O espalhamento dinâmico de luz, ou DLS, é um método fundamental para avaliar o tamanho e a distribuição de partículas intactas. No entanto, a análise de nanopartículas de carboidratos de ferro apresenta alguns desafios. Uma vantagem do DLS incluem ampla instrumentação disponível, fácil de realizar a análise, e estabelecer protocolos para a análise de nanomateriais.
Um dos objetivos da DLS é avaliar o perfil de polidispersidade das nanopartículas, o que pode afetar a interação com o meio biológico. Para a demonstração do procedimento, estará Cintia Batista Marques, doutoranda da Universidade de Genebra. Depois de iniciar a máquina no software do instrumento, selecione o local de armazenamento na janela aberta, nomeie o arquivo de medição e confirme os detalhes clicando em salvar.
Selecione o procedimento operacional padrão necessário na lista suspensa na interface do instrumento. Se for necessário um POP mais antigo, selecione Procurar SOP na lista e confirme a seleção clicando na seta verde. Para iniciar o processo de medição, clique no botão verde de início na parte inferior da tela da interface do instrumento.
Em seguida, encha um mililitro da partícula padrão não diluída em uma cubeta de poliestireno e feche-a com a tampa. Depois de cheio, certifique-se de que não há bolhas de ar. Se houver bolhas de ar, remova-as batendo levemente na cubeta.
Coloque a cubeta no suporte da célula do instrumento com a marca de seta voltada para frente e feche a tampa da câmara de medição. Carregue o parâmetro de unidade SOP e insira o nome da amostra padrão de partículas SST de 20 nanômetros na janela inicial. Além disso, adicione uma nota que inclua um número identificador e a data de expiração do padrão.
Para medir a solução de sacarose de ferro, pipetar 0,5 mililitros de uma solução de sacarose de ferro com 2% de massa em volume de ferro em um balão volumétrico de 25 mililitros e encher até a marca com água de baixa partícula, resultando em uma solução contendo 0,4 miligramas de ferro por mililitro. Agora coloque a cubeta plástica que contém a solução de medição no dispositivo com a marca de seta voltada para frente e feche a tampa. Carregue o parâmetro SOP novamente e insira o número do lote do nome do exemplo na janela inicial.
Inicie a medição e quando terminar, indicado por um sinal acústico, feche a janela de medição. Calcular o valor médio de seis medidas individuais. Marque as medidas individuais na visualização de registros do arquivo de medição e clique com o botão direito do mouse em criar resultado médio.
Adicione o nome do valor médio em nome do exemplo. Em seguida, confirme clicando em ok. Aguarde até que o software crie um novo registro no final da lista e procure um nome inserido, bem como o resultado médio nesse registro.
Os gráficos de distribuição de tamanho por intensidade, volume e número são mostrados. A distribuição de tamanho por intensidade impactada por um segundo pico é fornecida como um exemplo de um resultado ruim. Dados de baixa qualidade mostraram um sinal adicional em 5.000 nanômetros.
A distribuição de tamanho por número diferiu em até um fator de dois da média Z baseada na intensidade proposta. Apenas valores ligeiramente menores foram calculados pela distribuição de tamanho por volume. Ao usar DLS para caracterizar nanopartículas de carboidratos de ferro, é importante garantir o POP correto, a diluição da amostra e também o preenchimento da cubeta.
Cromatografia assimétrica de fluxo em campo de fluxo e exclusão de tamanho e espalhamento de raios X a baixos ângulos podem ser realizados como métodos físico-químicos ortogonais adicionais. Protocolos validados para DLS melhoram consideravelmente a robustez da caracterização inicial e comparativa de nanopartículas de carboidratos de ferro. No entanto, a preparação da amostra e o viés da técnica para grandes tamanhos de partículas precisam ser considerados no contexto das metodologias ortogonais.
