PRP Lysate é um produto emergente à base de plaquetas para o tratamento de doenças da superfície ocular. Aqui queremos compartilhar e detalhar nosso protocolo de produção para cobrir o desenvolvimento de diretrizes metodológicas comuns. Os produtos halogênicos têm se difundido como uma alternativa aos tratamentos autólogos.
Uma vez que garantem padrões de eficácia mais elevados. PRP Lisado contém uma alta concentração de fatores de crescimento. Sua produção é barata e simples e pode ser armazenada por um longo período de tempo.
O uso de hemoderivados para o tratamento de doenças oculares ou faciais está amplamente documentado na literatura. No entanto, as suas candidaturas ainda não encontraram um consenso. Uma das razões é a variabilidade dos métodos utilizados para a sua produção.
Nosso objetivo é compartilhar nosso protocolo para desenvolver metodologias comuns. Para começar, realize uma contagem de plaquetas com um hemocistômetro usando a amostra coletada da bolsa principal através de um espigão perfurante. Diluir o plasma rico em plaquetas com uma quantidade adequada de cloreto de sódio estéril a 0,9%.
Divida o plasma diluído rico em plaquetas em sacos coletores vazios de 300 mililitros para atingir um volume líquido de 190 mililitros por saco. Use uma alíquota de plasma residual diluído rico em plaquetas para realizar controles de qualidade, avaliando possível contaminação microbiana. Prepare um ensaio de esterilidade seguindo as instruções do fabricante para ser testado em um laboratório de microbiologia.
Armazenar sacos de plasma diluídos ricos em plaquetas a menos 80 graus Celsius por um período máximo de dois meses antes do descongelamento. Certifique-se de que um banho quente é definido a 37 graus Celsius. Coloque os sacos de plasma ricos em plaquetas no banho quente e espere até descongelar completamente.
Centrifugar os sacos de plasma ricos em plaquetas a 3000 vezes G durante 30 minutos à temperatura ambiente. Explorando o pico perfurante do saco de transferência, conecte o saco centrifugado com um saco de transferência estéril de 300 mililitros vazio. Transfira cuidadosamente o sobrenadante PRP Lysate, evitando detritos para o novo saco.
Sele o tubo de conexão da unidade PRP Lysate com um selador de saco. Recolha 30 a 60 mililitros de lisado PRP com uma seringa estéril e ligue a seringa à ligação Luer Lock na linha de enchimento. De acordo com as instruções do fabricante, gire a torneira pela metade de uma volta para abrir a linha entre a seringa contendo lisado PRP e a seringa pré-conectada.
Encha a seringa pré-ligada com PRP Lysate. Desligue a seringa PRP Lysate. Feche a tampa do tubo da conexão Luer Lock e gire a torneira para a posição original.
Utilize a seringa do kit de colírios para encher os frascos para injetáveis com PRP Lysate. Certifique-se de que cada aplicador está devidamente preenchido. Em seguida, selá-los individualmente com um selador de sacos.
Repita o procedimento com um novo kit de colírios. Use uma pequena alíquota de lisado de PRP diluído residual para avaliar a possível contaminação microbiana. Rotule corretamente cada aplicador e coloque-os em um saco plástico.
Rotule o saco plástico também. Tomando o cuidado de destacar o grupo sanguíneo do doador. Armazenar a menos 80 graus Celsius por um máximo de 24 meses antes da designação do paciente, de acordo com a Lei e Diretrizes italianas.
Uma avaliação quantitativa do fator de crescimento epidérmico, do fator de crescimento derivado de plaquetas e da isoforma Beta do fator de crescimento transformador no lisado PRP de dois doadores diferentes mostra que os resultados de 0,3 vezes 10 a nona plaquetas por mililitro de diluição revelaram-se mais semelhantes à composição da lágrima. Após uma terapia de seis meses com PRP Lisado escores de doença de superfície ocular diminuiu de 56 mais menos 21 para 45 mais menos 21. Indicando melhora na qualidade de vida do paciente.
As diferenças metodológicas entre os diferentes métodos de preparação do lisado alogênico de PRP não se mostraram prejudiciais à capacidade regenerativa do lisado de PRP testado nos demais tecidos. A diluição do plasma com cloreto de sódio e o armazenamento de plasma rico em plaquetas precisam ser realizados com cuidado. Como isso pode alterar a composição do PRP Lisado.
A análise comparativa é necessária para investigar as variações nessas etapas.
