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Dans cet article

  • Résumé
  • Résumé
  • Introduction
  • Protocole
  • Résultats Représentatifs
  • Discussion
  • Déclarations de divulgation
  • Remerciements
  • matériels
  • Références
  • Réimpressions et Autorisations

Résumé

Cet article présente un protocole qui permet une évaluation non invasive et automatisée des performances de motricité fine, ainsi qu’un apprentissage moteur adaptatif et associatif lors de défis, à l’aide d’un dispositif appelé Erasmus Ladder. La difficulté de la tâche peut être titrée pour détecter une déficience motrice allant de degrés majeurs à subtils.

Résumé

Le comportement est façonné par les actions, et les actions nécessitent des habiletés motrices telles que la force, la coordination et l’apprentissage. Aucun des comportements essentiels au maintien de la vie ne serait possible sans la capacité de passer d’une position à une autre. Malheureusement, la motricité peut être compromise dans un large éventail de maladies. Par conséquent, l’étude des mécanismes des fonctions motrices aux niveaux cellulaire, moléculaire et des circuits, ainsi que la compréhension des symptômes, des causes et de la progression des troubles moteurs, sont cruciales pour développer des traitements efficaces. Des modèles de souris sont fréquemment utilisés à cette fin.

Cet article décrit un protocole qui permet de surveiller divers aspects de la performance motrice et de l’apprentissage chez la souris à l’aide d’un outil automatisé appelé l’échelle Erasmus. L’essai comporte deux phases : une phase initiale où les souris sont entraînées à naviguer sur une échelle horizontale construite à partir d’échelons irréguliers (« apprentissage de la motricité fine »), et une deuxième phase où un obstacle est présenté sur le chemin de l’animal en mouvement. La perturbation peut être inattendue (« apprentissage moteur contesté ») ou précédée d’une tonalité auditive (« apprentissage moteur associatif »). La tâche est facile à effectuer et est entièrement prise en charge par un logiciel automatisé.

Ce rapport montre comment les différentes lectures du test, lorsqu’elles sont analysées avec des méthodes statistiques sensibles, permettent un suivi fin de la motricité des souris à l’aide d’une petite cohorte de souris. Nous proposons que la méthode soit très sensible pour évaluer les adaptations motrices induites par des modifications environnementales ainsi que les déficits moteurs subtils à un stade précoce chez des souris mutantes dont les fonctions motrices sont compromises.

Introduction

Divers tests ont été mis au point pour évaluer les phénotypes moteurs chez la souris. Chaque test donne des informations sur un aspect spécifique du comportement moteur1. Par exemple, le test en champ libre informe sur la locomotion générale et l’état d’anxiété ; les tests de Rotarod et de poutre de marche sur la coordination et l’équilibre ; L’analyse de l’empreinte est une question de démarche ; le tapis roulant ou la roue de course lors d’un exercice physique forcé ou volontaire ; Et la roue complexe concerne l’apprentissage de la motricité. Pour analyser les phénotypes moteurs de souris, les chercheurs doivent effectuer ces tests de manière....

Protocole

Dans la présente étude, des souris adultes (âgées de 2 à 3 mois) C57BL/6J des deux sexes ont été utilisées. Les animaux ont été logés de deux à cinq par cage avec un accès ad libitum à la nourriture et à l’eau dans une unité animale sous observation et maintenus dans un environnement à température contrôlée selon un cycle d’obscurité et de lumière de 12 h. Toutes les procédures ont été menées conformément aux réglementations européennes et espagnoles (2010/63/UE ; RD 53/2013) et ont été approuvés par le Comité d’éthique de la Generalitat Valenciana et le Comité du bien-être animal de l’Université Miguel Hernández.

1. Configur....

Résultats Représentatifs

Le dispositif Erasmus Ladder, la configuration et le protocole appliqué sont présentés à la figure 1. Le protocole se compose de quatre séances non perturbées et de quatre séances de provocation (42 essais chacune). Chaque essai est une course sur l’échelle entre les boîtes de but de départ et d’arrivée. Au début de la session, une souris est placée dans l’une des cases de départ. Après un temps réglé de 15 ± 5 s (état « repos »), la lumière s’allume (repère .......

Discussion

L’échelle Erasmus présente des avantages majeurs pour l’évaluation du phénotype moteur au-delà des approches actuelles. Les tests sont faciles à réaliser, automatisés, reproductibles et permettent aux chercheurs d’évaluer divers aspects du comportement moteur séparément à l’aide d’une seule cohorte de souris. Dans la présente étude, la reproductibilité a permis de générer des données robustes avec un petit nombre de souris WT tirant parti des caractéristiques du dispositif, de la conception e.......

Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.

Remerciements

Nous remercions la technicienne audiovisuelle et productrice vidéo Rebeca De las Heras Ponce ainsi que le vétérinaire en chef Gonzalo Moreno del Val, pour la supervision des bonnes pratiques lors de l’expérimentation sur les souris. Les travaux ont été financés par des subventions du programme d’excellence GVA (2022/8) et de l’Agence espagnole de la recherche (PID2022143237OB-I00) à Isabel Pérez-Otaño.

....

matériels

NameCompanyCatalog NumberComments
C57BL/6J mice (Mus musculus)Charles Rivers
Erasmus Ladder deviceNoldus, Wageningen, Netherlands
Erasmus Ladder 2.0 softwareNoldus, Wageningen, Netherlands
Excel softwareMicrosoft 
Sigmaplot softwareSystat Software, Inc.

Références

  1. Brooks, S. P., Dunnett, S. B. Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide. Nat. Rev. Neurosci. 10 (7), 519-529 (2009).
  2. . Available from: https://www.noldus.com/erasmusladder (2023)
  3. Cupido, A., et al. .

Réimpressions et Autorisations

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