Étude de modèles expérimentaux de don d’organes pour la transplantation pulmonaire

Résumé

La présente étude montre la mise en place de trois modèles différents de don pulmonaire (don post-mort cérébrale, don post-mort circulatoire et don post-choc hémorragique). Il compare les processus inflammatoires et les troubles pathologiques associés à ces événements.

Résumé

Les modèles expérimentaux sont des outils importants pour comprendre les phénomènes étiologiques impliqués dans divers événements physiopathologiques. Dans ce contexte, différents modèles animaux sont utilisés pour étudier les éléments déclenchant la physiopathologie du dysfonctionnement primaire du greffon après transplantation afin d’évaluer les traitements potentiels. À l’heure actuelle, nous pouvons diviser les modèles expérimentaux de don en deux grands groupes : le don après mort cérébrale et le don après arrêt circulatoire. De plus, les effets délétères associés au choc hémorragique doivent être pris en compte lors de l’examen des modèles animaux de don d’organes. Nous décrivons ici la mise en place de trois modèles de don pulmonaire différents (don post-mort cérébrale, don post-mort circulatoire et don post-choc hémorragique) et comparons les processus inflammatoires et les troubles pathologiques associés à ces événements. L’objectif est de fournir à la communauté scientifique des modèles animaux fiables de don de poumons pour étudier les mécanismes pathologiques associés et rechercher de nouvelles cibles thérapeutiques afin d’optimiser le nombre de greffons viables pour la transplantation.

Introduction

Pertinence clinique
La transplantation d’organes est une option thérapeutique bien établie pour plusieurs pathologies graves. Au cours des dernières années, de nombreuses avancées ont été réalisées dans les domaines cliniques et expérimentaux de la transplantation d’organes, telles qu’une meilleure connaissance de la physiopathologie de la dysfonction primaire du greffon (DPI) et des avancées dans les domaines des soins intensifs, de l’immunologie et de la pharmacologie ^1,2,3. Malgré les réalisations et les améliorations de la qualité des procédur....

Protocole

L’expérimentation animale s’est conformée au Comité d’éthique pour l’utilisation et le soin des animaux de laboratoire de la Faculté de médecine de l’Université de São Paulo (numéro de protocole 112/16).

1. Regroupement d’animaux

1. Assigner au hasard douze rats Sprague Dawley mâles (250 à 300 g) à l’un des trois groupes expérimentaux (n = 4) afin d’analyser et de comparer les effets associés aux modèles animaux.
2. Assigner les animaux au groupe choc hémorragique (HS, n=4) : animaux soumis à un cathétérisme vasculaire avec induction d’un choc hémorragique + entretien pendant 360 min + extraction du b....

Résultats

Pression artérielle moyenne (MAP)
Pour déterminer les répercussions hémodynamiques de la BD et de l’HS, la MAP a été évaluée sur les 360 minutes du protocole. La mesure de base a été recueillie après l’ablation de la peau et le forage du crâne et avant le prélèvement d’aliquotes sanguines pour les animaux soumis à la BD ou à l’HS, respectivement. Avant l’induction de BD et d’HS, la MAP de base des deux groupes était similaire (BD : 110,5 ± 6,1 vs HS : 105,8 ± 2,3 mmHg ; .......

Discussion

Ces dernières années, le nombre croissant de diagnostics de mort cérébrale l’a conduit à devenir le plus grand fournisseur d’organes et de tissus destinés à la transplantation. Cette croissance s’est toutefois accompagnée d’une augmentation incroyable des dons après la mort circulatoire. Malgré sa nature multifactorielle, la plupart des mécanismes déclencheurs des causes de décès commencent après ou accompagnent un traumatisme avec une perte importante de la teneur en sang <.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
14-gauge angiocath	DB	38186714	Orotracheal intubation
2.0-silk	Brasuture	AA553	Tracheal tube fixation
24-gauge angiocath	DB	38181214	Arterial and venous access
4.0-silk	Brasuture	AA551	Fixation of arterial and venous cannulas
Alcoholic chlorhexidine digluconate solution (2%).	Vic Pharma	Y/N	Asepsis
Trichotomy apparatus	Oster	Y/N	Clipping device
Precision balance	Shimadzu	D314800051	Analysis of the wet/dry weight ratio
Barbiturate (Thiopental)	Cristália	18080003	DC induction
Balloon catheter (Fogarty-4F)	Edwards Life Since	120804	BD induction
Neonatal extender	Embramed	497267	Used as catheters with the aid of the 24 G angiocath
FlexiVent	Scireq	1142254	Analysis of ventilatory parameters
Heparin	Blau Farmaceutica SA	7000982-06	Anticoagulant
Isoflurane	Cristália	10,29,80,130	Inhalation anesthesia
Micropipette (1000 µL)	Eppendorf	347765Z	Handling of small- volume liquids
Micropipette (20 µL)	Eppendorf	H19385F	Handling of small- volume liquids
Microscope	Zeiss	1601004545	Assistance in the visualization of structures for the surgical procedure
Multiparameter monitor	Dixtal	101503775	MAP registration
Motorized drill	Midetronic	MCA0439	Used to drill a 1 mm caliber borehole
Neubauer chamber	Kasvi	D15-BL	Cell count
Pediatric laryngoscope	Oxygel	Y/N	Assistance during tracheal intubation
Syringe (3 mL)	SR	3330N4	Hydration and exsanguination during HS protocol
Pressure transducer	Edwards Life Since	P23XL	MAP registration
Metallic tracheal tube	Biomedical	006316/12	Rigid cannula for analysis with the FlexiVent ventilator
Isoflurane vaporizer	Harvard Bioscience	1,02,698	Anesthesia system
Mechanical ventilator for small animals (683)	Harvard Apparatus	MA1 55-0000	Mechanical ventilation
xMap methodology	Millipore	RECYTMAG-65K-04	Analysis of inflammatory markers