Hepatectomía extendida al 78% en un modelo quirúrgico de ratón

Resumen

El modelo murino de hepatectomía parcial 2/3 (66%) está bien descrito en la literatura, pero rara vez se han utilizado hepatectomías más extendidas que imitan el síndrome de tamaño pequeño después del trasplante hepático. Describimos un procedimiento de hepatectomía extendida del 78% en un modelo de ratón que resulta en aproximadamente un 50% de letalidad postoperatoria en ratones sanos.

Resumen

La hepatectomía parcial 2/3 en ratones se utiliza en la investigación para estudiar la capacidad regenerativa del hígado y explorar los resultados de la resección hepática en varios modelos de enfermedad. En la hepatectomía parcial clásica 2/3 en ratones, dos de los cinco lóbulos hepáticos, a saber, el lóbulo izquierdo y el mediano, que representan aproximadamente el 66% de la masa hepática, se resecan en bloque con una supervivencia postoperatoria esperada del 100%. Las hepatectomías parciales más agresivas son técnicamente más desafiantes y, por lo tanto, rara vez se han utilizado en ratones. Nuestro grupo ha desarrollado un modelo de ratón de una técnica de hepatectomía extendida en la que tres de los cinco lóbulos hepáticos, incluidos los lóbulos izquierdo, mediano y superior derecho, se resecan por separado para eliminar aproximadamente el 78% de la masa hepática total. Esta resección prolongada, en ratones sanos, deja un hígado remanente que no siempre puede mantener una regeneración adecuada y oportuna. La falta de regeneración finalmente resulta en una letalidad postoperatoria del 50% dentro de 1 semana debido a la insuficiencia hepática fulminante. Este procedimiento de hepatectomía extendida al 78% en ratones representa un modelo quirúrgico único para el estudio del síndrome de tamaño pequeño y la evaluación de estrategias terapéuticas para mejorar la regeneración hepática y los resultados en el contexto del trasplante de hígado o la resección hepática extendida para el cáncer.

Introducción

Los modelos de resección hepática quirúrgica en ratones y ratas, descritos por primera vez en 1931, son los modelos experimentales más comunes utilizados para estudiar las bases moleculares de la regeneración hepática. También podrían ser útiles en la investigación científica traslacional para probar y desarrollar estrategias para mejorar los resultados después de la resección hepática prolongada o el trasplante de injertos hepáticos subóptimos 1,2,3,4. Las hepatectomías parciales (HP) en ratones implican la extirpación de aproximadamente 2....

Protocolo

Los métodos descritos dentro de este protocolo de procedimiento han sido aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) en el Centro Médico Beth Israel Deaconess (BIDMC). Todos los experimentos se completaron de acuerdo y cumplimiento con las directrices de la IACUC y del centro de investigación animal del BIDMC.

1. Preparación preoperatoria en ratones

1. Afeita el abdomen del ratón desde la mitad del esternón hasta la región suprapúbica con una tijera.
2. Inducir anestesia general con isoflurano al 1-4% en oxígeno al 100%. Cuando esté anestesiado, coloque el ratón en decúbito supin....

Discusión

Para realizar con éxito una hepatectomía prolongada del 78% que causa una letalidad del 50% en ratones, es fundamental que cada lóbulo del hígado se reseque con precisión. Este nivel de competencia y precisión solo se puede lograr si el procedimiento se realiza repetidamente. La curva de entrenamiento varía entre los operadores, pero generalmente requiere de 3 a 6 meses de práctica. Una resección hepática en la que se extirpa menos del 78 % de la TLM daría lugar a tasas de supervivencia más altas, mientras qu.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
2 x 2 Gauze	Covidien	2146	Surgery: dissection
5-O Nylon Monofilament Suture	Oasis	50-118-0631	Surgery: Skin closure
5-O Silk Suture	Fine Science Tools	18020-50	Surgery: liver lobe ligation
5-O Vicryl Suture	Ethicon	NC9335902	Surgery: Abdominal wall closure
Addson Forceps	Braintree Scientific	FC028	Surgery: dissection
Alcohol Swabs (2)	BD	326895	Disinfectant
Buprenorphine Extended Release Formulation	Zoopharm	N/A	Analgesia
Cordless Trimmer	Braintree Scientific	CLP-9868-14	Shaving
Curved Forceps	Braintree Scientific	FC0038	Surgery: dissection
Hemostat	Braintree Scientific	FC79-1	Surgery: dissection
Isoflurane Inhalant Anesthetic	Patterson Veterinary	RXISO-250	General Anesthesia
Magnet Fixator (2-slot) (2)	Braintree Scientific	ACD-001	Surgery: to hold small retractors
Magnet Fixator (4-slot)	Braintree Scientific	ACD-002	Surgery: to hold small retractors
Microscissors	Braintree Scientific	SC-MI 151	Surgery: dissection
Operating tray	Braintree Scientific	ACD-0014	Surgery: for establishment of surgical field
Povidone Iodine 10% Swabstick (2)	Medline	MDS093901ZZ	Disinfectant
Scalpel (15-blade)	Aspen Surgical Products	371615	Surgery: dissection
Sharp Scissors (Curved)	Braintree Scientific	SC-T-406	Surgery: dissection
Sharp Scissors (Straight)	Braintree Scientific	SC-T-405	Surgery: dissection
Small Cotton-Tipped Applicators	Fisher Scientific	23-400-118	Surgery: dissection
Tissue Forceps (Straight x2)	Braintree Scientific	FC1001	Surgery: dissection
Warming Pad (18" x 26")	Stryker	TP 700	Warming
Warming Pad Pump	Stryker	TP 700	Warming
Wire Handle Retractor (2)	Braintree Scientific	ACD-005	Surgery: to facilitate exposure of peritoneal cavity
Xenotec Isoflurane Small Animal Anesthesia System	Braintree Scientific	EZ-108SA	General Anesthesia: Contains Isoflurane vaborizer & console, Induction chamber, Regulator/Hose, Facemask (M)