El lisado de PRP es un producto emergente a base de plaquetas para el tratamiento de enfermedades de la superficie ocular. Aquí queremos compartir y detallar nuestro protocolo de producción para cubrir el desarrollo de pautas metodológicas comunes. Los productos génicos Halo se han estado difundiendo como una alternativa a los tratamientos autólogos.
Ya que garantizan mayores estándares de eficacia. El lisado de PRP contiene una alta concentración de factores de crecimiento. Su producción es barata y simple y se puede almacenar durante un largo período de tiempo.
El uso de productos sanguíneos para el tratamiento de enfermedades oculares o faciales está ampliamente documentado en la literatura. Sin embargo, sus aplicaciones aún no han encontrado un consenso. Una de las razones es la variabilidad de los métodos utilizados para su producción.
Nuestro objetivo es compartir nuestro protocolo para desarrollar metodologías comunes. Para comenzar, realice un recuento de plaquetas con un hemocistómetro utilizando la muestra recolectada de la bolsa principal a través de un pico perforante. Diluir el plasma rico en plaquetas con una cantidad adecuada de cloruro de sodio estéril al 0,9%.
Divida el plasma rico en plaquetas diluido en bolsas de recolección vacías de 300 mililitros para alcanzar un volumen neto de 190 mililitros por bolsa. Utilizar una alícuota de plasma rico en plaquetas diluido residual para realizar controles de calidad, evaluando la posible contaminación microbiana. Preparar un ensayo de esterilidad siguiendo las instrucciones del fabricante para ser probado en un laboratorio de microbiología.
Guarde las bolsas de plasma ricas en plaquetas diluidas a menos 80 grados centígrados durante un máximo de dos meses antes de descongelarlas. Asegúrese de que un baño caliente esté configurado a 37 grados centígrados. Coloque las bolsas de plasma ricas en plaquetas en el baño tibio y espere hasta que se descongelen por completo.
Centrifugar las bolsas de plasma ricas en plaquetas a 3000 veces G durante 30 minutos a temperatura ambiente. Aprovechando la punta perforante de la bolsa de transferencia, conecte la bolsa centrifugada con una bolsa de transferencia estéril vacía de 300 mililitros. Transfiera cuidadosamente el sobrenadante de lisado PRP mientras evita residuos en la nueva bolsa.
Selle el tubo de conexión de la unidad de lisado PRP con un sellador de bolsas. Recoja de 30 a 60 mililitros de lisado de PRP con una jeringa estéril y conecte la jeringa a la conexión Luer Lock en la línea de llenado. De acuerdo con las instrucciones del fabricante, gire la llave de paso a la mitad de una vuelta para abrir la línea entre la jeringa que contiene PRP Lysate y la jeringa preconectada.
Llene la jeringa preconectada con PRP Lysate. Desconecte la jeringa de PRP Lysate. Cierre la tapa del tubo de la conexión Luer Lock y gire la llave de paso a la posición original.
Utilice la jeringa del kit de gotas para los ojos para llenar los viales con lisado de PRP. Asegúrese de que cada aplicador esté debidamente lleno. Luego séllelos individualmente con un sellador de bolsas.
Repita el procedimiento con un nuevo kit de gotas para los ojos. Utilice una pequeña alícuota de lisado de PRP diluido residual para evaluar la posible contaminación microbiana. Etiquete adecuadamente cada aplicador y póngalos en una bolsa de plástico.
Etiquete también la bolsa de plástico. Tener cuidado de resaltar el grupo sanguíneo del donante. Almacenar a menos 80 grados centígrados durante un máximo de 24 meses antes de la asignación del paciente, de acuerdo con la Ley y Directrices italianas.
Una evaluación cuantitativa del factor de crecimiento epidérmico, el factor de crecimiento derivado de plaquetas y la isoforma beta del factor de crecimiento transformante en el lisado de PRP de dos donantes diferentes muestra que los resultados de 0,3 veces 10 a la novena dilución de plaquetas por mililitro resultaron ser más similares a la composición de la lágrima. Después de una terapia de seis meses con PRP lisado, las puntuaciones del índice de enfermedad de la superficie ocular disminuyeron de 56 más menos 21 a 45 más menos 21. Indica una mejoría en la calidad de vida del paciente.
Las diferencias metodológicas entre los diferentes métodos de preparación del lisado alogénico de PRP no demostraron ser perjudiciales para la capacidad regenerativa del lisado de PRP probado en los otros tejidos. La dilución del plasma con cloruro de sodio y el almacenamiento de plasma rico en plaquetas deben realizarse con cuidado. Como esto podría alterar la composición del Lisado PRP.
El análisis comparativo es necesario para investigar las variaciones en estos pasos.
