コルビー・カーペンターとスペンサー・マティアスが3Dプリンティングデザインを支援してくれたことに感謝します。エレン・クリンガーが写真の人物を制作し、ジョナサン・B・コッホが改訂を支援してくれたことに感謝します。資金は、USDA-ARS受粉昆虫生物学、管理、系統研究ユニットによって提供されました。

1. 花粉トラップ構造の印刷
<ol><li>バンブルミツバチが巣を作っている巣箱に適したSTLファイルをダウンロードします(例えば、バイオベストやコッパート風のじんましん、https://www.ars.usda.gov/pacific-west-area/logan-ut/pollinating-insect-biology-management-systematics-research/docs/pollen-traps/)。ファイルは、エンドユーザーがダウンロードおよび変更のために無料で、一般に利用可能です。</li>
	<li>STL ファイルをプリンタ プログラムで開きます。プリンタの製造元の指示に従って、4 つのトラップ コンポーネントを作成します。 注:トラップボディが印刷するには約3時間、キャッチ盆地が印刷する場合は2時間、フィルタとトラップクロージャ挿入でそれぞれ30分を印刷します。トラップ本体サイズは6cm×3.8cm×7cmです。</li>
</ol>2. 花粉トラップアセンブリ
<ol><li>トラップ本体とキャッチ盆地と共に印刷された支持構造を取り外し、トラップ本体の篩構造のものを含む(図1)。</li>
	<li>3/16 in(0.476 cm)のドリルビットをハンドドリルに取り付けて、花粉フィルターの隆起した端を横切るプラスチックストランドを取り除き、ハエがフィルターホールを通過するのを妨げる可能性があります。花粉フィルターの平らな側面に任意のバンプや隆起エッジを均等にするために、カミソリの刃とサンドペーパーを切断ボックスを使用してください。</li>
	<li>プラスチックフィルターをトラップ本体の片側にそっと押し込んで、花粉フィルターをトラップ本体に入れます。トラップの左側には、上げられたフィルタコーンの通過に対応する大きな開口部が付いているため、フィルタは一つの方法でのみ適合します。<ol>
<li>側面のスリットが小さすぎて花粉フィルターが滑らかに滑り落ちる場合は、一度にプラスチックの小さな部分を取り除くことができるカミソリまたは他のツールでトラップボディのスリットから十分なプラスチックを削ります。花粉フィルターとトラップ本体の間に 2 mm の隙間があって、花粉フィルターがしっかりと収まることを確認します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>トラップボディの底部の隆起したエッジをキャッチ盆地の上部の溝にスライドさせて、キャッチ盆地をトラップボディに取り付けます。捕捉盆は、トラップ本体の篩領域の真下に配置する必要があります(図1A\u2012E)。</li>
	<li>プラスチックを切断またはサンディングして、トラップ本体からのキャッチ盆地の滑らかな配置と除去を可能にすることで、適切な修正を行います。キャッチ盆地の配置は、所定の位置に花粉フィルターを確保し、キャッチ盆地が取り外されるまで除去することはできませんし、また、キャッチ盆地が所定の位置にある間に花粉フィルターを挿入することはできません。 注: 複数のじんましんが互いに近くに配置されている場合、各ハイブにトラップボディの一意の色の組み合わせを提供し、さまざまな方向のハイブを展開することに加えて、流域と花粉フィルタ構造をキャッチすると、戻ってくる作業者が巣を見つけるのに役立ちます。</li>
</ol>3. バンブルミツバチコロニーの準備
<ol><li>コロニーを展開する前に24\u201248 hの花粉の給餌を停止します。これにより、労働者は保存された花粉を使い切り、花粉を求めて巣を離れるように刺激します。</li>
	<li>トラップのインストール中にミツバチがエスケープするのを防ぐために、フィルタースロットにトラップクロージャ挿入を挿入して、インストール用のハイブトラップ本体を準備します。</li>
	<li>赤い光の下でミツバチが飛ぶのを防ぐために、段ボールの外側の箱からプラスチック製の巣箱を持ち上げます。</li>
	<li>巣の前にプラスチック製の巣の入り口を見つけます。巣の供給者に応じて入り口の2つのスタイルがあります:コッパースタイルのボックス(ステップ3.5)とBiobestスタイルのボックス(ステップ3.6)。。</li>
	<li>コッパースタイルのハイブの入り口の場合は、両方の入り口の穴が開くまで入り口タブを引き上げて巣の入り口に花粉トラップを取り付けます。<ol>
<li>花粉トラップの2本のチューブを入口穴に挿入し、花粉トラップのふるいが底にあることを確認します。プラスチック製の入り口タブをそっと押し下げて、花粉トラップを所定の位置に固定します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>バイオベストスタイルのハイブの入り口に花粉トラップを取り付けるには、平らなヘッドドライバーを使用して、巣箱からプラスチック製の入り口装置をそっとこじてください。花粉トラップを巣にしっかりと当てはめて入口穴に入れ込む(図1E)。<ol>
<li>必要に応じて、トラップが巣箱に接触するテープまたはクイックドライ接着剤を使用して、ネストにトラップを固定します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>プラスチック製の巣箱を段ボール箱に戻します。花粉トラップに対応するために段ボールを切り取る必要があるかもしれません。</li>
</ol>4. 巣の展開
<ol><li>分析範囲にネスト ボックスを配置します。これらは、収集される花粉の質と量に悪影響を与える可能性がありますので、風のための降水量と停泊から保護するためにカバーを提供します。温室に入れたじんましんに十分な日焼け止めを施して過熱を減らします。</li>
	<li>トラップボディからトラップクロージャ挿入物を取り外して、飼育者が周囲の領域とその巣の位置を自分で向けることができるように、ミツバチが自由に飼育できるようにします。オリエンテーション飛行時間は、通常の条件下で24時間で完了する必要があります。</li>
</ol>5. 花粉コレクション
<ol><li>トラップを固定するには、花粉フィルターをフィルター スロットにスライドさせて、確実に適切な位置に配置します。</li>
	<li>キャッチ洗面器を、完全に閉じるまで、前部からトラップ本体にスライドさせて設置します。捕捉盆が過度に緩んでいる場合や、トラップ本体から落ちる場合は、ゴムバンドを使用してトラップボディに固定します。</li>
	<li>最初の展開で花粉トラップに出入りするミツバチを観察し、花粉フィルターの穴がミツバチを収容するのに十分な大きさであることを確認します。<ol>
<li>作業者が花粉フィルターを通過できない場合は、フィルターを取り外し、3/16 in (0.476 cm) より大きいドリル ビットを使用して穴のサイズを大きくします。大きすぎる穴は花粉を集めないので、毎回穴径1/32インチ(0.079 cm)を増やして、連続的に行います。</li>
		<li>ミツバチがフィルターを通過できるようになると、入り口を観察し続け、再入国時に花粉が取り除かれていることを確認します。 注:ミツバチは花粉フィルターの穴、特に彼らが通過する最初の数回を動かすのに苦労するはずです。彼らがあまりにも簡単に通過した場合、花粉はコルビキュラから外れない可能性があります。</li>
	</ol>
</li>
	<li>花粉の収集の指定期間の後、滑り、トラップ本体から捕まえる盆地を除去します。</li>
	<li>実験計画に従って花粉の負荷を処理します。</li>
	<li>花粉の収集の次の期間まで労働者が自由に飼育できるように花粉フィルターを削除します。トラップボディは、実験の間ハイブにアタッチされたままになることがあります。 注:研究者がコロニーから花粉を収集することを望む限り、花粉トラップが従事している可能性があります。しかし、1週間に24時間以上の花粉トラップの展開は、ハイブと遅滞コロニーの発達中のブロードの飢餓をもたらす可能性があります。</li>
</ol>

<ol>
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著者らは開示するものは何もない。

バンブルミツバチコロニーの入り口からの花粉のコレクションは、生態学的および農業的研究の様々なことができます。バンブルミツバチが花粉を収集する花の源を特定することは、コロニーの全体的な食事に貢献する植物の多様性に関する貴重な情報と洞察を提供します19.花粉源を特定することは、野生の土地における生態系サービスの農業生産と研究の両方に影響?...

バンブルミツバチ(ボンバスspp.)は、世界の温帯、高山、北極地域で発見された大きな堅牢な昆虫です1.彼らは、植物のコミュニティに重要であり、彼らが訪問する農作物のための重要な受粉サービスを提供します 2.最近、いくつかの種の豊富さと分布の減少は、受粉者としての重要性を国民の意識の最前線に持って来ています3.研究者は、ミツバチが飼育する多様で豊富な花資源の欠如を含む人口減少に寄与している可能性が高いいくつかのストレッサーを特定しました。ミツバチが飼育する植物種を特定することで、研究者や土地管理者は、バンブルミツバチが資源の入手可能性、競争、および人為的障害の変化にどれほど反応しているかを理解することができます5,6.
バンブルミツバチの花粉採餌の好みを調査する研究は、多くの場合、研究者が花で飼育する個々のミツバチを捕まえて、さらに処理し、7、8、9、10を同定するために標本からコルボリ花粉負荷を取り除くことによって行われます。この方法は、バンブルミツバチ種の種または集合体が領域7の資源をどのように利用しているかについての洞察を提供するが、それは時間がかかり、飼育蜂11の起源のコロニーを特定するために追加の分子分析なしには、じんましん間の好みの潜在的な違いを識別することができない時間がかかる。
採餌力学のいくつかの研究のために、 個々のコロニーで研究を行うことを望む。しかし、野生のバンブルミツバチの巣は、一般的に地下または地上階に位置し、12を見つけるのが困難です。商業的に生産されたバンブルミツバチのじんましんは、研究者により大きなアクセスとより良い実験的制御を提供し、労働者からの花粉の除去は、主に彼らがハイブに戻るときに飼料を捕獲し、手動で彼らのコルバスキュラー花粉負荷13、14を除去することによって行われます。ミツバチの角膜から手で花粉を除去することは、特に花粉飼料の戻る率が低い可能性があるハイブの入り口で花粉の低い毎時収量で時間がかかる。さらに、ミツバチから花粉を手動で取り除くことは、乱れた労働者から刺傷を引き起こす可能性があります。
花粉トラップは、ミツバチから花粉を実験的に除去するために何十年も使用されてきました。しかし、バンブルミツバチから花粉を除去する受動的な方法は開発されていない。花粉を戻すフォアガーバンブルミツバチから除去するメカニズムを開発する際の主な障害は、バンブルミツバチコロニー16に存在する労働者サイズの大きな変動である。ミツバチの花粉トラップは、ミツバチの労働者の大きさがあまり変わらないので、主に効果的です。さらに、これらのトラップはインストール後にわずかな操作しか必要としないし、ミツバチを犠牲にする必要はありません17.これは、ハイブに戻るときに労働者の後ろ足から花粉を取り除くスクリーンまたはプラスチック表面を使用して達成されます。これらのトラップは、花粉の負荷の一部のみを飼料から取り除き、それらの様々なデザインは花粉の収集で多様な効率をもたらす。花粉がミツバチの足から取り除かれると、それはスクリーンを通って、ミツバチがアクセスできないコレクション盆地に落ちるので、研究者はハイブにわずかな妨害でしか取り除かれなくなります。
本研究の目的は、ミツバチのじんましんから花粉を採取するために使用される技術を適応させ、3Dプリント構造を使用してそれらをバンブルミツバチの巣に適用し 、Bombus huntiiのコロニー上のトラップデザインをテストすることです。設計プロセスは、トラップが生産するために安価で、様々なバンブルミツバチ種に適応可能で、ミツバチに害や妨害を最小限に抑え、花粉除去率が花粉の手のコレクションを超えるべきであるという仮定に従った。3次元印刷技術は、汎用性が高く、簡単にアクセスでき、費用対効果の高いツールであり、研究者は特定の目的のためにオブジェクトを複製および変更することができます18.ここに示す技術は、花粉トラップを構築し、市販のバンブルミツバチのコロニーにそれらを取り付けるためにユーザーに指示します。トラップは野生のコロニーで使用するようには設計されていません。これらのトラップは、巣箱に戻るときに、バンブルミツバチを運ぶ花粉の後ろ足からコルボキュラー花粉の負荷を受動的に取り除きます。

<table><tbody><tr><td>MakerBot Replicator+</td><td>MakerBot</td><td>Model PABH65</td><td></td></tr><tr><td>MakerBot Tough Material</td><td>PLA Filament</td><td></td><td>various colors</td></tr><tr><td>Nest Box</td><td>Biobest</td><td></td><td>Not sold publicly without bee purchase</td></tr></tbody></table>

a 3d printed pollen trap for bumble bee (bombus) hive entrances

花粉の飼育からバンブルミツバチの植物源を確認するには、個人を収集して、分析のためにコルボキュラー花粉の負荷を取り除く必要があります。 これは伝統的に、巣の入り口や花の上で飼料をネットし、氷の上でミツバチを冷やし、鉗子やブラシでコルビクエから花粉の負荷を取り除くことによって行われてきました。 この方法は時間と労力を要し、通常の採餌行動を変更する可能性があり、タスクを実行する作業者に対してインシデントが発生する可能性があります。 ミツバチのじんましんに使用されるような花粉トラップは、巣の入り口でスクリーンを通過する労働者の足からコルブロック花粉の負荷を取り除くことによって花粉を収集します。 トラップは、最小限の労働力でフォアガーミツバチを返すことから大量の花粉を取り除くことができますが、現在までにそのようなトラップはバンブルミツバチのコロニーで使用することはできません。バンブルミツバチコロニー内の労働者は、商業的に飼育されたバンブルミツバチのじんましんにこのメカニズムを適応させることが困難な入り口のサイズ選択を行うサイズが異なる可能性があります。 3D印刷デザインプログラムを使用して、私たちは正常にバンブル飼料の足から角膜花粉の負荷を除去する花粉トラップを作成しました。 この方法は、コロニーに戻るバンブルミツバチの飼育員から花粉を収集するために研究者が必要とする時間を大幅に削減する。我々は、設計、花粉除去効率試験の結果を提示し、様々なバンブルミツバチ種または巣箱の設計にトラップを適応させるために研究者のための変更の領域を提案する。

8つの異なる花粉フィルター設計は、戻ってくるバンブルミツバチ労働者から角膜花粉の負荷を除去する際の有効性と効率を決定するためにテストされた。すべての設計は、戻ってくる偽造者から少なくとも1つのコルキュール花粉の負荷を取り除くことに成功しました。しかし、一部の労働者がハイブを離れたり入ったりするのを遅くしたり、花粉の負荷を取り除くことができなかったこと?...

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A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

ハイブに戻るバンブルミツバチ(ボンバス)の労働者から花粉を集める非致死的で自動化されたメカニズムを提示します。デバイスの製造、準備、インストール、および使用に関する説明書が含まれています。3D プリントオブジェクトを使用することで、設計の変更はタイムリーで効率的で、テストの迅速なターンアラウンドが可能になりました。

バンブルビー(ボンバス)ハイブ入口のための3Dプリント花粉トラップ

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis.  ...

a-3d-printed-pollen-trap-for-bumble-bee-bombus-hive-entrances

Research

JoVE Journal

Biology

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee (Bombus) Hive Entrances

5.1K ビュー.  Utah State University. ハイブに戻るバンブルミツバチ(ボンバス)の労働者から花粉を集める非致死的で自動化されたメカニズムを提示します。デバイスの製造、準備、インストール、および使用に関する説明書が含まれています。3D プリントオブジェクトを使用することで、設計の変更はタイムリーで効率的で、テストの迅速なターンアラウンドが可能になりました。

ビデオ: A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

Preventing colonization of bird nest boxes by invasive Africanized honey bees is important for conservation efforts of nest-site limited birds. We provide an integrated pest management approach to &#34;push&#34; bees away from nest boxes with a repellant insecticide, permethrin, and &#34;pull&#34; them toward pheromone baited swarm traps.

ミツバチによって植民地化鳥の巣箱を削減するためのプッシュプルプロトコル

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

環境学

Empirical, Metagenomic, and Computational Techniques Illuminate the Mechanisms by which Fungicides Compromise Bee Health

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered &#34;bee-safe,&#34; there is mounting evidence that fungicide residues in pollen are associated with bee declines (for both honey and bumble bee species). While the mechanisms remain relatively unknown, researchers have speculated that bee-microbe symbioses are involved. Microbes play a pivotal role in the preservation and/or processing of pollen, which serves as nutrition for larval bees. By altering the microbial community, it is likely that fungicides disrupt these microbe-mediated services, and thereby compromise bee health. This manuscript describes the protocols used to investigate the indirect mechanism(s) by which fungicides may be causing colony decline. Cage experiments exposing bees to fungicide-treated flowers have already provided the first evidence that fungicides cause profound colony losses in a native bumble bee (Bombus impatiens). Using field-relevant doses of fungicides, a series of experiments have been developed to provide a finer description of microbial community dynamics of fungicide-exposed pollen. Shifts in the structural composition of fungal and bacterial assemblages within the pollen microbiome are investigated by next-generation sequencing and metagenomic analysis. Experiments developed herein have been designed to provide a mechanistic understanding of how fungicides affect the microbiome of pollen-provisions. Ultimately, these findings should shed light on the indirect pathway through which fungicides may be causing colony declines.

Microbial consortia within bumble bee hives enrich and preserve pollen for bee larvae. Using next generation sequencing, along with laboratory and field-based experiments, this manuscript describes protocols used to test the hypothesis that fungicide residues alter the pollen microbiome, and colony demographics, ultimately leading to colony loss.

実証、メタゲノムと計算手法を照らす殺菌剤妥協ミツバチ健康メカニズム

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered ...

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey bee colony numbers have been declining in the United States and many European countries since 1947. A number of factors play a role in this decline, including the unintentional exposure of honey bees to pesticides. The development of new methods and regulations are warranted to reduce pesticide exposures to these pollinators. One approach is the use of repellent chemistries that deter honey bees from a recently pesticide-treated crop. Here, we describe a protocol to discern the deterrence of honey bees exposed to select repellent chemistries. Honey bee foragers are collected and starved overnight in an incubator 15 h prior to testing. Individual honey bees are placed into Petri dishes that have either a sugar-agarose cube (control treatment) or sugar-agarose-compound cube (repellent treatment) placed into the middle of the dish. The Petri dish serves as the arena that is placed under a camera in a light box to record the honey bee locomotor activities using video tracking software. A total of 8 control and 8 repellent treatments were analyzed for a 10 min period with each treatment was duplicated with new honey bees. Here, we demonstrate that honey bees are deterred from the sugar-agarose cubes with a compound treatment whereas honey bees are attracted to the sugar-agarose cubes without an added compound.

The loss of honey bee colonies presents a challenge to crop pollination services. Current pollinator protection practices warrant an alternative approach to minimize the contact of honey bees to harmful pesticides using repellent chemistries. Here, we provide detailed methods for a visual tracking protocol to screen deterrents for bees.

ハチミツの抑止化学物質をスクリーニングするためのビデオトラッキングプロトコル

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide regulation studies. The risk of exposure to fungicide residues is likely to be especially high if the spray occurs on, or near host plants while the bees are collecting pollen to provision their nests. For species of Osmia that consume pollen from a select group of plants (oligolecty), the inability to use pollen from non-host plants can increase their risk factor for fungicide-related toxicity. This manuscript describes protocols used to successfully rear oligolectic mason bees, Osmia ribifloris sensu lato, from egg to prepupal stage within cell culture plates under standardized laboratory conditions. The in vitro-reared bees are subsequently used to investigate the effects of fungicide exposure and pollen source on bee fitness. Based on a 2 &#215; 2 fully crossed factorial design, the experiment examines the main and interactive effects of fungicide exposure and pollen source on larval fitness, quantified by prepupal biomass, larval developmental time, and survivorship. A major advantage of this technique is that using in vitro-reared bees reduces natural background variability and allows the simultaneous manipulation of multiple experimental parameters. The described protocol presents a versatile tool for hypotheses testing involving the suite of factors affecting bee health. For conservation efforts to be met with significant, lasting success, such insights into the complex interplay of physiological and environmental factors driving bee declines will prove to be critical.

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Fungicide sprays on flowering plants may expose solitary bees to high concentrations of pollen-borne fungicide residues. Using laboratory-based experiments involving in vitro-reared bee larvae, this study investigates the interactive effects of consuming fungicide-treated pollen derived from host and non-host plants.

体外孤独な蜂の飼育: 幼虫の危険因子を評価するためのツール

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...

Low-Cost Automated Flight Intercept Trap for the Temporal Sub-Sampling of Flying Insects Attracted to Artificial Light at Night

Sampling methods are selected depending on the targeted species or the spatial and temporal requirements of the study. However, most methods for passive sampling of flying insects have a poor temporal resolution because it is time-consuming, costly and/or logistically difficult to perform. Effective sampling of flying insects attracted to artificial light at night (ALAN) requires sampling at user-defined time points (nighttime only) across well-replicated sites resulting in major time and labor-intensive survey effort or expensive automated technologies. Described here is a low-cost automated intercept trap that requires no specialist equipment or skills to construct and operate, making it a viable option for studies that require temporal sub-sampling across multiple sites. The trap can be used to address a wide range of other ecological questions that require a greater temporal and spatial scale than is feasible with previous trap technology.

To study the impacts of artificial light at night (ALAN) on nocturnal flying insects, sampling needs to be confined to nighttime. The protocol describes a low-cost automated flight intercept trap that allows researchers to sample at user-defined periods with increased replication.

夜間に人工光に引き寄せられた飛行昆虫の時間的サブサンプリングのための低コスト自動飛行傍受トラップ

Sampling methods are selected depending on the targeted species or the spatial and temporal requirements of the study. However, most methods for passive ...

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker bees spend the first half of their life inside the dark hive, where they are nursing the larvae or building the regular hexagonal combs for food (e.g. pollen or nectar) and brood3. The antennae are extraordinary multisensory feelers and play a pivotal role in various tactile mediated tasks4, including hive building5 and pattern recognition6. Later in life, each single bee leaves the hive to forage for food. Then a bee has to learn to discriminate profitable food sources, memorize their location, and communicate it to its nest mates7. Bees use different floral signals like colors or odors7, 8, but also tactile cues from the petal surface9 to form multisensory memories of the food source. Under laboratory conditions, bees can be trained in an appetitive learning paradigm to discriminate tactile object features, such as edges or grooves with their antennae10, 11, 12, 13. This learning paradigm is closely related to the classical olfactory conditioning of the proboscis extension response (PER) in harnessed bees14. The advantage of the tactile learning paradigm in the laboratory is the possibility of combining behavioral experiments on learning with various physiological measurements, including the analysis of the antennal movement pattern.

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees Apis mellifera L.

In this protocol we show how to condition harnessed honey bees to tactile stimuli and introduce a 2D motion capture technique for analyzing the kinematics of fine-scale antennal sampling pattern.

蜂蜜の蜂で触角サンプリング戦略の触覚エアコンと運動解析（<em&gt;ミツバチ</em&gt; L.）

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker ...

神経科学

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

昆虫に行動可塑性を調査するためのテングザルの拡張レスポンスプロトコル：基本、生物医学および農業研究への応用

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification (RFID) readers built into artificial flowers that display various visual cues, and RFID tags (i.e., passive transponders) glued to the thorax of bumblebee workers. The novelty in our implementation is that RFID readers are built directly into artificial flowers that are capable of displaying several distinct visual properties such as color, pattern type, spatial frequency (i.e., &#8220;busyness&#8221; of the pattern), and symmetry (spatial frequency and symmetry were not manipulated in this experiment). Additionally, these visual displays in conjunction with the automated systems are capable of recording unrewarded and untrained choice behavior. The second method consists of recording choice behavior at artificial flowers using motion-sensitive high-definition camcorders. Bumblebees have number tags glued to their thoraces for unique identification. The advantage in this implementation over RFID is that in addition to observing landing behavior, alternate measures of preference such as hovering and antennation may also be observed. Both automation methods increase experimental control, and internal validity by allowing larger scale studies that take into account individual differences. External validity is also improved because bees can freely enter and exit the testing environment without constraints such as the availability of a research assistant on-site. Compared to human observation in real time, the automated methods are more cost-effective and possibly less error-prone.

This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees.

無線周波数識別かつ効率的にモーションセンシティブビデオがマルハナバチによって報わ選​​択行動の記録を自動化

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees (Bombus terrestris)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from flowering plants. Only a few studies have described the gustatory responses of bees toward toxins in food, and these experiments have mainly used the proboscis extension response on restrained honey bees. Here, a new behavioral assay is presented for measuring the feeding responses of freely-moving, individual worker bumble bees to nutrients and toxins. This assay measures the amount of solution ingested by each bumble bee and identifies how tastants in food influence the microstructure of the feeding behavior.
The solutions are presented in a microcapillary tube to individual bumble bees that have been previously starved for 2-4 hr. The behavior is captured on digital video. The fine structure of the feeding behavior is analyzed by continuously scoring the position of the proboscis (mouthparts) from video recordings using event logging software. The position of the proboscis is defined by three different behavioral categories: (1) proboscis is extended and in contact with the solution, (2) proboscis is extended but not in contact with the solution and (3) proboscis is stowed under the head. Furthermore the speed of the proboscis retracting away from the solution is also estimated.
In the present assay the volume of solution consumed, the number of feeding bouts, the duration of the feeding bouts and the speed of the proboscis retraction after the first contact is used to evaluate the phagostimulatory or the deterrent activity of the compounds tested.
This new taste assay will allow researchers to measure how compounds found in nectar influence the feeding behavior of bees and will also be useful to pollination biologists, toxicologists and neuroethologists studying the bumble bee&#39;s taste system.

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees Bombus terrestris

A novel behavioral assay is described for investigating the short term gustatory responses of the mouthparts of freely-moving bumble bees (Bombus terrestris) toward nutrients and toxins in solution.

小説行動アッセイ個人の味覚応答を調査するために、自由に移動バンブル蜂（<em&gt;セイヨウオオマルハナバチ</em&gt;）

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from ...

Collection and Identification of Pollen from Honey Bee Colonies

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate pesticide exposure of bees via pollen. Described herein is an effective pollen-trapping method for collecting corbicular pollen from honey bees returning to their hives. This collection method results in large quantities of corbicular pollen that can be used for research purposes. Honey bees collect pollen from many plant species, but typically visit one species during each collection trip. Therefore, each corbicular pollen pellet predominantly represents one plant species, and each pollen pellet can be described by color. This allows the sorting of samples of corbicular pollen by color to segregate plant sources. Researchers can further classify corbicular pollen by analyzing the morphology of acetolyzed pollen grains for taxonomic identification. These methods are commonly used in studies related to pollinators such as pollination efficiency, pollinator foraging dynamics, diet quality, and diversity. Detailed methodologies are presented for collecting corbicular pollen using pollen traps, sorting pollen by color, and acetolyzing pollen grains. Also presented are results pertaining to the frequency of pellet colors and taxa of corbicular pollen collected from honey bees in five different cropping systems.

We describe methods for collecting corbicular pollen from honey bees as well as protocols for color sorting, acetolysis, and microscope slide preparation of pollen for taxonomic identification. In addition, we present pellet color and taxonomic diversity of corbicular pollen collected from five cropping systems using pollen traps.

ミツバチのコロニーからの花粉の収集と同定

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate ...

バンブルビー(ボンバス)ハイブ入口のための3Dプリント花粉トラップ

要約

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ミツバチによって植民地化鳥の巣箱を削減するためのプッシュプルプロトコル

実証、メタゲノムと計算手法を照らす殺菌剤妥協ミツバチ健康メカニズム

ハチミツの抑止化学物質をスクリーニングするためのビデオトラッキングプロトコル

体外孤独な蜂の飼育: 幼虫の危険因子を評価するためのツール

夜間に人工光に引き寄せられた飛行昆虫の時間的サブサンプリングのための低コスト自動飛行傍受トラップ

蜂蜜の蜂で触角サンプリング戦略の触覚エアコンと運動解析（

昆虫に行動可塑性を調査するためのテングザルの拡張レスポンスプロトコル：基本、生物医学および農業研究への応用

無線周波数識別かつ効率的にモーションセンシティブビデオがマルハナバチによって報わ選択行動の記録を自動化

小説行動アッセイ個人の味覚応答を調査するために、自由に移動バンブル蜂（

ミツバチのコロニーからの花粉の収集と同定

バンブルビー(ボンバス)ハイブ入口のための3Dプリント花粉トラップ

要約

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ミツバチによって植民地化鳥の巣箱を削減するためのプッシュプルプロトコル

実証、メタゲノムと計算手法を照らす殺菌剤妥協ミツバチ健康メカニズム

ハチミツの抑止化学物質をスクリーニングするためのビデオトラッキングプロトコル

体外孤独な蜂の飼育: 幼虫の危険因子を評価するためのツール

夜間に人工光に引き寄せられた飛行昆虫の時間的サブサンプリングのための低コスト自動飛行傍受トラップ

蜂蜜の蜂で触角サンプリング戦略の触覚エアコンと運動解析（

昆虫に行動可塑性を調査するためのテングザルの拡張レスポンスプロトコル：基本、生物医学および農業研究への応用

無線周波数識別かつ効率的にモーションセンシティブビデオがマルハナバチによって報わ選​​択行動の記録を自動化

小説行動アッセイ個人の味覚応答を調査するために、自由に移動バンブル蜂（

ミツバチのコロニーからの花粉の収集と同定

無線周波数識別かつ効率的にモーションセンシティブビデオがマルハナバチによって報わ選択行動の記録を自動化