La diffusion dynamique de la lumière, ou DLS, est une méthode fondamentale pour évaluer la taille et la distribution des particules intactes. Cependant, l’analyse des nanoparticules de glucides de fer pose certains défis. Un avantage de DLS comprend une instrumentation largement disponible, une facilité à effectuer l’analyse et l’établissement de protocoles pour l’analyse des nanomatériaux.
L’un des objectifs du DLS est d’évaluer le profil de polydispersité des nanoparticules, ce qui pourrait finalement affecter l’interaction avec le milieu biologique. Pour la démonstration de la procédure, sera Cintia Batista Marques, doctorante de l’Université de Genève. Après avoir démarré la machine dans le logiciel de l’instrument, sélectionnez l’emplacement de stockage dans la fenêtre ouverte, nommez le fichier de mesure et confirmez les détails en cliquant sur enregistrer.
Sélectionnez la procédure opérationnelle normalisée requise dans la liste déroulante de l’interface de l’instrument. Si une POS plus ancienne est nécessaire, sélectionnez Rechercher les POS dans la liste et confirmez la sélection en cliquant sur la flèche verte. Pour commencer le processus de mesure, cliquez sur le bouton de démarrage vert en bas de l’écran de l’interface de l’instrument.
Ensuite, remplissez un millilitre de l’étalon de particules non diluées dans une cuvette en polystyrène et fermez-la avec le couvercle. Une fois rempli, assurez-vous qu’il n’y a pas de bulles d’air. Si des bulles d’air sont présentes, retirez-les en tapotant légèrement sur la cuvette.
Placez la cuvette dans le support de cellule de l’instrument avec la flèche tournée vers l’avant et fermez le couvercle de la chambre de mesure. Chargez le paramètre d’unité SOP et entrez le nom d’échantillon SST 20 nanomètre particule standard dans la fenêtre de démarrage. En outre, ajoutez une note qui inclut un numéro d’identification et la date d’expiration de la norme.
Pour mesurer la solution de saccharose de fer, pipeter 0,5 millilitre d’une solution de saccharose de fer contenant 2% en masse en volume de fer dans une fiole jaugée de 25 millilitres et remplir jusqu’au trait de jauge avec de l’eau à faible teneur en particules, ce qui donne une solution contenant 0,4 milligramme de fer par millilitre. Placez maintenant la cuvette en plastique contenant la solution de mesure dans l’appareil avec la flèche tournée vers l’avant et fermez le couvercle. Chargez à nouveau le paramètre SOP et entrez le numéro de lot du nom de l’échantillon dans la fenêtre de démarrage.
Démarrez la mesure et quand elle se termine, indiquée par un signal acoustique, fermez la fenêtre de mesure. Calculez la valeur moyenne de six mesures individuelles. Marquez les mesures individuelles dans la vue des enregistrements du fichier de mesure et faites un clic droit sur créer un résultat moyen.
Ajoutez le nom de la valeur moyenne sous le nom de l’échantillon. Ensuite, confirmez en cliquant sur OK. Attendez que le logiciel crée un nouvel enregistrement à la fin de la liste et recherchez un nom entré ainsi que le résultat moyen dans cet enregistrement.
Les diagrammes de distribution par taille, par intensité, volume et nombre sont indiqués. La distribution de la taille selon l’intensité influencée par un deuxième pic est fournie à titre d’exemple de mauvais résultat. Des données de mauvaise qualité ont montré un signal supplémentaire à 5 000 nanomètres.
La répartition par taille par nombre différait jusqu’à un facteur de deux de la moyenne Z basée sur l’intensité proposée. Seules des valeurs légèrement inférieures ont été calculées par la distribution granulométrique en volume. Lors de l’utilisation de DLS pour caractériser les nanoparticules de glucides de fer, il est important de garantir une SOP correcte, une dilution de l’échantillon et un remplissage de cuvette.
Le fractionnement par flux asymétrique par flux et la chromatographie d’exclusion de taille et la diffusion des rayons X aux petits angles peuvent être effectués en tant que méthodes physico-chimiques orthogonales supplémentaires. Les protocoles validés pour le DLS améliorent considérablement la robustesse de la caractérisation initiale et comparative des nanoparticules d’hydrates de fer et de glucides. Cependant, la préparation des échantillons et le biais de la technique en faveur de grandes tailles de particules doivent être considérés dans le contexte des méthodologies orthogonales.
