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Fabricación y encapsulación de esferoides tumorales en hidrogeles de polietilenglicol para el estudio de las interacciones esferoide-matriz

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Nuestro laboratorio se centra en el diseño de modelos de hidrogel in vitro para la encapsulación de esteroides de glioblastoma para imitar el microambiente extracelular del tumor. Con estos modelos se investigan las propiedades efectivas del sustrato, las propiedades mecánicas y bioquímicas sobre la viabilidad de las células esteroideas, la circularidad, la talla y la diseminación. Los desafíos experimentales actuales en el desarrollo de módulos tumorales giran en torno al deseo de complejidad para imitar todos los aspectos del microambiente tumoral para su relevancia fisiológica, y también un deseo de simplicidad para hacer que el modelo sea accesible, robusto, de bajo costo y fácil de usar, y compatible con los enfoques de detección múltiple.

Presentamos un protocolo que permite la fabricación rápida, robusta y de bajo costo de esteroides tumorales y su encapsulación en hidrogeles hechos para imitar el microambiente tumoral. El modelo no requiere ningún equipo especializado. Será particularmente útil para explorar las interacciones de la matriz de esteroides en la construcción de modelos de fisiología o patología de tejidos in vitro.

Comprender las interacciones entre las células cancerosas del glioblastoma y su microambiente puede alentar el desarrollo de nuevas terapias para tratar mejor este cáncer. Además, el desarrollo de un modelo in vitro para el cáncer de glioblastoma puede mejorar el desarrollo de este modelo para otras enfermedades oncológicas.

Aquí, presentamos un protocolo que permite la fabricación rápida, robusta y barata de esferoides tumorales seguida de encapsulación de hidrogel. Es ampliamente aplicable ya que no requiere equipo especializado. Sería particularmente útil para explorar las interacciones esferoides-matrices y construir modelos de fisiología tisular o patología in vitro .

Capítulos en este video

0:00

Introduction

1:21

Fabrication of Square Pyramidal Microwells for Tumor Spheroid Fabrication

3:42

Multicellular Tumor Spheroid Formation, Harvest, and Encapsulation in Hydrogels

7:08

Immunofluorescence Fixation, Staining, and Clearing of Encapsulated Spheroidsfor Confocal Microscopy

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