Este protocolo proporciona un modelo de extracción molar mandibular murina que rara vez se introduce en los estudios de regeneración ósea disponibles. Es necesario desarrollar un modelo murino de extracción molar mandibular como una mandíbula que sea más comparable y consistente entre los diferentes grupos de intervención. Las implicaciones de esta técnica no se extienden hacia la terapia de ninguna enfermedad.
Sin embargo, puede ayudar a la curación clínica y la regeneración del hueso de la mandíbula a largo plazo al ayudar a revisar los mecanismos subyacentes a este proceso. Esta técnica fue desarrollada para ayudar a los estudios, revelando los mecanismos de curación y regeneración disponibles. Lamentablemente, este método no se puede aplicar a otros sistemas.
Comience a eliminar la resistencia distal del ratón anestesiado sujetando el molar con pinzas medialmente. Luego fuerce una aguja de calibre 23 en el hueso alveolar bucal de la raíz distal y produzca un intervalo. A continuación, cambie a una aguja de calibre 25 para continuar la expansión del intervalo.
Progrese delicadamente hacia el área periapical mientras gira lentamente la aguja hacia adelante y lánguidamente para presionar la raíz fuera de la fosa alveolar. Para eliminar la resistencia mesial, inserte una aguja de calibre 23 en la horquilla de la raíz y levante el molar de oclusalmente. Después de sostener el molar con fuerza, tome otra aguja de calibre 23 y fuércela a entrar en la membrana periodontal mesial lingual para crear un intervalo.
Luego use una aguja de calibre 25 y gire lentamente hacia adelante y bucalmente. Si algunos obstáculos subyacentes impiden la luxación del molar, use una aguja de calibre 26 para penetrar el ápice de la raíz y repita las operaciones. Durante la extracción final, extraer el diente asegurándose de que la corona se eleva por encima del plano oclusal y que se pueden ver claramente dos raíces intactas.
Después de extraer con éxito el primer molar mandibular, aplique algodón seco para detener el sangrado, reposicione la lengua, administre analgesia y coloque al ratón en una almohadilla térmica de temperatura constante hasta que se recupere de la anestesia. El alvéolo dental se llenó inmediatamente con coágulo después de la extracción. El proceso de curación de la cavidad se observó durante una semana.
Se formaron algunos huesos trabeculares similares a esponjas, pero el coágulo permaneció. En el proceso de curación, la cavidad se llenó con huesos de esponja después de dos semanas, lo que indica la finalización de la regeneración. Un regulador maestro en diferenciaciones de osteoblastos Sp7 se expresó ampliamente en las células de la médula ósea en el margen que es el frente que forma el hueso.
Bajo el estado de homeostasis, los huesos trabeculares eran consistentes y confluentes con bloques de células de médula ósea salpicados como islas. Una semana después de la cirugía, numerosas células que expresan Sp7 llenaron el alvéolo de extracción con hueso trabecular recién formado rociado alrededor. A las cuatro semanas después de la cirugía, la condición se revirtió y se fusionó en gran medida con el hueso trabecular.
La actividad de las células que expresan Sp7 disminuyó a un nivel cercano al estado de homeostasis. También se puede realizar para demostrar el proceso de regeneración del recién nacido. Esta técnica puede ayudar a los investigadores a desentrañar los mecanismos subyacentes del proceso de curación y regeneración disponible al proporcionar un nuevo modelo murino.
