PRP Lysate è un prodotto emergente a base piastrinica per il trattamento delle malattie della superficie oculare. Qui vogliamo condividere e dettagliare il nostro protocollo di produzione per coprire lo sviluppo di linee guida metodologiche comuni. I prodotti Halo genic si sono diffusi come alternativa ai trattamenti autologhi.
Poiché garantiscono standard di efficacia più elevati. PRP Lysate contiene un'alta concentrazione di fattori di crescita. La sua produzione è economica e semplice e può essere conservata per un lungo periodo di tempo.
L'uso di prodotti sanguigni per il trattamento di malattie degli occhi o del viso è ampiamente documentato in letteratura. Tuttavia, le loro applicazioni non hanno ancora trovato un consenso. Uno dei motivi è la variabilità dei metodi utilizzati per la loro produzione.
Il nostro obiettivo è condividere il nostro protocollo al fine di sviluppare metodologie comuni. Per iniziare, eseguire un conteggio piastrinico con un emocistometro utilizzando il campione raccolto dalla sacca principale attraverso un picco perforante. Plasma ricco di piastrine diluito con una quantità adeguata di cloruro di sodio sterile allo 0,9%.
Dividere il plasma ricco di piastrine diluito in sacchetti di raccolta vuoti da 300 millilitri per raggiungere un volume netto di 190 millilitri per sacchetto. Utilizzare un'aliquota di plasma residuo ricco di piastrine diluite per eseguire controlli di qualità, valutando la possibile contaminazione microbica. Preparare un test di sterilità seguendo le istruzioni del produttore da testare in un laboratorio di microbiologia.
Conservare sacche di plasma diluite ricche di piastrine a meno 80 gradi Celsius per un massimo di due mesi prima dello scongelamento. Assicurarsi che un bagno caldo sia impostato a 37 gradi Celsius. Metti le sacche di plasma ricche di piastrine nel bagno caldo e attendi fino a quando non si scongelano completamente.
Centrifugare le sacche di plasma ricche di piastrine a 3000 volte G per 30 minuti a temperatura ambiente. Sfruttando la punta perforante della sacca di trasferimento, collegare la sacca centrifugata con una sacca di trasferimento sterile vuota da 300 millilitri. Trasferire con cautela il surnatante PRP Lysate evitando detriti nella nuova borsa.
Sigillare il tubo di collegamento dell'unità PRP Lysate con un sigillante per sacchetti. Raccogliere da 30 a 60 millilitri di PRP Lysate con una siringa sterile e collegare la siringa alla connessione Luer Lock sulla linea di riempimento. Secondo le istruzioni del produttore, ruotare il rubinetto di mezzo giro per aprire la linea tra la siringa contenente PRP Lysate e la siringa precollegata.
Riempire la siringa precollegata con PRP Lysate. Scollegare la siringa di PRP Lysate. Chiudere il tappo del tubo della connessione Luer Lock e ruotare il rubinetto di arresto nella posizione originale.
Utilizzare la siringa del kit collirio per riempire i flaconcini con PRP Lysate. Assicurarsi che ogni applicatore sia riempito correttamente. Quindi sigillarli individualmente con un sigillatore per sacchetti.
Ripetere la procedura con un nuovo kit di collirio. Utilizzare una piccola aliquota di PRP lisato diluito residuo per valutare la possibile contaminazione microbica. Etichettare correttamente ogni applicatore e metterli in un sacchetto di plastica.
Etichetta anche il sacchetto di plastica. Avendo cura di evidenziare il gruppo sanguigno del donatore. Conservare a meno 80 gradi Celsius per un massimo di 24 mesi prima dell'assegnazione del paziente, secondo la legge e le linee guida italiane.
Una valutazione quantitativa del fattore di crescita epidermico, del fattore di crescita derivato dalle piastrine e dell'isoforma Beta del fattore di crescita trasformante nel lisato di PRP da due diversi donatori mostra che i risultati di 0,3 volte 10 alla nona piastrina per millilitro di diluizione si sono rivelati più simili alla composizione lacrimale. Dopo una terapia di sei mesi con PRP Lysate i punteggi dell'indice di malattia della superficie oculare sono diminuiti da 56 più meno 21 a 45 più meno 21. Indicare un miglioramento della qualità della vita del paziente.
Le differenze metodologiche tra i diversi metodi di preparazione del PRP Lisato allogenico non si sono rivelate dannose per la capacità rigenerativa del PRP Lisato testato sugli altri tessuti. La diluizione del plasma con cloruro di sodio e la conservazione del plasma ricco di piastrine devono essere eseguite con cura. Poiché ciò potrebbe alterare la composizione del PRP Lysate.
L'analisi comparativa è necessaria per indagare le variazioni in queste fasi.
