Mit diesem Protokoll des Silikose-Rattenmodells ist es möglich, den pathologischen Prozess der menschlichen Silikose genau nachzuahmen. Diese Technik ist einfach und kostengünstig durchzuführen, hat eine gute Wiederholbarkeit, und es gibt kein Trauma für das Tier. Das in dieser Studie etablierte Rattenmodell trägt zur Früherkennung, genauen Diagnose und Behandlung von Silikose bei.
Zu Beginn werden die Kieselsäurepartikel in einen Achatmörser gegeben und 1,5 Stunden lang gemahlen, bevor das Tier dem Tier ausgesetzt wird. Wiegen Sie dann 30 Gramm der gemahlenen Kieselsäure in einer elektronischen Waage ab und legen Sie sie in einen Glasbehälter. Bei 180 Grad Celsius sechs Stunden lang in einem elektrisch beheizten Lufttrockner backen, um Krankheitserreger von der Oberfläche der Kieselsäurepartikel zu entfernen.
Richten Sie den Kieselsäure-Belichtungsregler ein, indem Sie das Einspritz- und das Generatorsystem anschließen. Geben Sie dann die gewogene Kieselsäure in den Generator und vergewissern Sie sich, dass die Rohrleitung ordnungsgemäß angeschlossen ist. Das Netzkabel ist angeschlossen und die Stromversorgung ist normal.
Nachdem Sie sich vergewissert haben, dass die Ventile der Inhalationskammer geschlossen sind, schalten Sie die Abgasablassvorrichtung und die Luftquelle ein, um zu bestätigen, dass sich das Innere des Abschirmschranks in einem Unterdruckzustand befindet. Überprüfen Sie die Kieselsäurekonzentration im Schrank mit einem kalibrierten atmosphärischen Probenehmer gemäß den Anweisungen des Herstellers. Verwenden Sie für die gravimetrische Bestimmung eine digitale, einteilige Analysenwaage und beschweren Sie die Kieselsäure.
Setzen Sie die Ratte in den Käfig, setzen Sie dann 10 Ratten in die Inhalationskammer und schließen Sie das Inhalationsfach und die abgeschirmten Schranktüren. Fahren Sie dann wie geplant mit dem Kieselsäure-Inhalationsexperiment fort. Nach Beendigung des Versuchs ist das Mischgas-Durchflussregelventil zu schließen und das Reingasdurchflussventil zu öffnen, um das Gas in die Inhalationskammer einzuspritzen.
Schließen Sie nach 20 Minuten das Durchflussventil für reine Luft. Öffnen Sie die Tür und nehmen Sie den Käfig aus der Inhalationskammer. Nehmen Sie dann die Ratten aus dem Käfig und bringen Sie sie zurück in den erregerfreien Raum.
Als nächstes entfernen Sie nacheinander das Rattengestell und die Komponenten des Abzweigrohrs und legen Sie sie zur Reinigung in die Spüle. Schließen Sie nach dem Spülen das automatische Reinigungsventil und öffnen Sie die Klappe. Wischen Sie dann die Innenwand mit einem sauberen Tuch ab, um den Tank zu trocknen.
Zum Schluss desinfizieren Sie den Tank mit 75%igem Ethanol und schließen die Auslassklappe. Öffnen Sie dann schnell die Tür der Inhalationskabine, um die Feuchtigkeit zu verdunsten, damit das Innere der Inhalationskabine trocken bleibt. Die Ratten, die zwei und 24 Wochen lang Kieselsäure ausgesetzt waren, zeigten nach zweiwöchiger Inhalation mit Kieselsäure eine Verdickung der Alveolarwand, während die Alveolarstruktur verschwand und sich nach 24 Wochen große Fibrosebereiche bildeten.
Darüber hinaus wurden die Kieselsäurepartikel in den Makrophagen der Lungenlappen gefangen, die durch ein polarisiertes Lichtmikroskop beobachtet wurden. Die immunhistochemische Färbung von CD 68 in der Lunge zeigte die dynamische Entwicklung von Silikosknoten von zwei bis 24 Wochen. Mit zunehmender Expositionszeit vergrößerte sich allmählich auch die Fläche der Knötchen, und die angrenzenden silikativen Knötchen verschmolzen zu größeren Knötchen.
Mehrere fibrotische Läsionen unterschiedlicher Größe bildeten sich in den Lungen von Ratten, die im Vergleich zu den Kontrollratten Kieselsäure ausgesetzt waren. Es wurden jedoch keine signifikanten Unterschiede in Niere, Leber und Milz zwischen den Ratten mit Silikose und der Kontrolle gefunden. Interessanterweise wurde jedoch Knochenschwund bei Ratten mit Silikose beobachtet.
Das Wichtigste in diesem Protokoll ist die Sicherstellung, dass die Kieselsäure gut gemahlen ist und die Konzentration konstant ist, bevor mit dem Verfahren begonnen wird.
