Es ist das erste Mal, dass ein stressbedingter Rückfall auf Heroin nach strafbedingter Abstinenz gezeigt wird. Diese Methoden könnten uns helfen, den neuronalen Mechanismus zu verstehen, der dem stressinduzierten Rückfall beim Menschen nach freiwilliger Abstinenz zugrunde liegt. Durch die Verwendung von Nahrungsentzug und Bestrafung auferlegter Abstinenz ahmen wir den menschlichen Zustand genauer nach und verleihen den Tiermodellen des Rückfalls ökologische Gültigkeit.
Beginnen Sie mit der Einstellung der operanten Konditionierkammern, wie im Manuskript beschrieben. Nach der Genesung von der Operation gewöhnen Sie die Ratte 24 Stunden lang in der operanten Trainingskammer, bevor Sie das Protokoll beginnen, ohne die Ratte an der Metallfeder zu befestigen. Platzieren Sie die Ratte während des gesamten Experiments in den operanten Kammern.
Als nächstes befestigen Sie den 5up-Stecker am Tygon-Rohr und der Metallfeder. Beginnen Sie die Trainingseinheit zu Beginn der Dunkelphase des umgekehrten Lichtzyklus. Für die Selbstverabreichung von Heroin sollte der Take-Hebel unter festem Verhältnis eins oder FR eins zur Verfügung stehen.
Programmieren Sie jeden Versuch so, dass er mit dem Einführen des Take-Hebels und dem Einschalten des Hauslichts beginnt. Sobald die Ratte den Take-Hebel einmal gedrückt hat, ziehen Sie den Take-Hebel zurück, schalten Sie das Cue-Licht über dem Hebel ein und tonieren Sie für eine 20-Sekunden-Zeitüberschreitung. Schalten Sie das Hauslicht aus und erlauben Sie die Abgabe von 0,13 Milliliter Heroininfusion in einer Dosis von 0,1 Milligramm pro Kilogramm.
Programmieren Sie dann ein 30-sekündiges Intertrial-Intervall, in dem keine Hinweise präsentiert werden, das Hauslicht ausgeschaltet und der Hebel zurückgezogen wird. Für den nächsten Versuch setzen Sie den Take-Hebel ein und schalten Sie das Hauslicht ein. Für die Selbstverwaltung mit der Seek-Take-Kette unter FR one programmieren Sie das operante Trainingssystem so, dass nur der Seek-Hebel eingesetzt wird und das Hauslicht eingeschaltet wird, um den Beginn der Sitzung mit dem Take-Hebel in einem eingefahrenen Zustand zu signalisieren.
Sobald die Ratte einmal auf den Suchhebel drückt, zieht das Programm den Suchhebel zurück und führt den Take-Hebel ein. Ein Druck auf den Aufnahmehebel zieht den Aufnahmehebel zurück und leitet den Vorgang zum Einschalten des Cue-Lichts sowie ein 30-Sekunden-Intertrial-Intervall ein, wie zuvor demonstriert. Programmieren Sie nach dem Intervall zwischen den Versuchen das operante Trainingssystem so, dass der Suchhebel eingesetzt und das Hauslicht eingeschaltet wird, um den Beginn des nächsten Versuchs zu signalisieren.
Als nächstes programmieren Sie alle Schritte zur Selbstverwaltung mit einer Suchkette unter einem festen Verhältnis eins, wie zuvor mit der Einführung eines variablen Intervalls von fünf für drei Tage als neuer Bewehrungsplan am Suchhebel demonstriert. Richten Sie die Software so ein, dass der erste Druck auf den Suchhebel aktiviert werden kann, um variable Intervall-Fünf-Zeitpläne zu aktivieren. Lassen Sie die Software zufällig eine Intervallzeit aus einer Liste von 0,1, fünf und 10 Sekunden auswählen, was zu einem durchschnittlichen Intervall von fünf Sekunden führt.
Nach Ablauf des gewählten Intervalls zieht die erste Suchhebelpresse den Suchhebel zurück und fährt den Take-Hebel aus. Nachdem Sie die Schritte für den Take-Hebel befolgt haben und wenn der Versuch endet, trainieren Sie die Ratte fünf Tage lang unter variablem Intervall 30-Zeitplan für die Suchverbindung. Lassen Sie dazu die Software eine Zeit aus einer Liste von 15, 30 und 45 Sekunden für durchschnittlich 30 Sekunden zufällig auswählen.
Dann trainieren Sie Ratten für drei Tage unter variablen Intervallen 60 Zeitplänen, so dass die Software zufällig eine Zeit aus einer Liste von 45, 60 und 75 Sekunden auswählen kann. Führen Sie bei strafbedingter Abstinenz acht Tage lang Bestrafungssitzungen mit regelmäßiger Aufsicht durch, um sicherzustellen, dass Ratten keine Anzeichen von abnormalen Schmerzen oder gesundheitlichen Problemen zeigen. Beginnen Sie Bestrafungssitzungen mit dem Einführen des Suchhebels und dem Einschalten des Hauslichts.
Programmieren Sie das operante Trainingssystem so, dass nach Abschluss der Suchverbindung im variablen Intervall 60 der Suchhebel zurückgefahren wird, das Hauslicht ausgeschaltet wird und der Ratte bei 30% der abgeschlossenen Suchglieder ein leichter Fußstoß verabreicht wird, anstatt den Take-Hebel einzuführen. Der Take-Hebel erstreckt sich auf die anderen 70% der abgeschlossenen Suchlinks wie in regulären Selbstverwaltungsversuchen. Nach der Programmierung eines Intertrialintervalls von sieben Minuten wird die Fußstoßintensität auf 0,2 Milliampere eingestellt und um 0,1 Milliampere pro Bestrafungstag auf 1,0 Milliampere erhöht.
Sobald die Ratte den Take-Hebel drückt, wiederholen Sie das feste Verhältnis einen Schritt für das Zurückziehen des Hebels, die Abgabe der Heroininfusion und die Präsentation der Hinweise, gefolgt von einem siebenminütigen Intervall zwischen den Versuchen. Entfernen Sie nach dem letzten Tag der durch Bestrafung verhängten Abstinenz Futterbehälter aus den Kammern für Ratten, die sich einem durch Nahrungsentzug verursachten Rückfalltest unterziehen, und behalten Sie Futterbehälter für die gesättigte Gruppe. Sorgen Sie für unbegrenzten Zugang zu Wasser in beiden Gruppen und überwachen Sie die Gesundheit der Tiere.
Nach 24 Stunden Nahrungsentzug fahren Sie mit einem dreistündigen Heroinsuchtest nach Nahrungsmittelentzug unter einem variablen Intervall 60 mit einem Zwischenprozessintervall von sieben Minuten fort, ohne dass ein Schock oder Heroininfusionen verabreicht werden. Nach der Sitzung bringen Sie die Futterbehälter zu den Ratten mit Nahrungsentzug zurück. Am nächsten Tag entfernen Sie Futterbehälter aus den Kammern der Ratten, die beim ersten Rückfalltest gesättigt waren.
Erlauben Sie den zuvor futterarmen Ratten vor und während des Tests unbegrenzten Zugang zu Nahrung. Führen Sie nach 24-stündigem Nahrungsentzug einen dreistündigen Heroinsuchtest durch, wie zuvor gezeigt. In der Studie zeigten männliche Ratten eine Zunahme der Suchhebelpressen, da der Zeitplan der Verstärkung zunahm.
Während der Trainingstage wurde eine zuverlässige, konstante Anzahl von Heroininfusionen beobachtet. Während der Bestrafung verringerten Ratten die Anzahl der Suchhebeldrücke und Infusionen mit der Zunahme der Fußschockintensität über acht Bestrafungstage. Im Heroin-Suchtest erhöhte der Nahrungsentzug die Heroinsuche nach strafbedingter Abstinenz signifikant, und es wurde kein statistisch signifikanter Effekt für die Zeit oder für die Drogensuche im Laufe der Zeit über die Fütterungsbedingungen hinweg beobachtet. Es ist wichtig, sich die Zeit zu nehmen, die Tiere zu trainieren, um in der grundlegenden Such- und Take-Kette unter FR eins zu lernen.
Ohne diesen Schritt werden die Tiere nicht in der Lage sein, in den Experimenten voranzukommen. Nach der Implementierung des Modells können wir nun Experimente entwerfen, die die Neurobiologie des stressinduzierten Rückfalls nach freiwilliger Abstinenz untersuchen.
