JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

אנחנו מדגימים וריאציות של טכניקה רבת יחידת ההקלטה התאית לאפיין תגובות ריח מעורר בשלושת השלבים הראשונים של מסלול ההרחה חסר חוליות. טכניקות אלה יכולים בקלות להיות מותאמות לבחינת פעילות הרכב במערכות עצביות אחרות גם כן.

Abstract

זיהוי ופירוש של רמזי חוש ריח הם קריטיים להישרדות של יצורים רבים. למרבה הפלא, מינים על פני טווח מערכת יש מערכות חוש ריח דומות להפליא שמרמזים כי הגישה הביולוגית כימית לחישה בצורה מיטבית לאורך זמן אבולוציוני 1. במערכת הרחת חרקים, odorants הם transduced ידי נוירונים קולטניים ריח (orn) באנטנה, המשתמשים בגירויים כימיים לרכבות של פוטנציאל פעולה. קלט חושי מORNs אז העביר לאונת מחושים (AL; מבנה דומה לפקעת הרחת חוליות). בAL, ייצוגים עצביים לריחות בצורה של דפוסי ירי חלל ובזמן המופצים על פני רכבים של נוירונים העיקריים (PNS; מכונה גם נוירונים הקרנה) 2,3. פלט AL מעובד לאחר מכן על ידי תאי קניון (KCs) בגוף במורד זרם הפטריות (MB), מבנה הקשור לזיכרון ולמידת הרחת 4,5. שלהדואר, אנו מציגים טכניקות הקלטת אלקטרו לעקוב אחרי תגובות ריח מעורר עצביות במעגלי ריח אלה.

ראשית, אנו מציגים שיטת הקלטת sensillum יחידה כדי לחקור את תגובות ריח מעורר ברמה של אוכלוסיות של ORNs 6,7. אנו דנים בשימוש בpipettes המלוח מלא חדד זכוכית כאלקטרודות extracellularly לעקוב אחרי תגובות orn. בשלב הבא, אנו מציגים שיטת extracellularly לעקוב אחרי תגובות PN באמצעות אלקטרודה מסחרית 16-ערוץ 3. גישה דומה באמצעות חוט tetrode ערוץ 8-מעווה אישית הוא הוכיח לתא הקלטות קניון 8. אנו מספקים פרטי ההתקנה הניסיונית שלנו ועקבות הקלטה יציגה נוכחיות לכל אחת מהשיטות הללו.

Protocol

1. הכנת ריח ומשלוח

  1. לדלל פתרוני ריח בשמן מינרלים לפי נפח כדי להשיג את רמת הריכוז הרצוי. אחסן תערובת 20 מ"ל של שמן מינרלים וodorant בבקבוק 60 מיליליטר זכוכית. הכנס שתי מחטי מזרק לתוך פקק גומי (מד 19), אחד מלמטה והשני מלמעלה, כדי לספק כניסה וקו יציאה. לאטום את בקבוק הזכוכית עם פקק גומי זו ולצרף אישית מעוצבת מסנן פחם לקו היניקה (איור 1 א) מופעל.
  2. מסנן הפחם נעשה שימוש בשני מזרקים 6 מ"ל. חותך את המזרקים במחצית והשלך את סוף הבוכנה. מלא כל אחד מהחלקים שנותרו עם כותנה ופחם פעיל לפני חיבורם יחדיו באמצעות צינורות כיווץ בחום.
  3. חבר את קו היציאה של בקבוק הריח (באמצעות צינורות פוליאתילן, מזהה 0.86 מ"מ) לצינור הפלסטיק (אבובי Nalgene FEP, מזהה 5.8 מ"מ) המספק זרימת אוויר קבועה לאורך האנטנה (התרשים 1B ).
  4. ישיר פחם בפילטר, אוויר dehumidified (גז מוביל; ספיקה, 0.75 L / min) לקראת הארבה באמצעות צינור פלסטיק ממוקם בתוך כמה סנטימטרים של אנטנת ארבה.
  5. לגירוי ריח, לתפוס נפח קבוע (0.1 ליטר / דקה) של אמיץ סטטי מעל פתרון הריח בבקבוק. זו מושגת על ידי הזרקת כמות שווה של אוויר dehumidified לבקבוק באמצעות משאבת פיק (WPI, PV-820). האדים מבקבוק הריח מופנים דרך הקו לשקע על צינור זרימת האוויר (1B איור).
  6. הסר את אדי הריח נמסרו על ידי הצבת משפך ואקום ~ 10 סנטימטרים מאחורי אנטנת ארבה.

2. הכנת אנטנת ארבה להקלטת Sensillum יחידה

  1. בחר ארבה צעיר בוגר של שני מינים עם כנפיים במלוא גודל, אבל לפני שלב ההזדווגות ממושבה הומה אדם. כדי לרסן את הארבה, לכרות תחילה את רגליה. לאטום את אתרי קטיעה עם דבק רקמות (Vetbond, 3M). לא מאובטחהוא הארבה לחדר מתוכנן מותאם אישית באמצעות פיסה קטנה של סרט חשמל עטופה סביב החזה שלה (איור 2 א).
  2. תחת מיקרוסקופ נתיחה, לעשות שקע רדוד בפלטפורמת השעווה (איור 2 א) להצבת אנטנה. הנח את האנטנה לתוך החריץ ולייצב אותו באמצעות שעווה בטיק בשני קצוות של האנטנה (האיור 2B; electrowaxer משמש להמסת השעווה).
  3. הכנס האלקטרודה קרקע (חוטי כסף chlorided) לתוך בית החזה (~ 1 סנטימטר מראש). להשתמש בשעווה בטיק לשניהם חותם אתר החתך והחזק את חוט הקרקע במקום (איור 2 א).

3. הקלטת Sensillum יחידה לעקוב אחרי תגובות ריח מעורר מנוירונים קולטניים ריח (ORNs)

  1. הנח את אנטנת הארבה התייצב תחת stereomicroscope (היקה M205C) על שולחן בידוד רעידות (TMC) (איור 3 א). ודא שבסיס sensillum ההקלטה ברורly גלוי (איור 3 ב ').
  2. השתמש micropipette חולץ (סאטר P-1000) לפברק אלקטרודות זכוכית (עכבה 3-10 MΩ כאשר התמלא ארבה 9 מלוחים, מיקרומטר 1-3 קוטר קצה) באמצעות צינור נימי זכוכית ורוסיליקט (1.2 מ"מ OD, מזהה 0.69 מ"מ).
  3. הנח את אלקטרודת הזכוכית לבעל micropipette שמצורף לmicromanipulator ממונע (סאטר MP-285). הכנס בעדינות את האלקטרודה לתוך בסיס sensillum (איור 3 ב '). שימו לב שכל sensillum יכול להכיל 3-50 ORNs בארבה 10.
  4. להגביר את האות (10,000 פעמים) באמצעות מגבר AC (גראס P-55). סנן האות בין 0.3-10.0 קילוהרץ ולרכוש בקצב דגימה 15 קילוהרץ (האיור 3D) באמצעות מערכת רכישת נתונים (LabVIEW, PCI-MIO-16E-4 כרטיסי DAQ; מכשירים הלאומיים).

4. נוהל Dissection ארבה לאונת מחושים והקלטות גוף פטריות

  1. עקוב restrainiנהלי ng כמתוארים בסעיף 2.1. מקם את הארבה בחדר מותאם במיוחד כפי שמוצג באיור 4 א 'וב'.
  2. לתנקב מלוח במהלך ולאחר הליך הנתיחה, לבנות כוס שעווה סביב ראש ארבה. כוס השעווה צריכה להתחיל בדיוק מעל לאיברי הפה, ולהרחיב מעבר לעיניים המורכבות המקיפות את האזור שבין שתי האנטנות, כפי שמוצג באיור 4C.
  3. כדי לאפשר האנטנות לעבור כוס השעווה, ליצור מנהרות קטנות בשני הצדדים באמצעות צינורות (5 מ"מ אורך, 0.86 מ"מ ID) פלסטיק (פוליאתילן). ודא שצינור הפלסטיק יכול להחליק דרך כוס השעווה. האחרונים מושגים באמצעות אטם גומי שעוטף בחוזקה את צינור הפלסטיק אבל מצורפים לשעוות הגביע (האיור 4C).
  4. שימוש בשרף אפוקסי, לצרף את הבסיס של האנטנות לקצה התחתון של צינור הפלסטיק. צעד זה מבטיח שהמחושים מוחזקים במקום גם לאחר שמסביבציפורן הוסרה.
  5. שמור על כוס שעווה מלאה בתמיסת מלח 9 מנקודה זו ואילך. בגין על ידי הסרת אזור מלבני מרכזי בין שתי האנטנות (צד ארוך של המלבן המיושר עם ציר anteroposterior). לאחר מכן, להסיר ציפורן באזורים סמוכים מבלי להפריע לעיניים המורכבות והציפורן בבסיס האנטנה (האיור 4D).
  6. שימוש במלקחיים עדינים, בעדינות להסיר צקי אוויר וגופי שומן המקיפים את המוח. בסופו של שלב זה, מוח הארבה צריך לראות בבירור (האיור 4D). שים לב שהאזורים במוח המעבדים את מידע ההרחה (עם פיגמנטציה צהובה בהירה) נמצאים בין שתי האנטנות.
  7. בארבה המעיים פועלים מתחת למוח ולאורכו של הגוף. כדי למנוע תנועה של המעי מערעור יציבות בהכנה פוטנציאלית, משוך בעדינות את המעי הקדמי וחותך אותו בעזרת מספריים עדינים. לעשות חתך קטן בבטן פשוטמעל הרקטום ולהסיר את המעיים על ידי משייכת המעי האחורי עם מלקחיים גסים. כדי למנוע דליפה מי מלח, לקשור את הבטן מייד הקדמית לאתר החתך עם נושאי תפר.
  8. השתמש בפלטפורמה קטנה עשויה מחוט דק מצופה בשכבה דקה של שעווה כדי לרומם את המוח ולייצב אותה במהלך 11 electrophysiology כפי שמוצג באיור 4D.
  9. מוח החרקים מכוסה במעטה דקה בידוד שיש להסיר לפני ניסויים. לdesheath המוח, בעדינות להפיץ כמות קטנה של אנזים (0.3-0.4 מ"ג פרוטאז, סיגמה אולדריץ) על פני השטח של המוח באמצעות מלקחיים עדינים 9. לאחר ~ של 5-10 של יישום אנזים, שטיפת המוח ביסודיות עם תמיסת מלח. שימוש במלקחיים ועדינים מאוד בעדינות לצבוט ולמשוך את הנדן ובהמשך יקרע אותו על מקומות ההקלטה (AL וMB; שמוצג באיור 4E, F).

5. קלטות רבות של יחידות מהאונה והמחושיםגוף הפטרייה

  1. הנח את הכנת הארבה (האיור 5A) תחת stereomicroscope הושעה מדוכן ום מונח על שולחן בידוד רעידות.
  2. שמור על קצב קבוע מלוח זלוף (כ 0.04 ליטר / שעה) לאורך הניסוי. השתמש בחוט כסף chlorided השקוע בכוס השעווה מלוחה המלאה כהאלקטרודה הקרקע.
  3. להקלטות PN, השתמש ערוץ 16-סיליקון חללית (טכנולוגיות NeuroNexus, פריט # A2x2-ט-3mm-150-150-121-A16, 5B איור). לפני כל ניסוי, Electroplate את האלקטרודות בזהב כדי להשיג עכבות בטווח kΩ 200-300. השתמש במעגל שמוצג באיור 7 עבור electroplating.
  4. מקם את האלקטרודה הקרובה לפני השטח של אונת המחושים ועדינות להכניס אותו לתוך הרקמות באמצעות micromanipulator ידני (WPI, M3301R) (האיור 5D).
  5. לקדם את האלקטרודה ב~ 10 צעדי מיקרומטר. חכה 2-3 דקות בכל שלב ולהעריך לרכושאיכות אות ד. באתר הקלטה אידיאלי, אותות תאיים יהיו נטל על ידי ערוצי הקלטה מרובים ויהיה יחס גבוה אות לרעש (SNR> 3-5 פעמי הרעש SDS).
  6. להקלטות KC, השתמש tetrode מחוייט שזור חוט (איור 5 ג; הליך ייצור צעד אחר צעד הוצג בסעיף 6). Electroplate אלקטרודות אלה כפי שפורט בשלב 5.3. הנח tetrode על פני השטח של MB (האיור 5E) כKC somata מוגבל לשכבה השטחית של מגה 8.
  7. ניתן גם הקלטות KC PN ובו זמנית מאותה הכנת ארבה כפי שמוצגים באופן סכמטי 5A איור.
  8. חכה לפחות 15 דקות לאחר שמצא את מיקום ההקלטה כדי לאפשר התייצבות של אלקטרודות.
  9. לרכוש את כל האותות התאיים ב15 קילוהרץ, ומסנן בין 0.3-6 קילוהרץ, ולהגביר (10,000 פעמים) באמצעות ערוץ 16 AC מגבר (ביולוגית אלקטרוניקת חנות; קלטק בפסדינה, קליפורניה) (איור 6 א ', ב').

6. הליכים להפוך אלקטרודה תיל המפותלת להקלטות KC

  1. כדי לעצב האלקטרודה רבה יחידה להקלטות KC, השתמש חוט מבודד ניקל כרום (RO800, 0.0005 "חוט) 8.
  2. אם 8 האלקטרודות רצויות, ואז עוטף את החוט מסביב לחלק ארוך של 10-15 סנטימטר 4 פעמי קרטון. את הקצוות של הקרטון יכולים להיות מכוסים בצינורות פלסטיק כדי למנוע את הקצוות מחיתוך התיל. למרות עטיפה, לוודא שיש קצת רפוי, אך יש לוודא שהחוטים אינם מתוחים. טפל בחוט בזהירות כפי שהוא נשבר בקלות.
  3. חבורה יחד את החוטים בחלק העליון של הקרטון ולהשתמש בחתיכת הסרט (Tape זמן, T-534-RP) כדי להחזיק אותם יחד. חותך את החוטים בקצה השני. הסר את חוטי תיל וקבוצה את החוטים בסוף לחתוך גם באמצעות קטע אחר של הסרט.
  4. שימוש בכייל צלחת ייקר (Thermo Scientific, 4625Q דגם), כורכים את החוטים יחד (~ 72 rev / min 3דקות) כדי ליצור חוט שזור אחד. התחתון של קווצות השיער המודבק יכול להיות מקוטע לרוטור צלחת כייל והעליון יכול להיות מקוטע לדוכן בום. במהלך מפותל, החוט צריך להיות רפוי מעט, ובכל זאת לא להיות מתוח.
  5. ממס את הבידוד יחד עם אקדח חום (ולר 6966C) לתקוע את הגדילים הבודדים יחד וליצור חוט אחד. עובר איטי 3-4 שניות (3-4 כל אחד) מעל אורך החוט צריך להיות מספיק כדי לחמם ולהתיך את הגדילים ביחד. לאחר מכן שחרר את החוט מהתחתית ולאפשר לו להירגע. חתוך את החוט ליד הקצוות כדי להסיר את הסרט.
  6. קצה אחד של החוט דרך צינורית 5-6 סנטימטר, זכוכית נימים (OD 1.0 מ"מ, 0.58 מ"מ ID). ניסיתי להפריד את החוט השזור בקצה אחד באמצעות פינצטה העדינה ולהסיר את הציפוי על ידי הצתה מאוד הסוף באמצעות להבה בקצרה. צעד זה חייב להיעשות בזהירות; לחשוף את החוט ללהבה במשך זמן רב מדי יגרום לגדילים כדי להמס וסבך.
  7. בעדינות להפריד בין 8 גדילים בקצה flamednd הלחמת גדיל אחד בנפרד לתוך שקע IC 8-PIN. מעייל העליון של שקע IC עם אפוקסי להחזיק את החוטים וזכוכית נימים במקום. גם מקום טיפה קטנה של אפוקסי בקצה השני של הנימים להחזיק את החוט במקום (איור 5 ג).
  8. לבסוף, לחתוך את הקצה של החוט בזווית של 45 מעלות עם מספרי קרביד על 0.5 סנטימטר מקצה הנימים.

תוצאות

תגובות ריח של עוררו-orn אחת לשני כהלים שונים מוצגות באיור 3D. בהתאם למיקום ההקלטה (סוג sensilla, מיקום של האלקטרודה) הקלטות מרובות יחידה יכול להיות מושגת.

גל תאי גלם מקלטת AL מוצג באיור 6 א. פוטנציאל פעולה או קוצים של אמפל...

Discussion

גירויים חושיים ביותר לעורר תגובות קומבינטורית המופצים על פני רכבים של נוירונים. לפיכך, ניטור סימולטני של פעילות רב נוירון הוא הצורך להבין כיצד גירוי ספציפי המידע מיוצג ומעובד על ידי מעגלים עצביים במוח. הנה, יש לנו הפגנו טכניקות רבות יחידת הקלטה תאיות לאפיין תגובות ר?...

Disclosures

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

Acknowledgements

המחברים מבקשים להודות לגורמים הבאים על מימון עבודה זו: נדיב הזנק כספים מהמחלקה להנדסה ביו רפואית באוניברסיטת וושינגטון, מקדונל מרכז למערכות Neuroscience מענק, משרד מחקר של צי מענק (גרנט #: N000141210089) לBR

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
שם חברה מספר קטלוגים תגובות
אלקטרופיזיולוגיה ציוד
AC מגבר דשא הדגם P55 להקלטות sensillum בודדות
אודים לפקח (מודל 3300) מערכות AM 940000
מחוייט ערוץ 16 קדם מגבר ומגבר קאל. טק. ביולוגית אלקטרוניקת חנות להקלטות AL ומגה
יחידת רכישת נתונים מכשירים הלאומיים BNC-2090
אור סיב אופטי WPI Si-72-8
מקור האור 115 V WPI NOVA
micromanipulator הידני WPI M3301R להקלטות מוח ארבה
Stereomicroscope1 על דוכן ום ליקה M80 להקלטות מוח ארבה
Stereomicroscope2 ליקה M205C להקלטות sensillum בודדות
שולחן רטט בידוד TMC 63-500 סדרה
micromanipulator הממונע סאטר מכשירים MP285 / T
אוסצילוסקופ Tektronix TD2014B
אלקטרודות / בניית כלים
האלקטרודה 16-ערוץ NeuroNexus A2x2-ט-3mm-150-121 להקלטות אונת מחושים
צינורות נימים ורוסיליקט עם חוט להט, מזהה 0.69 מ"מ סאטר מכשירים BF120-69-10 להכנת אלקטרודות זכוכית
Micropipette חולץ סאטר מכשירים P-1000
הגנרטור פונקציה מודד מחסן SG1639A לאלקטרודות זהב ציפוי
פתרון ציפוי זהב (לא ציאניד) תעשיות SIFCO NC SPS 5355
בוחן אימפדנס בק אלקטרוניקה בע"מ IMP-2 לאלקטרודות זהב ציפוי
מתג סיבובי Electroswitch C7D0123N לזהב plאלקטרודות ating
דופק מבודד WPI A365 לאלקטרודות זהב ציפוי
בעל האלקטרודה סדרה ש וורנר מכשירים 64-1091
סילבר חוט 0.010 "קוטר מערכות AM 782500 האלקטרודה קרקע
8 פינים מח"ש שקע IC Digikey ED90032-ND
צינורות נימים ורוסיליקט עם חוט להט, מזהה 0.58 מ"מ וורנר מכשירים 64-0787 בניית tetrode תיל מפותלת
אקדח חום ולר 6966C
Rediohm-800 חוט Kanthal טכנולוגיות Precision PF002005
כייל הצלחת שייקר Thermoמדעי 4625Q חוטים נפתלים
מספרי קרביד, 4.5 " המחקר ביו Instr 25-1000 לחיתוך חוטי tetrode מעוותים
פינצטה נקודה העדינה HECO 91-EF5-SA לחוטי tetrode מתגרים חוץ
משלוח ריח
6 מזרק מ"ל קנדל 1180600777 למנהג נועד פחם פעיל מסנן
בקבוקי ריח חומים דיג 08-912-165
פחם BuyActivatedCharcoal.com GAC-48c
חומר יבוש Drierite 23005
גז Drierite ייבוש צנצנת הפישר סיינטיפיק 09-204
מחמם לכווץ צינורות 3M EPS-200 הכנת ריח מסנן
רכזת מזרק מחט אלומיניום, מד 19 קנדל 8881-200136 למתן כניסה וקווים דואליים לבקבוקי ריח
שמן מינרלים כימיקלי Mallinckrodt 6357-04 לדילול ריח
צינורות Nalgene פלסטיק, 890 FEP Thermo Scientific 8050-0310 למסירת גז מוביל
פניאומטיים picopump WPI sys-pv820 למסירת ריח
0.86 מ"מ מזהה צינורות פוליאתילן Intramedic 427421 לבקבוק ריח לשקע connectiתוספות וצינורות שפע מי מלח
פקקים מעבדת טהורה 97041 לאיטום בקבוקי ריח
קלטת זמן PDC T-534-RP
luer אבובים קולמן לבן זוג 30600-66
צינור ואקום מקמאסטר-קאר 5488K66
הכנה / Dissection
100 15 צלחת פטרי מ"מ x VWR הבינלאומי 89000-304
חוטי נחושת תקועי AWG 18 לאפי Kabel 4510013 בידוד תיל משמש כאטמי גומי
התחברות לרשת גדילי חוטים 22 AWG AlphaWire 1551 מוחפלטפורמה
טיק שעווה אקארד 7946000
שעוות פריפרית שיניים הנרי שיין-שיניים 6652151
Electrowaxer Almore הבינלאומי 66000
אפוקסי, 5 דקות PERMATEX 84101
רכזת אלומיניום מזרק קנדל 8881-200136
פרוטאז מStreptomyces griseus סיגמה אולדריץ P5147 לdesheathing מוח ארבה
חוט תפירה שאינו סטרילית דיג NC9087024 לקשירת הבטן לאחר הסרת מעי
Vetbond 3M 1469SB לאיטום amאתרי putation
דומון # 1 מלקחיים (גס) WPI 500335
דומון # 5 טיטניום מלקחיים (קנס) WPI 14096
דומון # 5SF מלקחיים (ועדין) WPI 500085 desheathing מוח ארבה
10 סנטימטרים לנתח מספריים WPI 14393 להסרת רגליים וכנפיים
מספרי Vannas (קנס) WPI 500086 להסרת ציפורן, גזירת המעי הקדמי
שפע מי מלח
סיומת קבוצה עם רגולטור ספיקה מור רפואי 69136 לויסות זרימה מי מלח
IV ממשל הקים עםאתר ההזרקה Y מור רפואי 73190 לויסות זרימה מי מלח

References

  1. Ache, B. W., Young, J. M. Olfaction: diverse species, conserved principles. Neuron. 48, 417-430 (2005).
  2. Laurent, G., Wehr, M., Davidowitz, H. Temporal representations of odors in an olfactory network. Journal of Neuroscience. 16, 3837-3847 (1996).
  3. Stopfer, M., Jayaraman, V., Laurent, G. Odor identity vs. intensity coding in an olfactory system. Neuron. 39, 991-1004 (2003).
  4. Steven de Belle, J., Heisenberg, M. Associative odor learning in Drosophila abolished by chemical ablation of mushroom bodies. Science. 263, 692-695 (1994).
  5. Cassenaer, S., Laurent, G. Conditional modulation of spike-timing-dependent plasticity for olfactory learning. Nature. 482, 47-52 (2012).
  6. Hallem, E. A., Carlson, J. R. Coding of odors by a receptor repertoire. Cell. 125, 143-160 (2006).
  7. Raman, B., Joseph, J., Tang, J., Stopfer, M. Temporally diverse firing patterns in olfactory receptor neurons underlie spatiotemporal neural codes for odors. Journal of Neuroscience. 30, 1994-2006 (2010).
  8. Perez-Orive, J., et al. Oscillations and sparsening of odor representations in the mushroom body. Science. 297, 359-365 (2002).
  9. Naraghi, M., Laurent, G. Odorant-induced oscillations in the mushroom bodies of the locust. The Journal of Neuroscience. 14, 2993-3004 (1994).
  10. Ochieng, S. A., Hallberg, E., Hansson, B. S. Fine structure and distribution of antennal sensilla of the desert locust, Schistocerca gregaria (Orthoptera: Acrididae). Cell and Tissue Research. 291, 525-536 (1998).
  11. Burrows, M., Laurent, G. Synaptic Potentials in the Central Terminals of Locust Proprioceptive Afferents Generated by Other Afferents from the Same Sense Organ. Journal of Neuroscience. 13, 808-819 (1993).
  12. Pouzat, C., Mazor, O., Laurent, G. Using noise signature to optimize spike-sorting and to assess neuronal classification quality. Journal of Neuroscience Methods. 122, 43-57 (2002).
  13. Mazor, O., Laurent, G. Transient dynamics versus fixed points in odor representations by locust antennal lobe projection neurons. Neuron. 48, 661-673 (2005).
  14. Christensen, T. A., Pawlowski, V. A., Lei, H., Hildebrand, J. G. Multi-unit recordings reveal context dependent modulation of synchrony in odor-specific neural ensembles. Nature Neuroscience. 3, 927-931 (2000).
  15. Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae. J. Vis. Exp. (36), e1725 (2010).
  16. Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. Neural Encoding of Rapidly Fluctuating Odors. Neuron. 61, 570-586 (2009).
  17. Ito, I., Ong, R. C., Raman, B., Stopfer, M. Sparse odor representation and olfactory learning. Nature Neuroscience. 11, 1177-1184 (2008).
  18. Laurent, G. Olfactory network dynamics and the coding of multidimensional signals. Nature Review Neuroscience. 3, 884-895 (2002).
  19. Brown, S. L., Joseph, J., Stopfer, M. Encoding a temporally structured stimulus with a temporally structured neural representation. Nature Neuroscience. 8, 1568-1576 (2005).
  20. MacLeod, K., Laurent, G. Distinct mechanism for synchronization and temporal patterning of odor-encoding neural assemblies. Science. 274, 976-979 (1996).
  21. Wehr, M., Laurent, G. Relationship between afferent and central temporal patterns in the locust olfactory system. The Journal of Neuroscience. 19, 381-390 (1999).
  22. Moreaux, L., Laurent, G. Estimating firing rates from calcium signals in locust projection neurons in vivo. Frontiers in Neural Circuits. 1, 1-13 (2007).
  23. Galizia, C. G., Joerges, J., Kuttner, A., Faber, T., Menzel, R. A semi-in-vivo preparation for optical recording of the insect brain. Journal of Neuroscience Methods. 76, 61-69 (1997).
  24. Galan, R. F., Sachse, S., Galizia, C. G., Hez, A. V. M. Odor-driven attractor dynamics in the antennal lobe allow for simple and rapid olfactory pattern classification. Neural Computation. 16, 999-1012 (2004).
  25. Kuebler, L. S., Schubert, M., Karpati, Z., Hansson, B. S., Olsson, S. B. Antennal Lobe Processing Correlates to Moth Olfactory Behavior. Journal of Neuroscience. 32, 5772-5782 (2012).
  26. Silbering, A. F., Bell, R., Galizia, C. G., Benton, R. Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe. J. Vis. Exp. (61), e2976 (2012).
  27. Skiri, H. T., Galizia, C. G., Mustaparta, H. Representation of Primary Plant Odorants in the Antennal Lobe of the Moth Heliothis virescens Using Calcium Imaging. Chemical Senses. 29, 253-267 (2004).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

Neuroscience71BioengineeringsensillaSchistocerca

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved