfernt. Der Plexus myentericus spielt eine wichtige Rolle gastrointestinale Motilität 1 während das submuköse Plexus bei der Regulierung ist bei der Steuerung der Sekretion 2,3 primär beteiligt. Der Plexus myentericus zwischen den Längs- und Ringmuskelschichten des Magen-Darm-Wand befindet. Die Kontraktionsaktivität der glatten Muskelschichten der Darmwand erleichtert die primären Funktionen des Magen-Darm-Trakt durch Mischen und Treibdarminhalt über die Länge des Darms 3. Obwohl die extrinsische Nervenversorgung an den Gastrointestinaltrakt vom CNS trägt zu Magen-Darm-Funktion in vivoIst das ENS Magen-Darm-Funktion der Regulierung unabhängig in der Lage. Diese einzigartige Eigenschaft ermöglicht die funktionelle Untersuchung von Darm neuronalen Schaltkreisen und ihren Beitrag zu Magen-Darm-Motilität ex vivo. Colon-Migration Motor-Komplexe (CMMCs) sind spontan, neurogene Ereignisse, die die vorherrschende Motor Muster in isolierten Maus-Doppelpunkt in Abwesenheit von fäkalen Pellets 9.4 eingehalten werden. CMMCs als rhythmische Kontraktionen definiert, die entlang einer horizontalen Distanz propagieren, die mindestens die Hälfte der Gesamtlänge des Dickdarms (dh vom Blinddarm zum Rektum) 10. Die Beziehung zwischen CMMCs und die Kontraktionsmuster, die fäkalen Pellets treiben wird noch eindeutig festgestellt werden, jedoch einige pharmakologische Unterschiede haben 11 berichtet. Dennoch ist die Fähigkeit des ENS unabhängig von dem CNS und die Existenz von neuralen-vermittelten Bewegungsmuster in der IS zu funktionierenolated Doppelpunkt ist ein idealer Testsystem Störungen der Motilität zu untersuchen, die aus Basis ENS Dysfunktion. Die Spontaneität von gastrointestinalen motorischen Mustern ermöglicht funktionelle Veränderungen in Reaktion auf pharmakologische Reize bewertet werden. Der Einsatz von Video-Imaging und Raum-Zeit-Mapping wurde zuerst 12 kleine Darmperistaltik bei Meerschweinchen quantitativ zu untersuchen entwickelt. Hier wird ein ex vivo-Verfahren wird beschrieben, dass die Studie von Maus Kolonmotilität Muster mit Videobildverarbeitung und Analyse dieser Aufnahmen ermöglicht hochauflösenden zu konstruieren (~ 100 &amp; mgr; m, 33 msec) Karten von Kolon-Durchmesser als Funktion der Position entlang des Dickdarms und der Zeit (Raum-Zeit-Karten). Mit In-House-Kantenerkennungssoftware (Analyse2; auf Anfrage), Daten aus voller Länge Vertrags Kolon-Segmente in Echtzeit verarbeitet werden für jedes Experiment Raum-Zeit-Karten zu erzeugen. In diesem Schritt, video (AVI-Dateien) sind SummaRized und konvertierte zum Raum-Zeit-Karten Analyse2 verwenden. Raum-Zeit-Karten (Abbildung 2) Kontraktilität im Laufe der Zeit zeigen und die Messung mehrerer Parameter einschließlich Ausbreitungsgeschwindigkeit, Größe, Länge und Dauer ermöglichen. Gut Durchmesser wird auch während der gesamten Dauer des Experiments als Maß für die Gesamt Kontraktilität des Gewebesegments aufgezeichnet. Dieses Verfahren kann angewendet werden, um Unterschiede in der Initiationspunkt der kontraktilen Komplexe zu identifizieren, die veränderte enterischen neuronalen Konnektivitäts hinweisen könnte. Ein ähnliches Video-Imaging-Protokoll entwickelt Pellet Vortrieb bei Meerschweinchen zu beurteilen hat 13 aber hier berichtet worden, wir die Anwendung des Ansatzes Videobild skizzieren zur Quantifizierung der spontanen Kolonmotilität (dh in Abwesenheit von Pellets). Wir bieten auch detaillierte Informationen in der Präparation und Vorbereitung von Magen-Darm-Gewebe für den Video-Imaging-Ansatz zu unterstützen. DiesProtokoll stellt Forscher mit einem zugänglichen und leicht repliziert Werkzeug für magensaftresistente neuronalen Kontrolle von Magen-Darm-Funktion in Tiermodellen von Krankheiten, einschließlich genetischer Mausmodelle zu analysieren. Die Videoabbildungstechnik ermöglicht die Analyse von Kolonmotilität in Reaktion auf verschiedene pharmakologische Mittel. Medikamente können über das Darmlumen oder das Organbad außerhalb des Kolon Zubereitung verabreicht werden. Verschiedene Regionen der Maus Gastrointestinaltrakt zeigen spezifische Motilität Muster wie Dünndarmsegmentierung und CMMCs im Dickdarm. Diese Technik wurde verwendet, um Stamm Unterschiede in Dünndarmfunktion identifizieren; differentielle Empfindlichkeit zu 5-HT 3 und 5-HT 4 -Antagonisten wurden im Jejunum von Balb / c und C57 / BL6-Mäusen durch die polymorphe Natur der TPH2 Gen exprimiert in den beiden Stämmen 6 beobachtet. Die Wirkung von 5-HT-Hemmung auf die Motilität bleibt conumstritten, da widersprüchliche Daten über die Bedeutung des endogenen 5-HT auf colonic Peristaltik und CMMCs 14,15 gemeldet. Veränderungen in der Motilität vor und während der Entwicklung postnatal 7, und die Wirkungen der Gen-Mutationen auf die gastrointestinale Motilität in Tiermodellen der Krankheit 10 kann auch durch die Verwendung von Videoabbildungssucht werden. Hier veranschaulichen wir die Verwendung des Verfahrens für eine Studie von Kolonmotilität im NL3 R451C Mausmodell von Autismus, die eine Missense-Mutation in dem Gen exprimiert NLGN3 Codieren des synaptischen Adhäsionsprotein Neuroligin-3 16. Diese Mutation wurde zum ersten Mal mit der Diagnose Autismus-Spektrum-Störung bei Patienten identifiziert (ASD) 17, die stark mit GI Dysfunktion 18-22 verbunden ist. Wir untersuchten, ob die NL3 R451C synaptischen Mutation neuronalen Ausgänge im ENS mit dem Video-Imaging-Technik betrifft. Wir präsentieren Daten CMMCs an der Basislinie und in Reaktion auf die serotonerge 5H CharakterisierungT 4.3-Rezeptor-Antagonisten Tropisetron im NL3 R451C Mausmodell für Autismus.

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;Reagents&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaCl (MW: 58.44)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7653-250G</td><td></td></tr><tr><td>KCl (MW: 74.55)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9333-500G</td><td></td></tr><tr><td>NaH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;.2H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O (MW: 156.01)</td><td>Chem Supply</td><td>471-500G</td><td></td></tr><tr><td>MgSO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;.7H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;0 (MW: 246.48)</td><td>Chem Supply</td><td>MA048</td><td></td></tr><tr><td>CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;.2H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O (MW: 147.02)</td><td>Chem Supply</td><td>CA033</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose anhydrous (MW: 180.16)</td><td>Chem Supply</td><td>GA018-500G</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO&lt;sub&gt;3 &lt;/sub&gt;(MW: 84.01)</td><td>Chem Supply</td><td>GA018-500G</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Name&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Company&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Catalog Number&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Comments&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Materials&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Two chambered organ bath&lt;br/&gt; Dimentions: 14 cm x 8 cm x 3 cm</td><td>Custom Made</td><td></td><td>Contact Laboratory Directly&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>&amp;nbsp;732 MULTI -PURPOSE SEALANT CLEAR</td><td>Dow Corning Australia Pty Ltd</td><td>1890573</td><td></td></tr><tr><td>SYLGARD 184 SILICONE ELASTOMER KIT&amp;nbsp;</td><td>Dow Corning Australia Pty Ltd</td><td>1064291</td><td></td></tr><tr><td>STOPCOCK 3 WAY FEM-ML L/LOCK S</td><td>Terumo Medical Corporation</td><td>0912-2006</td><td></td></tr><tr><td>SYRINGES with Luer Lock Tips 50 ml, 20 ml, 10 ml</td><td>Terumo Medical Corporation</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>1.57 mm (ID) x 3.16 mm (OD) - Silastic Tubing</td><td>Masterflex</td><td>508-008</td><td></td></tr><tr><td>1.02 mm (ID) x 2.16 mm (OD) - Silastic Tubing</td><td>Masterflex</td><td>508-005</td><td></td></tr><tr><td>1.50 mm (ID) x 2.50 mm (OD) - Silastic Tubing</td><td>Masterflex</td><td>508-007</td><td></td></tr><tr><td>1.60 mm (ID) - Platinum cured silicone tubing&amp;nbsp;</td><td>Masterflex</td><td>96410 - 14</td><td></td></tr><tr><td>4.40 mm (ID) - Platinum cured silicone tubing&amp;nbsp;</td><td>Masterflex</td><td>96410 - 15&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>3.10 mm (ID) - Platinum cured silicone tubing&amp;nbsp;</td><td>Masterflex</td><td>96410 -16</td><td></td></tr><tr><td>Graduated Laboratory Glass Bottles - 500 ml&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Thermofisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>100-400</td><td></td></tr><tr><td>CHEMICAL RUBBER STOPPER 57 x 65 mm&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CHEMICAL RUBBER STOPPER 29 mm x 32 mm</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Water heater&amp;nbsp; (thermo regulator)&amp;nbsp;</td><td>Ratek&amp;nbsp;</td><td>TH7000&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Logitech Webcam</td><td>Logitech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Name&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Company&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Catalog Number&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Comments&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Software&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Virtual Dub - 1.9 11</td><td>virtualdub.org</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MATLAB R2012a&amp;nbsp;</td><td>Graph Pad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Logitech Webcam Software</td><td>Logitech</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

video imaging and spatiotemporal maps to analyze gastrointestinal motility in mice

Die enterische Nervensystem (ENS) spielt eine wichtige Rolle gastrointestinale (GI) Motilität bei der Regulierung und unabhängig von dem zentralen Nervensystem wirken kann. Änderungen in der ENS-Funktion sind eine Hauptursache für gastrointestinale Symptome und Krankheit und kann zur Anzeige zu gastrointestinalen Symptome bei neuropsychiatrischen Störungen, einschließlich Autismus beitragen. Es ist bekannt, dass isolierte Kolonabschnitten spontan, rhythmische Kontraktionen bekannt als Kolon-Migration Motor-Komplexe (CMMCs) erzeugen. Ein Verfahren, das enterische neuronale Regulation der CMMCs in Ex-vivo-Präparate von Maus Doppelpunkt zu analysieren beschrieben. Der Doppelpunkt wird aus dem Tier herausgeschnitten und gespült fäkale Inhalte zu entfernen, bevor in einem Organbad kanüliert werden. Die Daten werden über eine Videokamera über dem Organbad positioniert und konvertierte zum hochauflösenden Raum-Zeit-Karten über ein Inhouse-Software-Paket erworben. Mit dieser Technik Muster Grundlinie Kontraktions und pharmakologischen Wirkungen auf ENS Funktion in Doppelpunkt segments kann über 3-4 Stunden verglichen werden. Zusätzlich Ausbreitungslänge und der Geschwindigkeit der CMMCs kann sowie Änderungen in gut Durchmesser und Kontraktionsfrequenz aufgezeichnet werden. Diese Technik ist nützlich, um gastrointestinale Motilität Muster in transgenen Mausmodelle charakterisieren (und in anderen Spezies, einschließlich Ratten und Meerschweinchen). Auf diese Weise pharmakologisch in CMMCs induzierten Veränderungen sind in Wildtyp-Mäusen aufgezeichnet und im Neuroligin-3 R451C Mausmodell für Autismus. Darüber hinaus kann diese Technik auf andere Regionen des GI-Trakts einschließlich der Duodenum, Jejunum und Ileum und in verschiedenen Entwicklungsalter bei Mäusen angewendet werden.

Bis zu 90% der Patienten mit ASD eine Reihe von Magen-Darm-Erkrankungen auftreten, wie Durchfall und Verstopfung 18,24,25. Allerdings sind die Ursachen dieser Magen-Darm-Probleme nicht bekannt. Viele Patienten mit ASD identifizierten Mutationen sind im Zusammenhang mit der synaptischen Proteinen Änderungen und Störungen in der synaptischen Übertragung oder Funktion beiträgt. Eine solche Mutation in dem Gen, das für das Zelladhäsionsmolekül neuroligin-3 (NL3 R451C), wurd...

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Video Imaging and Spatiotemporal Maps to Analyze Gastrointestinal Motility in Mice

Video Imaging und Raum-Zeit-Karten zur Analyse Gastrointestinale Motilität bei Mäusen

This article describes a video imaging technique and high-resolution spatiotemporal mapping to identify changes in the neural regulation of colonic motility in adult mice. Subtle effects on gastrointestinal (GI) function can be detected using this approach in isolated tissue preparations to advance our understanding of GI disease.

The enteric nervous system (ENS) plays an important role in regulating gastrointestinal (GI) motility and can function independently of the central ...

video-imaging-spatiotemporal-maps-to-analyze-gastrointestinal

Research

JoVE Journal

Neuroscience

13.9K Aufrufe.  The University of Melbourne. This article describes a video imaging technique and high-resolution spatiotemporal mapping to identify changes in the neural regulation of colonic motility in adult mice. Subtle effects on gastrointestinal (GI) function can be detected using this approach in isolated tissue preparations to advance our understanding of GI disease.

Serie: Video Imaging and Spatiotemporal Maps to Analyze Gastrointestinal Motility in Mice

Fabrication and Implantation of Miniature Dual-element Strain Gages for Measuring In Vivo Gastrointestinal Contractions in Rodents.

Gastrointestinal dysfunction remains a major cause of morbidity and mortality. Indeed, gastrointestinal (GI) motility in health and disease remains an area of productive research with over 1,400 published animal studies in just the last 5 years. Numerous techniques have been developed for quantifying smooth muscle activity of the stomach, small intestine, and colon. In vitro and ex vivo techniques offer powerful tools for mechanistic studies of GI function, but outside the context of the integrated systems inherent to an intact organism. Typically, measuring in vivo smooth muscle contractions of the stomach has involved an anesthetized preparation coupled with the introduction of a surgically placed pressure sensor, a static pressure load such as a mildly inflated balloon or by distending the stomach with fluid under barostatically-controlled feedback. Yet many of these approaches present unique disadvantages regarding both the interpretation of results as well as applicability for in vivo use in conscious experimental animal models. The use of dual element strain gages that have been affixed to the serosal surface of the GI tract has offered numerous experimental advantages, which may continue to outweigh the disadvantages. Since these gages are not commercially available, this video presentation provides a detailed, step-by-step guide to the fabrication of the current design of these gages. The strain gage described in this protocol is a design for recording gastric motility in rats. This design has been modified for recording smooth muscle activity along the entire GI tract and requires only subtle variation in the overall fabrication. Representative data from the entire GI tract are included as well as discussion of analysis methods, data interpretation and presentation.

Fabrication and Implantation of Miniature Dual-element Strain Gages for Measuring In Vivo Gastrointestinal Contractions in Rodents.

The in vivo measurement of smooth muscle contractions along the gastrointestinal tract of laboratory animals remains a powerful, though underutilized, technique. Flexible, dual element strain gages are not commercially available and require fabrication. This protocol describes the construction of reliable, inexpensive strain gages for acute or chronic implantation in rodents.

Herstellung und Implantation von Miniatur-Zweielement Dehnungsmessstreifen für Mess<em&gt; In Vivo</em&gt; Magen-Darm-Kontraktionen in Nagetiere.

Gastrointestinal dysfunction remains a major cause of morbidity and mortality. Indeed, gastrointestinal (GI) motility in health and disease remains an ...

Forschung

Biotechnik

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques enable the observation of live cellular behavior inside the organ but can be challenging in some types of cancer due to organ and tumor accessibility such as intestine. Direct observation of intestinal tumors has not been previously reported. A surgical procedure described here allows direct observation of myeloid cell dynamics within the intestinal tumors in live mice by using transgenic fluorescent reporter mice and injectable tracers or antibodies. For this purpose, a four-color, multi-region, micro-lensed spinning disk confocal microscope that allows long-term continuous imaging with rapid image acquisition has been used. ApcMin/+ mice that develop multiple adenomas in the small intestine are crossed with c-fms-EGFP mice to visualize myeloid cells and with ACTB-ECFP mice to visualize intestinal epithelial cells of the crypts. Procedures for labeling different tumor components, such as blood vessels and neutrophils, and the procedure for positioning the tumor for imaging through the serosal surface are also described. Time-lapse movies compiled from several hours of imaging allow the analysis of myeloid cell behavior in situ in the intestinal microenvironment.

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

By using transgenic reporter mice and injectable fluorescent labels, long-term intravital spinning disk confocal microscopy enables direct visualization of myeloid cell behavior into intestinal adenoma in the ApcMin/+ colorectal cancer model.

Echtzeit-Imaging von myeloischen Zellen in Dynamics<em&gt; Apc<sup&gt; Min / +</sup</em&gt; Darmtumoren durch Spinning-Disk-konfokale Mikroskopie

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques ...

Immunologie und Infektion

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions preclinically. However, valid assessment of pathological alterations often requires histological analysis, and when performed ex vivo, necessitates death of the animal. Therefore in conventional experimental settings, intra-individual follow-up examinations are rarely possible. Thus, development of murine endoscopy in live mice enables investigators for the first time to both directly visualize the gastrointestinal mucosa and also repeat the procedure to monitor for alterations. Numerous applications for in vivo murine endoscopy exist, including studying intestinal inflammation or wound healing, obtaining mucosal biopsies repeatedly, and to locally administer diagnostic or therapeutic agents using miniature injection catheters. Most recently, molecular imaging has extended diagnostic imaging modalities allowing specific detection of distinct target molecules using specific photoprobes. In conclusion, murine endoscopy has emerged as a novel cutting-edge technology for diagnostic experimental in vivo imaging and may significantly impact on preclinical research in various fields.

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Small animal imaging techniques allow serial diagnostic examinations and therapeutic interventions in vivo. Recently, the scope of applications has significantly widened and currently includes assessment of colonic tumor development, wound healing and monitoring of inflammation. This protocol illustrates these diverse potential applications of murine endoscopy.

Murine Endoskopie für<em&gt; In Vivo</em&gt; Multimodale Bildgebung der Krebsentstehung und Bewertung der Darm Wundheilung und Entzündung

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

Medizin

Imaging Neutrophils and Monocytes in Mesenteric Veins by Intravital Microscopy on Anaesthetized Mice in Real Time

Efficient immune response is dependent on rapid mobilization of blood leukocytes to the site of infection or injury. Investigating leukocyte migration in vivo is crucial for understanding the molecular basis of leukocyte transendothelial migration and interaction with vascular endothelium. One powerful approach involves intravital microscopy on transgenic mice expressing fluorescent proteins in cells of interest.
Here we present a protocol for imaging monocytes and neutrophils in the CX3CR1gfp/wt mouse i.v. injected with orange dye-labeled neutrophils with an inverted confocal microscope. Time-lapse movies gathered from 30 min&#160;to several hours of imaging allow the analysis of leukocyte behavior in mesenteric veins under both steady state and inflammatory conditions. We also describe the steps to locally induce blood vessel inflammation with TLR2/TLR1 agonist Pam3SK4 and monitor the subsequent recruitment of neutrophils and monocytes.
The presented technique can also be used to monitor other populations of leukocytes and investigate molecules implicated in leukocyte recruitment or trafficking using other stimuli or transgenic mice.

We detail a protocol to monitor the behavior of neutrophils and monocytes in mesenteric veins under steady state and inflammatory conditions using intravital confocal microscopy on anaesthetized mice.

Abbilden Neutrophilen und Monozyten in Mesenterialvenen von Intravitalmikroskopie an narkotisierten Ratten in Echtzeit

Efficient immune response is dependent on rapid mobilization of blood leukocytes to the site of infection or injury. Investigating leukocyte migration in ...

Non-invasive Assessment of the Efficacy of New Therapeutics for Intestinal Pathologies Using Serial Endoscopic Imaging of Live Mice

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic mechanisms that contribute to the onset and progression of intestinal diseases. The identification of new molecules that promote these pathologies has led to a flurry of activity focused on the development of potential new therapies to inhibit their function. As a result, various pre-clinical mouse models with an intact immune system and stromal microenvironment are now heavily used. Here we describe three experimental protocols to test the efficacy of new therapeutics in pre-clinical models of (1) acute mucosal damage, (2) chronic colitis and/or colitis-associated colon cancer, and (3) sporadic colorectal cancer. We also outline procedures for serial endoscopic examination that can be used to document the therapeutic response of an individual tumor and to monitor the health of individual mice. These protocols provide complementary experimental platforms to test the effectiveness of therapeutic compounds shown to be well tolerated by mice.

We describe methods for longitudinal monitoring of the efficacy of therapeutics for the treatment of colonic pathologies in mice using a rigid endoscope. This protocol can be readily used for the characterization of the therapeutic response of an individual tumor in live mice and also for monitoring potential disease relapse.

Nicht-invasive Beurteilung der Wirksamkeit neuer Therapeutika für Darmpathologien Verwenden der seriellen endoskopische Bildgebung von lebenden Mäusen

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic ...

Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM)

The Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM; Catamount Research and Development; St. Albans, VT) is an in vitro system that monitors propulsive motility in isolated segments of guinea pig distal colon. The complete system consists of a computer, video camera, illuminated organ bath, peristaltic and heated water bath circulating pumps, and custom GIMM software to record and analyze data. Compared with traditional methods of monitoring colonic peristalsis, the GIMM system allows for continuous, quantitative evaluation of motility. The guinea pig distal colon is bathed in warmed, oxygenated Krebs solution, and fecal pellets inserted in the oral end are propelled along the segment of colon at a rate of about 2 mm/sec. Movies of the fecal pellet proceeding along the segment are captured, and the GIMM software can be used track the progress of the fecal pellet. Rates of propulsive motility can be obtained for the entire segment or for any particular region of interest. In addition to analysis of bolus-induced motility patterns, spatiotemporal maps can be constructed from captured video segments to assess spontaneous motor activity patterns. Applications of this system include pharmacological evaluation of the effects of receptor agonists and antagonists on propulsive motility, as well as assessment of changes that result from pathophysiological conditions, such as inflammation or stress. The guinea pig distal colon propulsive motility assay, using the GIMM system, is straightforward and simple to learn, and it provides a reliable and reproducible method of assessing propulsive motility.

Gastrointestinal Motility Monitor GIMM

Evaluation of colonic motility in the guinea pig distal colon with the Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM) is a straightforward and simple to learn approach to quantitatively evaluate propulsive motility in the gastrointestinal tract.

Gastrointestinale Motilität Monitor (Gimm)

The Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM; Catamount Research and Development; St. Albans, VT) is an in vitro system that monitors propulsive motility ...

Biologie

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal (ICC) Network in Mice

The interstitial cells of Cajal (ICC) are mesenchymal derived "pacemaker cells" of the gastrointestinal (GI) tract that generate spontaneous slow waves required for peristalsis and mediate neuronal input from the enteric nervous system1. Different subtypes of ICC form distinct networks in the muscularis of the GI tract 2,3. Loss or injury to these networks is associated with a number of motility disorders4. ICC cells express the KIT receptor tyrosine kinase on the plasma membrane and KIT immunostaining has been used for the past 15 years to label the ICC network5,6. Importantly, normal KIT activity is required for ICC development5,6. Neoplastic transformation of ICC cells results in gastrointestinal stromal tumor (GIST), that frequently harbor gain-of-function KIT mutations7,8. We recently showed that ETV1 is a lineage-specific survival factor expressed in the ICC/GIST lineage and is a master transcriptional regulator required for both normal ICC network formation and for of GIST tumorigenesis9. We further demonstrate that it cooperates with activating KIT mutations in tumorigenesis. Here, we describe methods for visualization of ICC networks in mice, largely based on previously published protocols10,11. More recently, the chloride channel anoctamin 1 (ANO1) has also been characterized as a specific membrane marker of ICC11,12. Because of their plasma membrane localization, immunofluorescence of both proteins can be used to visualize the ICC networks. Here, we describe visualization of the ICC networks by fixed-frozen cyrosections and whole mount preparations.

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal ICC Network in Mice

The interstitial cells of Cajal (ICC) are the pacemaker cells of the gastrointestinal (GI) tract. They form complex networks between smooth muscle cells and post-ganglionic neuronal fibers to regulate GI contractility. Here, we present immunofluorescence methods cross-sectional and whole-mount visualization of murine ICC networks.

Visualisierung der interstitiellen Zellen von Cajal (ICC) Netzwerk in Mäuse

The interstitial cells of Cajal (ICC) are mesenchymal derived "pacemaker cells" of the gastrointestinal (GI) tract that generate spontaneous slow waves ...

Intravital Imaging of Intraepithelial Lymphocytes in Murine Small Intestine

Intraepithelial lymphocytes expressing &#947;&#948; T cell receptor (&#947;&#948; IEL) play a key role in immune surveillance of the intestinal epithelium. Due in part to the lack of a definitive ligand for the &#947;&#948; T cell receptor, our understanding of the regulation of &#947;&#948; IEL activation and their function in vivo remains limited. This necessitates the development of alternative strategies to interrogate signaling pathways involved in regulating &#947;&#948; IEL function and the responsiveness of these cells to the local microenvironment. Although &#947;&#948; IELs are widely understood to limit pathogen translocation, the use of intravital imaging has been critical to understanding the spatiotemporal dynamics of IEL/epithelial interactions at steady-state and in response to invasive pathogens. Herein, we present a protocol for visualizing IEL migratory behavior in the small intestinal mucosa of a GFP &#947;&#948; T cell reporter mouse using inverted spinning disk confocal laser microscopy. Although the maximum imaging depth of this approach is limited relative to the use of two-photon laser-scanning microscopy, spinning disk confocal laser microscopy provides the advantage of high speed image acquisition with reduced photobleaching and photodamage. Using 4D image analysis software, T cell surveillance behavior and their interactions with neighboring cells can be analyzed following experimental manipulation to provide additional insight into IEL activation and function within the intestinal mucosa.

We describe a method to visualize GFP-labeled &#947;&#948; IELs using intravital imaging of murine small intestine by inverted spinning disk confocal microscopy. This technique enables the tracking of live cells within the mucosa for up to 4 h and can be used to investigate a variety of intestinal immune-epithelial interactions. &#160;

Intravitale Bildgebung von intraepitheliale Lymphozyten im murinen Dünndarm

Intraepithelial lymphocytes expressing &#947;&#948; T cell receptor (&#947;&#948; IEL) play a key role in immune surveillance of the intestinal ...

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, and membrane potential. All of these approaches depend on measurement of activity at one or multiple locations along the gut simultaneously which are then interpreted to provide a sense of overall motility patterns. Recently, the development of video recording and spatiotemporal mapping (STmap) techniques have made it possible to observe and analyze complex patterns in ex vivo whole segments of colon and intestine. Once recorded and digitized, video records can be converted to STmaps in which the luminal diameter is converted to grayscale or color [called diameter maps (Dmaps)]. STmaps can provide data on motility direction (i.e., stationary, peristaltic, antiperistaltic), velocity, duration, frequency and strength of contractile motility patterns. Advantages of this approach include: analysis of interaction or simultaneous development of different motility patterns in different regions of the same segment, visualization of motility pattern changes over time, and analysis of how activity in one region influences activity in another region. Video recordings can be replayed with different timescales and analysis parameters so that separate STmaps and motility patterns can be analyzed in more detail. This protocol specifically details the effects of intraluminal fluid distension and intraluminal stimuli that affect motility generation. The use of luminal receptor agonists and antagonists provides mechanistic information on how specific patterns are initiated and how one pattern can be converted into another pattern. The technique is limited by the ability to only measure motility that causes changes in luminal diameter, without providing data on intraluminal pressure changes or muscle tension, and by the generation of artifacts based upon experimental setup; although, analysis methods can account for these issues. When compared to previous techniques the video recording and STmap approach provides a more comprehensive understanding of gastrointestinal motility.

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Recently available video recording and spatiotemporal mapping (STmap) techniques make it possible to visualize and quantify both propagating and mixing patterns of intestinal motility. The goal of this protocol is to explain the generation and analysis of STmaps using the GastroIntestinal Motility Monitoring (GIMM) system.

Raum-Zeit-Mapping der Motilität in<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Vorbereitung des Darms

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, ...

Studying Murine Small Bowel Mechanosensing of Luminal Particulates

Gastrointestinal (GI) motility is critical for normal digestion and absorption. In the small bowel, which absorbs nutrients, motility optimizes digestion and absorption. For this reason, some of the motility patterns in the small bowel include segmentation for mixing of luminal contents and peristalsis for their propulsion. Physical properties of luminal contents modulate the patterns of small bowel motility. The mechanical stimulation of GI mechanosensory circuits by transiting luminal contents and underlying gut motility initiate and modulate complex GI motor patterns. Yet, the mechanosensory mechanisms that drive this process remain poorly understood. This is primarily due to a lack of tools to dissect how the small bowel handles materials of different physical properties. To study how the small bowel handles particulates of varying sizes, we have modified an established in vivo method to determine small bowel transit. We gavage live mice with fluorescent liquid or tiny fluorescent beads. After 30 minutes, we dissect out the bowels to image the distribution of fluorescent contents across the entirety of the GI tract. In addition to high-resolution measurements of the geometric center, we use variable size binning and spectral analysis to determine how different materials affect small bowel transit. We have explored how a recently discovered "gut touch" mechanism affects small bowel motility using this approach.

To study how the small bowel handles particulates of varying sizes, we have modified an established in vivo method to determine small bowel transit.

Untersuchung der Mechanosensorik von luminalen Partikeln im murinen Dünndarm

Gastrointestinal (GI) motility is critical for normal digestion and absorption. In the small bowel, which absorbs nutrients, motility optimizes digestion ...

Video Imaging und Raum-Zeit-Karten zur Analyse Gastrointestinale Motilität bei Mäusen

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

Herstellung und Implantation von Miniatur-Zweielement Dehnungsmessstreifen für Mess

Echtzeit-Imaging von myeloischen Zellen in Dynamics

Murine Endoskopie für