Para empezar, fije el capilar de vidrio de borosilicato a los clips acolchados de goma en el extractor de micropipetas vertical manual. Ajuste la temperatura de calor del extractor de micropipetas a 950 grados centígrados y realice la extracción previa para obtener un capilar de vidrio más delgado y blando. A continuación, ajuste la temperatura de calor a 790 grados centígrados y realice un tirón secundario para producir las micropipetas finales.
Con una amoladora de micropipetas, afile con cuidado la abertura de la punta hasta un diámetro exterior de 11 micrómetros. A continuación, coloque las micropipetas en una almohadilla de sujeción de esponja dentro de un frasco de vidrio. Incubar los huevos de gallina fertilizados hasta la etapa de desarrollo 18 en una incubadora mecedora humidificada a 37 grados centígrados.
Limpie bien el área de trabajo con etanol al 70%. Después del desarrollo, retire los huevos de la incubadora. Rocíe los huevos con etanol al 70% y déjelos secar al aire.
A continuación, coloca el huevo en un portahuevos con el extremo más grande hacia arriba. Con un par de pinzas dentadas afiladas, golpee con cuidado el extremo más grande de la cáscara de huevo para crear un orificio de dos centímetros de diámetro. Luego retire los fragmentos de la cáscara del huevo.
Coloque el óvulo en una platina de microscopio de disección y localice el embrión. A continuación, utiliza las finas pinzas de disección y las tijeras para cortar la membrana amniótica que cubre la parte superior del embrión. A continuación, coloca una placa de Petri de 60 milímetros sobre la abertura del huevo.
