PRP Lysat ist ein neues plättchenbasiertes Produkt zur Behandlung von Augenoberflächenerkrankungen. Hier möchten wir unser Produktionsprotokoll teilen und detailliert beschreiben, um die Entwicklung gemeinsamer methodischer Richtlinien abzudecken. Halo-Genprodukte haben sich als Alternative zu autologen Behandlungen verbreitet.
Da sie höhere Wirksamkeitsstandards garantieren. PRP-Lysat enthält eine hohe Konzentration an Wachstumsfaktoren. Seine Herstellung ist kostengünstig und einfach und es kann für eine lange Zeit gelagert werden.
Die Verwendung von Blutprodukten zur Behandlung von Augen- oder Gesichtserkrankungen ist in der Literatur weitgehend dokumentiert. Dennoch haben ihre Anträge immer noch keinen Konsens gefunden. Einer der Gründe ist die Variabilität der Methoden, die für ihre Herstellung verwendet werden.
Unser Ziel ist es, unser Protokoll zu teilen, um gemeinsame Methoden zu entwickeln. Führen Sie zunächst eine Thrombozytenzahl mit einem Hämozystometer durch, wobei die Probe aus dem Hauptbeutel durch einen Piercing-Spike entnommen wird. Verdünnen Sie plättchenreiches Plasma mit einer ausreichenden Menge sterilem Natriumchlorid von 0,9%.
Das verdünnte plättchenreiche Plasma wird in 300 Milliliter leere Auffangbeutel aufgeteilt, um ein Nettovolumen von 190 Milliliter pro Beutel zu erreichen. Verwenden Sie ein Aliquot von verdünntem verdünntem plättchenreichem Plasma, um Qualitätskontrollen durchzuführen und eine mögliche mikrobielle Kontamination zu bewerten. Bereiten Sie einen Sterilitätstest nach den Anweisungen des Herstellers vor, der in einem mikrobiologischen Labor getestet werden soll.
Lagern Sie verdünnte plättchenreiche Plasmabeutel maximal zwei Monate bei minus 80 Grad Celsius, bevor sie auftauen. Stellen Sie sicher, dass ein warmes Bad auf 37 Grad Celsius eingestellt ist. Legen Sie die plättchenreichen Plasmabeutel in das warme Bad und warten Sie, bis sie vollständig aufgetaut sind.
Zentrifugieren Sie die plättchenreichen Plasmabeutel bei 3000 mal G für 30 Minuten bei Raumtemperatur. Verbinden Sie den zentrifugierten Beutel unter Ausnutzung des Piercing-Spikes des Transferbeutels mit einem leeren sterilen 300-Milliliter-Transferbeutel. Übertragen Sie den PRP Lysat-Überstand vorsichtig und vermeiden Sie Schmutz in den neuen Beutel.
Verschließen Sie das Anschlussrohr der PRP Lysate Einheit mit einem Beutelverschließer. Sammeln Sie 30 bis 60 Milliliter PRP-Lysat mit einer sterilen Spritze und verbinden Sie die Spritze mit dem Luer-Lock-Anschluss an der Abfülllinie. Drehen Sie den Absperrhahn gemäß den Anweisungen des Herstellers um eine halbe Umdrehung, um die Leitung zwischen der PRP-Lysat-haltigen Spritze und der vorangeschlossenen Spritze zu öffnen.
Füllen Sie die vorkonfektionierte Spritze mit PRP-Lysat. Trennen Sie die PRP Lysate Spritze. Schließen Sie die Schlauchkappe des Luer Lock Anschlusses und drehen Sie den Absperrhahn in die ursprüngliche Position.
Verwenden Sie die Augentropfen-Kit-Spritze, um die Durchstechflaschen mit PRP-Lysat zu füllen. Stellen Sie sicher, dass jeder Applikator ordnungsgemäß gefüllt ist. Anschließend verschließen Sie sie einzeln mit einem Beutelverschließer.
Wiederholen Sie den Vorgang mit einem neuen Augentropfen-Kit. Verwenden Sie ein kleines Aliquot an verdünntem verdünntem PRP-Restlysat, um eine mögliche mikrobielle Kontamination zu beurteilen. Beschriften Sie jeden Applikator richtig und legen Sie ihn in einen Plastikbeutel.
Beschriften Sie auch die Plastiktüte. Achten Sie darauf, die Blutgruppe des Spenders hervorzuheben. Lagerung bei minus 80 Grad Celsius für maximal 24 Monate vor der Patientenzuweisung gemäß dem italienischen Gesetz und den Richtlinien.
Eine quantitative Bewertung des epidermalen Wachstumsfaktors, des thrombozytenabgeleiteten Wachstumsfaktors und der transformierenden Wachstumsfaktor-Beta-Isoform in PRP-Lysat von zwei verschiedenen Donatoren zeigt, dass die Ergebnisse der 0,3 mal 10 bis neunten Thrombozyten pro Milliliter Verdünnung der Tränenzusammensetzung am ähnlichsten waren. Nach einer sechsmonatigen Therapie mit PRP Lysat sank der Index der Augenoberflächenerkrankung von 56 plus minus 21 auf 45 plus minus 21. Hinweis auf eine Verbesserung der Lebensqualität des Patienten.
Die methodischen Unterschiede zwischen verschiedenen Methoden zur Herstellung des allogenen PRP-Lysats erwiesen sich nicht als nachteilig für die Regenerationsfähigkeit des an den anderen Geweben getesteten PRP-Lysats. Die Verdünnung des Plasmas mit Natriumchlorid und die Lagerung von plättchenreichem Plasma muss mit Vorsicht durchgeführt werden. Da dies die Zusammensetzung des PRP-Lysats verändern könnte.
Vergleichende Analysen sind notwendig, um Variationen in diesen Schritten zu untersuchen.
