Utilisation de l’imagerie de cellules vivantes pour mesurer les effets de protéines pathologiques sur le transport axonal dans les neurones primaires de l’hippocampe

Les neurones dépendent du transport bidirectionnel de la cargaison le long de l’axone pour maintenir la synapse fonctionnelle et la connectivité neuronale. On pense que les déficits de transport contribuent de manière critique à la pathogenèse de plusieurs maladies neurodégénératives. Notre objectif est d’identifier les mécanismes par lesquels les modifications de la protéine tau associées à la maladie perturbent le transport axonal.

Nous avons établi que plusieurs formes pathologiques de la protéine tau perturbent le transport axonal normal dans les neurones des mammifères. Cet effet dépend des modifications des voies de signalisation basées sur la phosphorylation qui régulent le transport axonal. Ces perturbations représentent un mécanisme potentiel de neurotoxicité induite par la protéine tau dans la maladie.

Les formes modifiées de protéines spécifiques peuvent perturber le transport axonal rapide normal dans plusieurs maladies neurodégénératives. Cependant, nous ne comprenons pas entièrement les mécanismes sous-jacents de ces effets. Il s’agit d’un protocole simple et reproductible permettant d’identifier comment l’expression des protéines associées à la maladie affecte le transport axonal rapide dans les neurones des mammifères.

Ce protocole fournit un test reproductible pour le transport axonal dans les neurones primaires de mammifères, qui est facilement modifiable pour inclure diverses protéines de transport ainsi que l’expression de protéines d’intérêt avec des modifications pathologiques spécifiques. Il permet également d’éliminer de manière ciblée d’autres composants de la voie pour tester des détails mécanistes particuliers.