Para empezar, coloque los portaobjetos con las secciones endometriales teñidas inmunohistoquímicamente en la gradilla de portaobjetos de un escáner panorámico de imágenes patológicas. A continuación, coloque el bastidor en el compartimento de escaneo de portaobjetos del instrumento para iniciar el escaneo. Una vez finalizado el escaneo, inicie el software de análisis de imágenes y cree una nueva carpeta.
Importe las imágenes que requieren análisis. Para crear un clasificador de tejidos, marque varios tejidos junto con una anotación en blanco para establecer un clasificador que identifique el tejido y las áreas en blanco. Utilice el ajuste en tiempo real para observar la capacidad de reconocimiento del software durante la anotación de la marca.
Para crear un algoritmo de análisis, seleccione el algoritmo IHC multiplexado estándar en el software y elija los píxeles negativos y positivos para establecer los parámetros de color del reconocimiento celular. Establecer los parámetros del núcleo, el citoplasma y la membrana celular hasta encontrar los parámetros óptimos para la imagen. Ahora, establezca el umbral de reconocimiento de celdas positivo y optimícelo hasta que se obtenga un umbral adecuado.
A continuación, seleccione el clasificador de tejidos en el algoritmo. Revise la parte del tejido dentro de ella para identificar las células en función de los tejidos. Seleccione el área de análisis y, a continuación, utilice el algoritmo establecido para analizar las imágenes.
Una vez finalizado el análisis, compruebe manualmente la precisión del reconocimiento de tejidos, el reconocimiento negativo y positivo. Si el reconocimiento de imágenes es inexacto, vuelva a ajustar el algoritmo y los umbrales de parámetros. Ejecute el análisis de la imagen hasta que se realice correctamente.
A continuación, exporte los resultados del análisis. Establecer los diferentes parámetros de análisis en función de la expresión de los diferentes marcadores inmunitarios endometriales. Utilice el software para calcular la proporción de células inmunitarias endometriales.
Después del cálculo, utilice los valores para evaluar los niveles de varias células inmunitarias en el endometrio de pacientes con aborto espontáneo recurrente. Diferentes células inmunitarias se tiñeron inmunohistoquímicamente en función de su expresión individual de diferentes marcadores. La mancha marrón representa las células inmunitarias positivas y la azul representa el núcleo.
Se expresaron diferentes células inmunitarias en mujeres con abortos espontáneos recurrentes. Las células CD56 parecen ser predominantes con un 16,76%, mientras que las células CD1a y Foxp3 constituyen entre el 0,11 y el 0,12% de la población de células inmunitarias.
