PRP Lysat est un produit émergent à base de plaquettes pour le traitement des maladies de la surface oculaire. Ici, nous voulons partager et détailler notre protocole de production pour couvrir le développement de directives méthodologiques communes. Les produits halogéniques se sont diffusés comme alternative aux traitements autologues.
Puisqu’ils garantissent des normes d’efficacité plus élevées. Le lysat PRP contient une forte concentration de facteurs de croissance. Sa production est peu coûteuse et simple et il peut être stocké pendant une longue période de temps.
L’utilisation de produits sanguins pour le traitement des maladies des yeux ou du visage est largement documentée dans la littérature. Néanmoins, leurs demandes n’ont toujours pas trouvé de consensus. L’une des raisons est la variabilité des méthodes utilisées pour leur production.
Notre objectif est de partager notre protocole afin de développer des méthodologies communes. Pour commencer, effectuez une numération plaquettaire avec un cystomètre hémologique en utilisant l’échantillon prélevé dans le sac principal à travers une pointe perçante. Diluer le plasma riche en plaquettes avec une quantité adéquate de chlorure de sodium stérile à 0,9%.
Divisez le plasma riche en plaquettes diluées en sacs de collecte vides de 300 millilitres pour atteindre un volume net de 190 millilitres par sac. Utiliser une partie aliquote de plasma résiduel dilué riche en plaquettes pour effectuer des contrôles de qualité et évaluer la contamination microbienne possible. Préparer un essai de stérilité en suivant les instructions du fabricant à tester dans un laboratoire de microbiologie.
Conservez les poches de plasma riche en plaquettes diluées à moins 80 degrés Celsius pendant un maximum de deux mois avant la décongélation. Assurez-vous qu’un bain chaud est réglé à 37 degrés Celsius. Mettez les poches de plasma riches en plaquettes dans le bain chaud et attendez jusqu’à ce qu’elles soient complètement décongelées.
Centrifuger les poches de plasma riches en plaquettes à 3000 fois G pendant 30 minutes à température ambiante. En exploitant la pointe perforante du sac de transfert, connectez le sac centrifugé avec un sac de transfert stérile vide de 300 millilitres. Transférez soigneusement le surnageant PRP Lysat tout en évitant les débris dans le nouveau sac.
Scellez le tube de connexion de l’unité PRP Lysat avec un scellant à sacs. Prélevez 30 à 60 millilitres de lysat PRP avec une seringue stérile et reliez la seringue à la connexion Luer Lock sur la ligne de remplissage. Selon les instructions du fabricant, tournez le robinet d’arrêt d’un demi-tour pour ouvrir la ligne entre la seringue contenant le lysat PRP et la seringue préconnectée.
Remplissez la seringue préconnectée avec du lysat PRP. Débranchez la seringue PRP Lysate. Fermez le capuchon du tube de la connexion Luer Lock et faites pivoter le robinet d’arrêt dans sa position d’origine.
Utilisez la seringue du kit de collyre pour remplir les flacons de lysat PRP. Assurez-vous que chaque applicateur est correctement rempli. Ensuite, scellez-les individuellement avec un scellant à sac.
Répétez la procédure avec un nouveau kit de gouttes ophtalmiques. Utiliser une petite partie aliquote de lysat de PRP dilué résiduel pour évaluer la contamination microbienne possible. Étiquetez correctement chaque applicateur et mettez-les dans un sac en plastique.
Étiquetez également le sac en plastique. Prendre soin de mettre en évidence le groupe sanguin du donneur. Conserver à moins 80 degrés Celsius pendant un maximum de 24 mois avant l’affectation du patient, conformément à la loi et aux directives italiennes.
Une évaluation quantitative du facteur de croissance épidermique, du facteur de croissance dérivé des plaquettes et de l’isoforme bêta du facteur de croissance transformant dans le lysat PRP de deux donneurs différents montre que les résultats de 0,3 fois 10 à la neuvième dilution plaquettaire par millilitre se sont avérés très similaires à la composition des larmes. Après un traitement de six mois avec PRP Lysate, les scores de l’indice de maladie de la surface oculaire ont diminué de 56 plus moins 21 à 45 plus moins 21. Indiquant une amélioration de la qualité de vie du patient.
Les différences méthodologiques entre les différentes méthodes de préparation du lysat PRP allogénique ne se sont pas révélées préjudiciables à la capacité de régénération du lysat PRP testé sur les autres tissus. La dilution du plasma avec du chlorure de sodium et le stockage du plasma riche en plaquettes doivent être effectués avec soin. Comme cela pourrait modifier la composition du lysat PRP.
Une analyse comparative est nécessaire pour étudier les variations de ces étapes.
