Suivi à long terme des taux de consommation d’oxygène dans des cultures épithéliales pigmentaires rétiniennes hautement différenciées et polarisées

La dégénérescence de l’EPR, ou épithélium pigmentaire rétinien, est à l’origine de nombreuses causes de perte de vision. Dans de nombreux cas, le dysfonctionnement mitochondrial est à l’origine de cette dégénérescence de l’EPR. Nous pouvons mesurer la fonction mitochondriale en examinant les taux de consommation d’oxygène, ou OCR.

Nous présentons ici une nouvelle méthode de mesure de l’OCR dans le RPE. Grâce aux travaux de plusieurs laboratoires, il est maintenant bien établi que l’EPR a besoin d’une activité mitochondriale pour maintenir sa santé et sa fonction. La recherche est maintenant plus axée sur les nutriments que l’EPR utilise de préférence et si cela change en cas de stress.

Les méthodes précédentes d’évaluation de l’OCR dans l’EPR ont des limites. Soit l’EPR a été cultivé dans des conditions non idéales, soit il n’a pas pu être évalué sur de longues périodes. Ainsi, la mesure de l’OCR dans des cultures haute fidélité qui conservent des caractéristiques in vivo est l’un des principaux défis.

La méthode de surveillance de l’OCR présentée dans ce manuscrit nous permet de mesurer l’OCR sur une semaine tout en manipulant l’EPR dans le cadre de multiples défis expérimentaux. Tout cela se fait alors que l’EPR est dans des conditions de culture idéales qui lui permettent d’imiter l’EPR idéal in vivo. Recipher est un nouveau dispositif de surveillance à long terme de la consommation d’oxygène dans les cultures cellulaires, telles que l’épithélium pigmentaire rétinien.

Contrairement aux méthodes à court terme comme l’analyseur d’hippocampe, le recipher prend en charge une surveillance prolongée dans des conditions standard, permettant un profilage bioénergétique détaillé sur plusieurs semaines tout en préservant la santé cellulaire.