Wir danken Colby Carpenter und Spencer Mathias für ihre Unterstützung beim 3D-Druckdesign. Wir danken Ellen Klinger für die Unterstützung bei der Herstellung der fotografischen Figuren und Jonathan B. Koch für die Unterstützung bei Revisionen. Die Finanzierung erfolgte durch die USDA-ARS-Pollinating Insect Biology, Management, and Systematics Research Unit.

1. Pollenfallenstrukturen drucken
<ol><li>Laden Sie die entsprechende STL-Datei für den Nistkasten herunter, in dem Hummeln nisten (z. B. Bienenstöcke im Biobest- oder Koppert-Stil, https://www.ars.usda.gov/pacific-west-area/logan-ut/pollinating-insect-biology-management-systematics-research/docs/pollen-traps/). Die Dateien sind für die Öffentlichkeit verfügbar, kostenlos zum Herunterladen und Ändern durch den Endbenutzer.</li>
	<li>Öffnen Sie die STL-Datei im Druckerprogramm. Befolgen Sie die Anweisungen des Druckerherstellers, um die vier Trap-Komponenten zu erstellen. HINWEIS: Warten Sie ca. 3 h für den Druck des Fallkörpers, 2 h für den Druck des Auffangbeckens und jeweils 30 Stunden für den Druck des Filters und des Trap-Verschlusseinsatzes. Die Gehäusegröße der Falle beträgt 6 cm x 3,8 cm x 7 cm.</li>
</ol>2. Pollenfallenmontage
<ol><li>Entfernen Sie die mit dem Fangkörper und dem Auffangbecken bedruckten Stützstrukturen, einschließlich derjenigen der Siebstruktur des Fangkörpers (Abbildung 1).</li>
	<li>Verwenden Sie einen 3/16 Zoll (0,476 cm) Bohrer, der in einem Handbohrer montiert ist, um alle Kunststoffstränge zu entfernen, die die erhöhten Kanten des Pollenfilters überqueren und eine Biene daran hindern könnten, sich durch die Filterlöcher zu bewegen. Verwenden Sie eine Schneideklinge und Schleifpapier, um Unebenheiten oder erhöhte Kanten auf der flachen Seite des Pollenfilters auszugleichen.</li>
	<li>Legen Sie den Pollenfilter in den Fangkörper, indem Sie den Kunststofffilter vorsichtig durch eine Seite des Fallenkörpers drücken. Der Filter passt nur auf eine Weise, da die linke Seite der Falle eine größere Öffnung hat, um den Durchgang der erhöhten Filterkegel aufzunehmen.<ol>
<li>Wenn die seitlichen Schlitze zu klein sind, als dass der Pollenfilter reibungslos durchrutschen könnte, kratzen Sie mit einem Rasierer oder einem anderen Werkzeug, das kleine Teile des Kunststoffs auf einmal entfernen kann, genügend Plastik vom Schlitz im Fallenkörper weg. Stellen Sie sicher, dass der Pollenfilter sicher sitzt und nicht mehr als 2 mm Abstand zwischen Pollenfilter und Fangkörper hat.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Befestigen Sie das Auffangbecken am Fangkörper, indem Sie die erhöhten Kanten an der Unterseite des Fangkörpers in die Nut auf der Oberseite des Auffangbeckens schieben. Das Auffangbecken sollte direkt unter dem Siebbereich des Fangkörpers positioniert werden (Abbildung 1A\u2012E).</li>
	<li>Nehmen Sie geeignete Änderungen vor, indem Sie den Kunststoff schneiden oder schleifen, um eine reibungslose Platzierung und Entfernung des Auffangbeckens vom Fangkörper zu ermöglichen. Durch die Platzierung des Auffangbeckens wird der Pollenfilter an Ort und Stelle gesichert, und er kann nicht entfernt werden, bis das Auffangbecken entfernt ist, noch kann der Pollenfilter eingeführt werden, während das Auffangbecken vorhanden ist. HINWEIS: Wenn mehrere Bienenstöcke nahe beieinander platziert sind, hilft es den zurückkehrenden Arbeitern, ihre Nester mit einer einzigartigen Farbkombination aus Fallenkörper, Auffangbecken und Pollenfilterstrukturen auszustatten und zusätzlich Bienenstöcke mit unterschiedlicher Ausrichtung einzusetzen.</li>
</ol>3. Hummelvolk Vorbereitung
<ol><li>Stoppen Sie die Pollenfütterung 24 \ u201248 h, bevor Sie Kolonien einsetzen. Dies führt dazu, dass die Arbeiter alle gespeicherten Pollen verbrauchen und sie dazu anregen, das Nest auf der Suche nach Pollen zu verlassen.</li>
	<li>Bereiten Sie den Beutenfallekörper für die Installation vor, indem Sie einen Fallenverschlusseinsatz in den Filterschlitz einführen, um zu verhindern, dass Bienen während der Installation der Falle entweichen.</li>
	<li>Arbeiten Sie unter rotem Licht, um zu verhindern, dass die Bienen fliegen, heben Sie den Plastiknistkasten aus dem Pappaußenkasten.</li>
	<li>Suchen Sie den Eingang des Plastiknestes an der Vorderseite des Nestes. Je nach Nestanbieter gibt es zwei Arten von Eingängen: Koppert-Boxen (Schritt 3.5) und Biobest-Boxen (Schritt 3.6).</li>
	<li>Für Bienenstockeingänge im Koppert-Stil montieren Sie die Pollenfalle am Nesteingang, indem Sie an der Eingangslasche hochziehen, bis beide Eingangslöcher geöffnet sind.<ol>
<li>Führen Sie die beiden Röhren der Pollenfalle in die Eingangslöcher ein und stellen Sie sicher, dass sich das Sieb der Pollenfalle auf der Unterseite befindet. Drücken Sie vorsichtig auf die Kunststoffeingangslasche, um die Pollenfalle an Ort und Stelle zu befestigen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Um die Pollenfalle in Bienenstockeingänge im Biobest-Stil zu installieren, verwenden Sie einen Flachkopfschraubendreher, um die Kunststoffeingangsvorrichtung vorsichtig aus dem Nistkasten zu hebeln. Setzen Sie die Pollenfalle in die Nesteingangslöcher ein, bis sich die Pollenfalle fest gegen das Nest befindet (Abbildung 1E).<ol>
<li>Befestigen Sie die Falle mit Klebeband oder schnell trocknendem Klebstoff am Nest, wo die Falle bei Bedarf den Nistkasten berührt.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bringen Sie den Plastiknistkasten in den Karton zurück. Pappe muss möglicherweise weggeschnitten werden, um die Pollenfalle unterzubringen.</li>
</ol>4. Einsatz von Nestern
<ol><li>Legen Sie Nistkästen in den Untersuchungsbereich. Bieten Sie Deckung zum Schutz vor Niederschlag und Verankerung für Wind, da diese die Qualität und Quantität der gesammelten Pollen beeinträchtigen können. Stellen Sie Bienenstöcke, die in Gewächshäusern platziert sind, eine ausreichende Sonnendecke zur Verfügung, um eine Überhitzung zu reduzieren.</li>
	<li>Entfernen Sie den Fallenverschlusseinsatz vom Fallenkörper, damit bienen frei nach Futter suchen können, damit sich die Sammler an der Umgebung und dem Standort ihres Nestes orientieren können. Die Orientierungsflugzeit sollte unter normalen Bedingungen in 24 Stunden abgeschlossen sein.</li>
</ol>5. Pollensammlung
<ol><li>Um die Falle zu aktivieren, schieben Sie den Pollenfilter in den Filterschlitz und stellen Sie sicher, dass er sicher an Seinem Platz ist.</li>
	<li>Installieren Sie das Auffangbecken, indem Sie es von vorne auf den Fangkörper schieben, bis es vollständig geschlossen ist. Wenn das Auffangbecken übermäßig locker ist oder vom Fangkörper fällt, verwenden Sie ein Gummiband, um es am Fangkörper zu befestigen.</li>
	<li>Beobachten Sie Bienen, die beim ersten Einsatz in die Pollenfalle ein- und aussteigen, um sicherzustellen, dass die Pollenfilterlöcher groß genug sind, um die Bienen aufzunehmen.<ol>
<li>Wenn arbeiter nicht in der lagen, den Pollenfilter zu passieren, entfernen Sie den Filter und verwenden Sie dann Bohrer größer als 3/16 Zoll (0,476 cm), um die Lochgrößen zu erhöhen. Tun Sie dies sequentiell und erhöhen Sie den Lochdurchmesser jedes Mal um 1/32 Zoll (0,079 cm), da zu große Löcher keine Pollen sammeln.</li>
		<li>Sobald bienen in der Lage sind, den Filter zu passieren, beobachten Sie weiterhin den Eingang, um sicherzustellen, dass Pollen beim Wiedereintritt entfernt werden. HINWEIS: Bienen sollten Schwierigkeiten haben, sich durch die Pollenfilterlöcher zu bewegen, besonders wenn sie die ersten Male passieren. Wenn sie zu leicht passieren, können die Pollen nicht von den Corbiculae entfernt werden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Nach der festgelegten Zeit der Pollensammlung gleiten sie und entfernen Sie das Auffangbecken aus dem Fangkörper.</li>
	<li>Verarbeiten Sie die Pollenlasten nach Ihrem Versuchsentwurf.</li>
	<li>Entfernen Sie den Pollenfilter, damit die Arbeiter bis zur nächsten Phase der Pollensammlung frei nach Futter suchen können. Der Fallenkörper kann für die Dauer des Experiments am Bienenstock befestigt bleiben. HINWEIS: Pollenfallen können so lange eingeschaltet werden, wie der Forscher Pollen aus einer Kolonie sammeln möchte. Der Einsatz von Pollenfallen für mehr als 24 Stunden in einer Woche kann jedoch zum Verhungern der Brut in einem Bienenstock führen und die Entwicklung der Kolonie verzögern.</li>
</ol>

<ol>
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Die Autoren haben nichts preiszugeben.

Das Sammeln von Pollen von Hummelkolonieneingängen kann eine Vielzahl von ökologischen und landwirtschaftlichen Studien ermöglichen. Die Identifizierung der Blütenquellen, aus denen Hummeln Pollen sammeln, liefert wertvolle Informationen und Einblicke in die Vielfalt der Pflanzen, die zur Gesamternährung einer Kolonie beitragen19. Die Identifizierung der Pollenquelle hat Auswirkungen sowohl auf die landwirtschaftliche Produktion als auch auf Die Untersuchung von Ökosystemleistungen in wilden...

Hummeln (Bombus spp.) sind große robuste Insekten, die in den gemäßigten, alpinen und arktischen Regionen der Welt vorkommen1. Sie sind wichtig für Pflanzengemeinschaften und bieten einen wichtigen Bestäubungsdienst für die landwirtschaftlichen Kulturen, die sie besuchen2. Der jüngste Rückgang der Häufigkeit und Verbreitung mehrerer Arten hat ihre Bedeutung als Bestäuber in den Vordergrund des öffentlichen Bewusstseins gerückt3. Forscher haben mehrere Stressfaktoren identifiziert, die wahrscheinlich zum Bevölkerungsrückgang beitragen, einschließlich eines Mangels an vielfältigen und reichlich vorhandenen Blütenressourcen, auf denen Hummeln nachFutter suchen 4. Die Identifizierung, aus welchen Pflanzenarten Hummeln suchen, ermöglicht es Forschern und Landmanagern zu verstehen, wie Hummeln auf Veränderungen der Ressourcenverfügbarkeit, des Wettbewerbs und anthropogener Störungen reagieren können5,6.
Studien, die die Pollenfutterpräferenzen von Hummeln untersuchen, werden oft von Forschern durchgeführt, die einzelne Bienen fangen, die nach Blumen suchen, und dann die korvikulären Pollenlasten von Exemplaren zur weiteren Verarbeitung und Identifizierung entfernen7,8,9,10. Während diese Methode einen Einblick gibt, wie eine Art oder eine Ansammlung von Hummelarten die Ressourcen in einem Gebietnutzt 7, ist es zeitintensiv und potenzielle Unterschiede in den Präferenzen zwischen Bienenstöcken können ohne zusätzliche molekulare Analysen nicht erkannt werden, um die Ursprungskolonie der Futterbiene11zu identifizieren.
Für einige Studien zur Dynamik der Nahrungssuche ist es wünschenswert, die Studien an einzelnen Kolonien durchzuführen; Wilde Hummelnester befinden sich jedoch im Allgemeinen unterirdisch oder am Boden, was es schwierig macht, sie zu finden12. Kommerziell hergestellte Hummelstöcke bieten Forschern einen besseren Zugang und eine bessere experimentelle Kontrolle, und die Entfernung von Pollen von Arbeitern wird immer noch in erster Linie durchgeführt, indem Sammler gefangen werden, wenn sie zum Bienenstock zurückkehren, und ihre korvikulären Pollenlasten manuell entfernen13,14. Die Entfernung von Pollen von Hand aus der Corbicula einer Biene ist zeitintensiv mit einem geringen stündlichen Pollenertrag, insbesondere an Bienenstockeingängen, wo die Rate der zurückkehrenden Pollensucher niedrig sein kann. Darüber hinaus kann das manuelle Entfernen von Pollen von Bienen zu Stichen von gestörten Arbeitern führen.
Pollenfallen werden seit Jahrzehnten zur experimentellen Entfernung von Pollen von Honigbienen verwendet15; Eine passive Methode zur Entfernung von Pollen von Hummeln wurde jedoch nicht entwickelt. Das Haupthindernis bei der Entwicklung eines Mechanismus zur Entfernung von Pollen von zurückkehrenden Sammlerhummeln ist die große Variation der Arbeitergrößen, die in einer Hummelkolonie existieren16. Honigbienenpollenfallen sind vor allem deshalb wirksam, weil die Größe der Honigbienenarbeiter nicht sehr unterschiedlich ist. Darüber hinaus erfordern diese Fallen nach der Installation nur geringfügige Manipulationen und erfordern nicht, dass Bienen geopfert werden17. Dies wird durch Siebe oder Kunststoffoberflächen erreicht, die den Pollen von den Hinterbeinen der Arbeiter entfernen, wenn sie in den Bienenstock zurückkehren. Diese Fallen entfernen nur einen Teil der Pollenlasten von zurückkehrenden Sammlern, und die verschiedenen Designs dieser fallen zu unterschiedlichen Wirkungsgraden bei der Pollensammlung. Wenn der Pollen von den Bienenbeinen entfernt wird, fällt er durch ein Sieb und in ein Auffangbecken, zu dem die Bienen keinen Zugang haben, so dass der Forscher ihn mit nur geringfügigen Störungen des Bienenstocks entfernen kann.
Der Zweck der vorliegenden Studie ist es, die Techniken, die zum Sammeln von Pollen aus Honigbienenstöcken verwendet werden, anzupassen und sie unter Verwendung von 3D-gedruckten Strukturen auf Hummelnester anzuwenden und die Fallendesigns an Kolonien von Bombus huntiizu testen. Der Designprozess folgte den Annahmen, dass die Fallen kostengünstig herzustellen und an eine Vielzahl von Hummelarten angepasst werden sollten, den Bienen nur minimalen Schaden oder Störungen zufügen sollten und dass die Rate der Pollenentfernung die Pollenentnahme an der Hand übersteigen sollte. Die dreidimensionale Drucktechnologie ist vielseitig, leicht zugänglich und ein kostengünstiges Werkzeug, mit dem Forscher Objekte für bestimmte Zwecke replizieren und modifizieren können18. Die hier vorgestellte Technik weist den Anwender an, Pollenfallen zu bauen und an handelsüblichen Hummelvölkern zu befestigen. Die Fallen sind nicht für den Einsatz bei wilden Kolonien ausgelegt. Diese Fallen entfernen passiv die korvikulären Pollenlasten von den Hinterbeinen pollentragender Hummeln, wenn sie zu ihren Nistkästen zurückkehren.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:461px;" width="462">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:71px;">MakerBot Replicator+</td>
			<td style="width:87px;">MakerBot</td>
			<td style="width:87px;">Model PABH65</td>
			<td style="width:217px;"></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:71px;">MakerBot Tough Material</td>
			<td style="width:87px;">PLA Filament</td>
			<td style="width:87px;"></td>
			<td>various colors</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:71px;">Nest Box</td>
			<td style="width:87px;">Biobest</td>
			<td style="width:87px;"></td>
			<td>Not sold publicly without bee purchase</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a 3d printed pollen trap for bumble bee (bombus) hive entrances

Um die Pflanzenquellen zu überprüfen, aus denen Hummeln nach Pollen suchen, müssen Individuen gesammelt werden, um ihre korvikulären Pollenlasten für die Analyse zu entfernen. Dies geschieht traditionell, indem Futtersucher an Nesteingängen oder an Blumen genetzt, die Bienen auf Eis gekühlt und dann die Pollenlasten mit einer Pinzette oder einer Bürste von den Corbiculae entfernt wurden. Diese Methode ist zeit- und arbeitsintensiv, kann das normale Futtersuchverhalten verändern und zu Stichvorfällen für den Arbeiter führen, der die Aufgabe ausführt. Pollenfallen, wie sie bei Honigbienenstöcken verwendet werden, sammeln Pollen, indem sie korvikuläre Pollenlasten von den Beinen der Arbeiter entfernen, während sie durch Bildschirme am Nesteingang gehen. Fallen können eine große Menge Pollen von zurückkehrenden Futterbienen mit minimalem Arbeitsaufwand entfernen, aber bis heute ist keine solche Falle für die Verwendung mit Hummelvölkern verfügbar. Arbeiter innerhalb einer Hummelkolonie können in der Größe variieren, was die Größenauswahl der Eingänge schwierig macht, diesen Mechanismus an kommerziell aufgezogene Hummelstöcke anzupassen. Mit Hilfe von 3D-Druck-Designprogrammen haben wir eine Pollenfalle erstellt, die erfolgreich die korvikulären Pollenlasten von den Beinen der zurückkehrenden Hummelsucher entfernt. Diese Methode reduziert signifikant die Zeit, die Forscher benötigen, um Pollen von Hummelsuchern zu sammeln, die in die Kolonie zurückkehren. Wir präsentieren das Design, die Ergebnisse der Pollenentfernungseffizienztests und schlagen Den Forschern Bereiche für Modifikationen vor, um Fallen an eine Vielzahl von Hummelarten oder Nistkastendesigns anzupassen.

Acht verschiedene Pollenfilterdesigns wurden getestet, um ihre Wirksamkeit und Effizienz bei der Entfernung von korvikulären Pollenbelastungen von zurückkehrenden Hummelarbeitern zu bestimmen. Alle Konstruktionen waren erfolgreich darin, mindestens eine korvikuläre Pollenlast von einem zurückkehrenden Futterhäuschen zu entfernen. Es wurde jedoch festgestellt, dass einige Arbeiter daran hinderten, den Bienenstock zu verlassen oder zu betreten, oder es versäumten, Pollenlasten zu entfernen(Tabelle 1). </stron...

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A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

Wir stellen einen nicht-tödlichen und automatisierten Mechanismus vor, um Pollen von Hummelarbeitern (Bombus) zu sammeln, die zu einem Bienenstock zurückkehren. Anleitungen zur Herstellung, Vorbereitung, Installation und Verwendung der Geräte sind enthalten. Durch die Verwendung von 3D-gedruckten Objekten war die Änderung des Designs zeitnah, effizient und ermöglichte eine schnelle Bearbeitungszeit für das Testen.

Eine 3D-gedruckte Pollenfalle für Hummel (Bombus) Bienenstockeingänge

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis.  ...

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Research

JoVE Journal

Biology

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee (Bombus) Hive Entrances

5.0K Aufrufe.  Utah State University. Wir stellen einen nicht-tödlichen und automatisierten Mechanismus vor, um Pollen von Hummelarbeitern (Bombus) zu sammeln, die zu einem Bienenstock zurückkehren. Anleitungen zur Herstellung, Vorbereitung, Installation und Verwendung der Geräte sind enthalten. Durch die Verwendung von 3D-gedruckten Objekten war die Änderung des Designs zeitnah, effizient und ermöglichte eine schnelle Bearbeitungszeit für das Testen.

Serie: A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

Measuring the Bending Stiffness of Bacterial Cells Using an Optical Trap

We developed a protocol to measure the bending rigidity of filamentous rod-shaped bacteria. Forces are applied with an optical trap, a microscopic three-dimensional spring made of light that is formed when a high-intensity laser beam is focused to a very small spot by a microscope's objective lens. To bend a cell, we first bind live bacteria to a chemically-treated coverslip. As these cells grow, the middle of the cells remains bound to the coverslip but the growing ends are free of this restraint. By inducing filamentous growth with the drug cephalexin, we are able to identify cells in which one end of the cell was stuck to the surface while the other end remained unattached and susceptible to bending forces. A bending force is then applied with an optical trap by binding a polylysine-coated bead to the tip of a growing cell. Both the force and the displacement of the bead are recorded and the bending stiffness of the cell is the slope of this relationship.

We present a protocol for bending filamentous bacterial cells attached to a cover-slip surface with an optical trap to measure the cellular bending stiffness.

Die Messung der Biegesteifigkeit von Bakterienzellen mit einer optischen Falle

We developed a protocol to measure the bending rigidity of filamentous rod-shaped bacteria. Forces are applied with an optical trap, a microscopic ...

Forschung

Biologie

Associated Chromosome Trap for Identifying Long-range DNA Interactions

Genetic information encoded by DNA is organized in a complex and highly regulated chromatin structure. Each chromosome occupies a specific territory, that may change according to stage of development or cell cycle. Gene expression can occur in specialized transcriptional factories where chromatin segments may loop out from various chromosome territories, leading to co-localization of DNA segments which may exist on different chromosomes or far apart on the same chromosome. The Associated Chromosome Trap (ACT) assay provides an effective methodology to identify these long-range DNA associations in an unbiased fashion by extending and modifying the chromosome conformation capture technique. The ACT assay makes it possible for us to investigate mechanisms of transcriptional regulation in trans, and can help explain the relationship of nuclear architecture to gene expression in normal physiology and during disease states.

The associated chromosome trap (ACT) assay is a novel unbiased method for identifying long-range DNA interactions. The characterization of long range DNA interactions will allow us to determine the relationship of nuclear architecture to gene expression in both normal physiology and in diseased states.

Assoziierte Chromosome-Trap zur Identifizierung weiträumige DNA-Wechselwirkungen

Genetic information encoded by DNA is organized in a complex and highly regulated chromatin structure.  Each chromosome occupies a specific territory, ...

Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees collect and convert to beebread by placing colonies in a specially constructed enclosed flight area. Methods were developed to analyze the protein and amino acid composition of the pollen and beebread. We also describe how consumption of the beebread was measured and methods used to determine adult worker bee hemolymph protein titers after feeding on beebread for 4, 7 and 11 days after emergence. Methods were applied to determine if genotype affects the conversion of pollen to beebread and the rate that bees consume and acquire protein from it. Two subspecies (European and Africanized honey bees; EHB and AHB respectively) were provided with the same pollen source. Based on the developed methods, beebread made by both subspecies had lower protein concentrations and pH values than the pollen. In general, amino acid concentrations in beebread made by either EHB or AHB were similar and occurred at higher levels in beebread than in pollen. Both AHB and EHB consumed significantly more of the beebread made by AHB than by EHB. Though EHB and AHB consumed similar amounts of each type of beebread, hemolymph protein concentrations in AHB were higher than in EHB. Differences in protein acquisition between AHB and EHB might reflect environmental adaptations related to the geographic region where each subspecies evolved. These differences could contribute to the successful establishment of AHB populations in the New World because of the effects on brood rearing and colony growth.

Here are methods to quantify nutrients in pollen before and after its conversion to beebread by two subspecies of honeybees. We describe techniques to measure beebread consumption and resulting protein titers in both subspecies.

Methoden zum Vergleich der Nährstoffe in Bienenbrot Hergestellt von Africanized und europäischen Honigbienen und die Auswirkungen auf die Hämolymphe Protein Titer

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees ...

Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment methods. Here we describe methods to measure the quantities of adult bees, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, by photographing frames, and by installing hives on scales and with internal sensors. Data from these periodic evaluations are then combined with running average and daily detrended data on hive weight and internal hive temperature. The resulting datasets have been used to detect colony-level effects of imidacloprid applied in a sugar syrup as low as 5 parts per billion. The methods are objective, require little training, and provide permanent records in the form of sensor output and photographs.

Sublethal doses of pesticides may affect colonies in ways that are difficult to detect using only periodic or visual methods. Methods to measure total adult bee mass, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, photographing frames, and installing sensors, are provided. Data analysis is also addressed.

Überwachung der Kolonie-Ebene Auswirkungen der subletalen Schädlingsbekämpfungsmittelbelichtung auf Honigbienen

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment ...

Collection and Identification of Pollen from Honey Bee Colonies

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate pesticide exposure of bees via pollen. Described herein is an effective pollen-trapping method for collecting corbicular pollen from honey bees returning to their hives. This collection method results in large quantities of corbicular pollen that can be used for research purposes. Honey bees collect pollen from many plant species, but typically visit one species during each collection trip. Therefore, each corbicular pollen pellet predominantly represents one plant species, and each pollen pellet can be described by color. This allows the sorting of samples of corbicular pollen by color to segregate plant sources. Researchers can further classify corbicular pollen by analyzing the morphology of acetolyzed pollen grains for taxonomic identification. These methods are commonly used in studies related to pollinators such as pollination efficiency, pollinator foraging dynamics, diet quality, and diversity. Detailed methodologies are presented for collecting corbicular pollen using pollen traps, sorting pollen by color, and acetolyzing pollen grains. Also presented are results pertaining to the frequency of pellet colors and taxa of corbicular pollen collected from honey bees in five different cropping systems.

We describe methods for collecting corbicular pollen from honey bees as well as protocols for color sorting, acetolysis, and microscope slide preparation of pollen for taxonomic identification. In addition, we present pellet color and taxonomic diversity of corbicular pollen collected from five cropping systems using pollen traps.

Sammlung und Identifizierung von Pollen aus Honigbienenvölkern

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate ...

Assessing Agrochemical Risk to Mated Honey Bee Queens

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not accurately capture the effects of agrochemical exposure on honey bee queens. As the sole producer of fertilized eggs inside a honeybee colony, the queen is arguably the most important single member of a functioning colony unit. Therefore, understanding how agrochemicals affect queen health and productivity should be considered a critical aspect of pesticide risk assessment. Here, an adapted method is presented to expose honey bee queens and worker queen attendants to agrochemical stressors administered through a worker diet, followed by tracking egg production in the laboratory and assessing first instar eclosion using a specialized cage, referred to as a Queen Monitoring Cage. To illustrate the method&#39;s intended use, results of an experiment in which worker queen attendants were fed diet containing sublethal doses of imidacloprid and effects on queens were monitored are described.

This protocol was developed to enhance the understanding of how agrochemicals affect honey bee (Apis mellifera) reproduction by establishing methods to expose honey bee queens and their worker caretakers to agrochemicals in a controlled, laboratory setting and carefully monitoring their relevant responses.

Bewertung des agrochemischen Risikos für gepaarte Honigbienenköniginnen

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not ...

An Innovative 3D-Printed Insert Designed to Enable Straightforward 2D and 3D Cell Cultures

The classical analyses of indirect communication between different cell types necessitate the use of conditioned media. Moreover, the production of conditioned media remains time-consuming and far from physiological and pathological conditions. Although a few models of co-culture are commercially available, they remain restricted to specific assays and are mostly for two types of cells. 
Here, 3D-printed inserts are used that are compatible with numerous functional assays. The insert allows the separation of one well of a 6-well plate into four compartments. A wide range of combinations can be set. Moreover, windows are designed in each wall of the compartments so that potential intercellular communication between every compartment is possible in the culture medium in a volume-dependent manner. For example, paracrine intercellular communication can be studied between four cell types in monolayer, in 3D (spheroids), or by combining both. In addition, a mix of different cell types can be seeded in the same compartment in 2D or 3D (organoids) format. The absence of a bottom in the 3D-printed inserts allows the usual culture conditions on the plate, possible coating on the plate containing the insert, and direct visualization by optical microscopy. The multiple compartments provide the possibility to collect different cell types independently or to use, in each compartment, different reagents for RNA or protein extraction. In this study, a detailed methodology is provided to use the new 3D-printed insert as a co-culture system. To demonstrate several capacities of this flexible and simple model, previously published functional assays of cell communication were performed in the new 3D-printed inserts and were demonstrated to be reproducible. The 3D-printed inserts and the conventional cell culture using conditioned media led to similar results. In conclusion, the 3D-printed insert is a simple device that can be adapted to numerous models of co-cultures with adherent cell types.

In this paper, a newly designed 3D-printed insert is presented as a model of co-culture and validated through the study of the paracrine intercellular communication between endothelial cells and keratinocytes.

Ein innovativer 3D-gedruckter Einsatz, der für einfache 2D- und 3D-Zellkulturen entwickelt wurde

The classical analyses of indirect communication between different cell types necessitate the use of conditioned media. Moreover, the production of ...

Eine verbesserte Methode zur Messung von Pollenhydratationsprofilen in Arabidopsis thaliana

A High-Resolution, Single-Grain, In Vivo Pollen Hydration Bioassay for Arabidopsis thaliana

Sexual reproduction in flowering plants requires initial interaction between the pollen grain and the stigmatic surface, where a molecular dialog is established between the interacting partners. Studies across a range of species have revealed that a series of molecular checkpoints regulate the pollen-stigma interaction to ensure that only compatible, generally intraspecific pollen is successful in effecting fertilization. In species that possess a 'dry stigma', such as the model plant Arabidopsis thaliana, the first post-pollination, prezygotic compatibility checkpoint is the establishment of pollen hydration. 
This phase of pollination is tightly regulated, whereby signals from the pollen grain elicit the release of water from the stigma, thus permitting pollen hydration. The ability to accurately measure and track pollen hydration over time is key to the design of experiments directed at understanding the regulation of this critical step in reproduction. Published protocols frequently utilize flowers that have been excised from the parent plant, maintained on liquid or solid media, and bulk pollinated. 
This paper describes a noninvasive, in vivo pollination bioassay that permits minute-by-minute hydration tracking of individual A. thaliana pollen grains at high resolution. The assay is highly reproducible, able to detect very subtle variations of pollen hydration profiles, and thus is suitable for the analysis of mutants that affect pathways regulating pollination. Although the protocol is lengthier than those described for bulk pollinations, the precision and reproducibility it provides, along with its in vivo nature, make it ideal for the detailed dissection of pollination phenotypes.

Autor im Rampenlicht: Ein hochauflösender, in vivo Pollenhydratations-Bioassay mit einem einzigen Korn für Arabidopsis thaliana  

An improved method to measure pollen hydration profiles in Arabidopsis thaliana is described here. The new method offers higher resolution, is noninvasive, and is highly reproducible. The protocol represents a new tool for a finer dissection of the processes that regulate the early stages of pollination.

Ein hochauflösender Einzelkorn-In-vivo-Pollenhydratations-Bioassay für Arabidopsis thaliana

Sexual reproduction in flowering plants requires initial interaction between the pollen grain and the stigmatic surface, where a molecular dialog is ...