Le quadruple damier est une technique qui étudie toutes les combinaisons possibles qui peuvent être obtenues en combinant quatre médicaments, et il est important de trouver un traitement pour les micro-organismes résistants, principalement les MDR ou également connus sous le nom de micro-organismes multirésistants. Cette technique n’exige pas beaucoup de main-d’œuvre et les résultats peuvent être obtenus le lendemain ou après la fin de la période d’incubation. En plus de cela, il peut étudier toutes les combinaisons possibles et pas seulement des combinaisons spécifiques et très limitées qui peuvent être obtenues en combinant ces quatre médicaments et tout, le tout en une seule expérience.
En plus de cela, cette technique peut être utilisée dans de multiples disciplines et pas seulement en microbiologie et même en microbiologie. Il peut étudier toutes les combinaisons possibles entre différents agents antimicrobiens et pas seulement des agents antibactériens. En plus de la partie microbiologie, il peut être utilisé afin d’étudier les combinaisons entre médicaments anticancéreux, entre extraits de plantes et médicaments, et même entre panels de traitements moléculaires efficaces.
Préparation placez 4 96, bien les assiettes les unes à côté des autres afin de former un carré à l’aide d’un ruban adhésif, collez leur fond ensemble. Répétez cette étape afin d’obtenir quatre panneaux contenant chacun quatre plaques et nommez-les un, A deux, A trois et quatre. Ajouter 50 microlitres Mueller.
Allusion et bouillon aux puits entre la colonne deux et la colonne 11 dans le 1696, les plaques de puits des quatre panneaux ajoutent 200 microlitres de bouillon Mueller Hinton au puits H 12 servant de contrôle négatif. Puits dans les 1696 plaques de puits des quatre panneaux ajouter un bouillon Mueller Hinton de 50 microlitres aux puits A un et H un servant de puits de contrôle positif dans les plaques de puits de 1696 des quatre panneaux médicament une dilution en série du céfotaxime dans un tube conique à 15 ml. Eau distillée stérile.
Calculer le volume à retirer de la solution mère du médicament en suivant la formule C un V un est égal à C deux V deux. Prélever le volume calculé de la bouteille d’eau distillée stérile de 15 ml et ajouter le même volume de la solution mère de médicament À la pipette tubulaire conique de 50 microlitres de la solution médicamenteuse préparée dans chaque puits de la colonne 11 et de la colonne 12, à l’exception du puits H 12, commencer la dilution en série en retirant 50 microlitres de la colonne 11 et en les plaçant dans les puits correspondants de la colonne 10, Et puis de 10 jusqu’à atteindre la colonne deux où les 50 microlitres prélevés sur la colonne deux seront jetés. Répéter la dilution en série pour chacune des 1696 plaques de puits des quatre panneaux.
Dilution en série du deuxième médicament amika dans un tube conique à 10 ml. Eau distillée stérile. Calculer le volume à retirer de la solution mère du médicament.
Retirez le volume calculé de l’eau distillée stérile de 10 ml et ajoutez le même volume de la solution mère du médicament dans le tube conique. Prenez une assiette séparée à 96 puits, ajoutez cent microlitres de bouillon stérile Mueller Hinton dans les puits entre la rose G et B.In cette plaque, ajoutez cent microlitres du médicament préalablement préparé. Deuxièmement, solution aux puits de la rangée G.Diluez en série de la rangée G à la rangée B en prélevant cent microlitres de chaque puits dans RO G.Et enfin en jetant les cent microlitres des puits de la rangée B.Répétez ces étapes afin de préparer huit plaques de 96 puits distinctes transfert du médicament deux dans les quatre panneaux pipette 50 microlitres de médicament deux des puits entre les rangées G et B dans le puits correspondants dans chaque plaque Dans les quatre panneaux, une plaque préparée de 96 puits contient cent microlitres de médicament deux.
C’est suffisant pour deux plaques dans un seul panel de médicament. Trois longes vivantes ajoutées à quatre tubes coniques différents à 14 ml d’eau distillée stérile. Calculer le volume à retirer de la solution mère du médicament.
Retirez le volume calculé des 14 ml d’eau distillée stérile de chaque tube et ajoutez le volume correspondant du médicament. Après avoir préparé les concentrations requises du troisième médicament, prenez 50 microlitres et ajoutez-les dans les puits correspondants entre les rangées B et G et les colonnes deux et 12 dans la plaque correspondante. Dans chaque panneau où C un correspond aux quatre P, une plaque et les quatre panneaux, C deux correspond aux quatre, P deux plaques et les quatre panneaux, C3 correspond aux quatre P, trois plaques et les quatre panneaux, et C quatre correspond aux quatre P, quatre plaques et les quatre panneaux de médicament quatre triméthoprime, sulfaméthoxazole, addition à un tube conique, ajouter 14 ml.
Efforcez-vous d’eau distillée. Calculer le volume à retirer de la solution mère du médicament. Prélever le volume calculé des 14 ml d’eau distillée stérile de chaque tube et ajouter le volume requis du médicament.
Après avoir préparé les concentrations requises du quatrième médicament, prenez 50 microlitres et ajoutez-les dans les puits correspondants entre les rangées B et G et les colonnes deux et 12. Dans les quatre plaques du panneau correspondant où C un correspond au panneau un, C deux correspond au panneau deux, C3 correspond au panneau trois et C quatre correspond au panneau quatre. La préparation et l’ajout de l’inoculum bactérien sont équivalents à I-E-S-B-L à l’aide d’un transfert en boucle stérile.
Une colonie de l’isolat bactérien équivaut à une culture préalable sur une plaque dans deux ml de bouillon Mueller Hinton stérile et vortex Vérifiez la turbidité là où elle devrait être de 0,5 McFarland à l’aide d’une densité ajouter un bouillon Mueller Hinton stérile TML à une tasse d’urine stérile ajouter l’inoculum bactérien de l’inoculum de McFarland 0,5 à la tasse d’urine en suivant la formule C un V un est égal à C deux V deux où V un équivaut à 800 microlitres pipette 50 microlitres de la solution d’inoculum et à chaque puits sauf H 12, qui est le contrôle de la stérilité, bien incuber les panneaux à 37 degrés Celsius pendant la nuit. Cette figure représente le panneau A. Les demeures de couleur sont les puits qui contiennent la croissance bactérienne, et les flèches noires représentent les puits sur la croissance.
Pas d’interface de croissance dans la première plaque, la deuxième et la troisième. Nous pouvons voir qu’il y a une inhibition dans la rangée D contenant une CMI sur huit d’Amikacine en plus de plusieurs CMI secondaires de céfotaxime et de lévofloxacine en plus d’une CMI sur huit de triméthoprime sulfaméthoxazole dans la planche quatre. Nous remarquons qu’aucune croissance bactérienne n’est observée dans le quadrant contenant la combinaison.
C’est parce que dans cette plaque, nous avons le MIC de lévofloxacine qui inhibera totalement la croissance. La figure un B représente le deuxième panneau. Dans ce panel, nous pouvons voir que l’inhibition de la croissance bactérienne est également observée dans DR, qui contient des sous-composants du céfotaxime et de la lévofloxacine en plus d’un sur huit CMI d’amikacine et d’un sur quatre CMI de triméthoprime sulfaméthoxazole figure un C représente le panneau A trois.
Dans cette figure, nous pouvons voir que l’inhibition de la croissance bactérienne est observée dans les rangées C et D contenant plusieurs sous-CMI de céfotaxime et de lévofloxacine, et l’ajout à la moitié de CMI de triméthoprime sulfaméthoxazole, et un sur quatre CMI d’Amikacine dans la rangée C et un sur deux CMI d’Amikacine dans la rangée D la figure 1D représente le panneau A quatre. Dans ce panel, nous avons une CMI de triméthoprime sulfaméthoxazole en combinaison avec plusieurs concentrations de céfotaxime, d’amikacine et de lévofloxacine. Sur cette figure, nous pouvons voir que la croissance bactérienne est totalement inhibée dans le quadrant contenant la combinaison où cette inhibition est l’effet de la CMI unique du triméthoprime sulfaméthoxazole dans la feuille FIC, le tout dans le fichier Excel.
Le tableau montrera le FIC sonore final, avec l’interprétation de la valeur obtenue. En conclusion, la technique du damier Q étudie toutes les combinaisons possibles entre quatre médicaments dans une seule expérience. Les résultats sont obtenus le lendemain et sont interprétés de manière simple et rapide à l’aide d’un modèle Excel.
