Murine Orchiectomy ו Ovariectomy כדי להפחית את ייצור הורמוני המין

Summary

כתב יד זה מתאר דרך עקבית לבצע במהירות כריתת מכרסמים הישרדותית וכריתת שחלות.

Abstract

איתות הורמוני מין ממלא תפקיד קריטי במערכות איברים מרובות, כמו גם בהתקדמות של מחלות שונות, כולל מחלות נוירודגנרטיביות. המניפולציה של רמות הורמוני המין במערכת מודל מורין מאפשרת לחקור את השפעתם על איברים/רקמות ובתוך התקדמות המחלה. אורכיאקטומיה - הסרה כירורגית של האשכים - וכריתת שחלות - הסרה כירורגית של השחלות - מספקות שיטה לדלדול הורמוני המין האנדוגניים, כך שניתן יהיה לספק את רמות ההורמונים המדויקות באמצעות תרופות או שיטות מסירה אחרות. כאן, אנו מספקים שיטות מהירות וזעיר פולשניות הן לכריתת שחלות והן לכריתת שחלות במערכת מודל מורין להפחתת הורמוני מין. פרוטוקול זה מפרט את ההכנה הכירורגית והכריתה של האשכים דרך שק האשכים, וכריתה של השחלות דרך שני חתכים בגב הלטרלי הימני והשמאלי.

Introduction

האשכים והשחלות הם האיברים העיקריים האחראים על ייצור הורמוני המין. מפל התקשורת ההורמונלית המוביל לייצור טסטוסטרון ואסטרוגן הוא תהליך מאופיין היטב שמתחיל בהיפותלמוס עם שחרורו של הורמון משחרר גונדוטרופין (GnRH)¹. שחרור GnRH גורם לשחרור הורמון luteinizing (LH) והורמון מגרה זקיק (FSH) מבלוטת יותרת המוח. כאשר הורמונים אלה נכנסים לזרם הדם, הם משפיעים על רקמות אחרות בגוף. המטרה העיקרית של LH היא האשכים (אצל זכרים) והשחלות (אצל נקבות)². בתגובה ל- LH, האשכים מייצרים ומשחררים טסטוסטרון³. באופן דומה, השחלות מייצרות אסטרוגן⁴. בעוד ההשפעות המיועדות של הורמונים אלה הן להכין את התאים ואת הגוף להפריה ולהבטיח מערכת רבייה מתפקדת, מערכות גוף רבות אחרות יכולות להיות מושפעות.

הורמוני מין נקשרו למספר תפקודים פיזיולוגיים. לדוגמה, אסטרוגן מסייע לשמור על הומאוסטזיס העצם על ידי מניעת ספיגת עצם על ידי אוסטאוקלסטים. מסיבה זו, מודלים עכבר השחלה ניתן להשתמש כדי ללמוד את הפיזיולוגיה של מחלות עצם כגון אוסטאופורוזיס ^5,6,7. טסטוסטרון ואסטרוגן הם גם מטרות מחקר עבור מחלות לב וכלי דם רבות ומחלות נוירודגנרטיביות. לאחרונה, ייצור טסטוסטרון מוגבר יחד עם תזונה עתירת שומן נקשרו לעקה חמצונית וסקולרית⁸. במוח, שינויים ב- LH לאחר כריתת שחלות גרמו לשינויים בזיכרון המרחבי⁹. הפחתת אסטרוגנים לאחר כריתת שחלות הפכה גם למערכת מודל לחקר מוות תאי בהיפוקמפוס, שכן זה יכול לגרום אפופטוזיס, וכתוצאה מכך ליקויים בזיכרון¹⁰. טסטוסטרון הראה גם תפקיד בצמיחת הכליות הן במודלים של עכברים והן בבני אדם לאחר השתלת כליה¹¹.

יצירת מודל מורין נטול הורמונים מאפשרת לחקור את הורמוני המין ואת מפל ההורמונים שלהם על מחלות או רקמות שונות. זה יכול להיות מושגת על ידי הסרה כירורגית של האשכים (orchiectomy) או השחלות (ovariectomy). הליך זה יכול להתבצע בעכברים מכל זן כאשר הם צעירים כמו גיל הגמילה (עשרים ואחד ימים) או כל גיל בוגר. כריתת שחלות מבוצעת בעכברים נקבות, ואילו כריתת שחלות מבוצעת בעכברים זכרים. על ידי הסרת איברים אלה, רמות האסטרוגן והטסטוסטרון, ורבים מהנגזרות שלהם, כגון פרוגסטרון, ניתן להפחית באופן משמעותי^12,13. תהליך ביצוע כריתת שחלות או כריתת שחלות בעכברים יכול להיות מהיר וזעיר פולשני עם הטכניקה הנכונה. כריתה מהירה של איברים אלה בצורה בטוחה ויעילה יכולה לאפשר עיבוד כירורגי מהיר תוך שמירה על מספרי עכברים מינימליים על ידי שיעור הישרדות של 100% כאשר מבוצע כראוי. כאן, אנו מפרטים פרוטוקול לכריתה מהירה של האשכים והשחלות ומדגימים את הניטור הנכון לאחר הניתוח כדי לאפשר לחוקרים לבצע ניתוח זה במהירות ובבטחה. אנו כוללים גם דוגמאות חזותיות של איברי המין והרקמות הסובבות כדי לספק למנתח ציוני דרך אנטומיים בעת ביצוע הליך זה.

Protocol

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים ב- UTSW (APN#2019-102840).

1. כריתת מורין

1. הכינו שדה עבודה אספטי וודאו שכלי הניתוח הדרושים עוקרו וזמינים. בצע שיטות אספטיות עבור ניתוח הישרדות מכרסמים.
2. רשום את משקל העכבר הזכר ונהל את שיטת ההרדמה המועדפת על פי ההנחיות המוסדיות. בפרוטוקול זה, 2% איזופלורן הועבר באמצעות וופורייזר מדויק לשמירה על הרדמה. לפני ההליך, יש לתת תרופות כאב בהתאם להנחיות המוסדיות. בפרוטוקול זה, 1.0 מ"ג / ק"ג Buprenorphine SR ו 5 מ"ג / ק"ג Meloxicam הועברו תת עורית.
3. ברגע שהעכבר נמצא תחת הרדמה, כסו את עיני החיה בג'ל עיניים משמן כדי למנוע היווצרות של פגיעה בעיניים, התייבשות הקרנית או כיב.
4. לפני שתמשיך, ודא את מישור ההרדמה הנכון על ידי ביצוע בדיקת תגובה צביטת בוהן.
5. הכינו את האזור הכירורגי של בעל החיים לפני הנחתו על השדה הכירורגי האספטי.
   1. לאחר מכן, לגלח את אזורי המפשעה ושק האשכים של העכבר באמצעות זוג קוצצים.
      הערה: גילוח הבטן התחתונה העדיפה על הפין יאפשר הדמיה טובה יותר במהלך הניתוח.
   2. בעזרת אפליקטור מודבק כותנה, מרחו שכבה דקה של קרם דפילטורי (ראו טבלת חומרים) על עור החיה, וכיסו את שק האשכים ואת האזור שמסביב שזה עתה גולח. המתן 30 שניות והסר את הקרם עם חתיכת גזה נקייה.
   3. השתמשו בספוגי גזה ספוגי אתנול 70% כדי לנגב את שאריות הקרם והשיער מהאזור.
      הערה: 70% אתנול בשלב זה הוא לסייע בהסרה מלאה של קרם depilatory. הכנה חיטוי של האתר הכירורגי מתבצעת בשלב 1.8.
6. העבירו את העכבר לאזור הניתוח וודאו שיש מקור חום זמין לשמירה על חום הגוף של בעל החיים במהלך הניתוח. הניחו את בעל החיים במצב שכיבה על וילון כירורגי והשתמשו בסרט הדבקה רך כדי להצמיד את רגלי העכבר למזרן הניתוח.
7. אם האשכים עולים לתוך הבטן, בזהירות למשש את הבטן כדי לקבל את האשכים לרדת. השתמש ביד כפפה כדי להפעיל לחץ גלגול עדין כלפי מטה על הבטן.
   הערה: קל יותר לבצע ניתוח זה תחת היקף דיסקציה או באמצעות זוג זכוכית מגדלת להגדלה משופרת. אם אתה מבצע זאת תחת טווח דיסקציה, הקדש רגע כדי למקם את שק האשכים של העכבר מתחת לשדה הראייה של הטווח. ניתן להשתמש בסרט רך כדי להצמיד את רגלי העכבר או בטנו לשדה הניתוח כדי להבטיח שהוא נשאר במיקום הנכון.
8. יש לשפשף את העור עם פילינג כירורגי בטאדין (או פילינג דומה להכנת עור מחטא), ולאחר מכן לשפשף 70% אלכוהול לפחות שלוש פעמים כדי להבטיח חיטוי נאות של העור. עבור כל קרצוף, יש לשפשף בתנועה רדיאלית כלפי חוץ, כך שאת אמצע אתר החתך מקרצפים תחילה וכלה בקרצוף האחרון של הגבול החיצוני של אזור הניתוח המגולח.
9. בשלב זה, ללבוש כפפות כירורגיות סטריליות. עבור השלבים הבאים של ההליך, להשתמש בטכניקות אספטיות. כסו את העכבר עם וילון כירורגי סטרילי עם חתך קטן (חתוך לכ 0.5-1 אינץ 'מרובע כדי להתאים מעל אתר הניתוח) מעל החיה כדי לכסות את הגוף בחומר הווילון.
10. צור חתך בקו האמצע הגחוני בשק האשכים באורך של כ-1 ס"מ עד 1.5 ס"מ באמצעות להב אזמל כירורגי או מכשירים דומים בהתאם להנחיות המוסדיות המאושרות שלך לרווחת בעלי חיים.
11. באחיזת הגבול החתוך של העור, השתמש במכשיר קהה כדי להפריד את העור מהרקמה שמתחת לרקמה. קח זמן לעשות זאת על הגבולות הרוחביים, העליונים והנחותים של החתך.
12. בודד אשך באמצעות מרית ומלקחיים כדי להזיז את החתך בעור כדי להיות ממורכז על אחד האשכים. אם זה קשה, לחזור ל 1.11 ולהפריד עוד יותר את העור מהשכבות שמתחת.
13. קח זוג מלקחיים מעוקלים והנח אותם משני צדי האשך. הפעל לחץ עדין כלפי מטה כדי לחוץ את האשך. תפוס את שכבת השריר הדקה והשקופה שנמצאת על גבי האשך באמצעות מלקחיים. זהו שריר הקרמסטר. אימות שכבת השריר הנכונה נעשה על ידי התבוננות בשכבה זו ובמחזור הדם שלה, הנע באופן עצמאי מהאשך שמתחתיה.
    הערה: זיהוי הרקמה הנכונה מאושר על ידי שקיפותה ויכולתה לנוע באופן עצמאי מהרקמות הבסיסיות.
    1. לתפעל את רקמת השריר באמצעות מלקחיים עד לתפיסת קודקוד השריר. זה צריך להיות החלק הנמוך ביותר, עם האשכים ואת cauda epididymis ממוקם מתחת.
14. אחזו בשריר הקרמסטר במלקחיים והתרחקו בעדינות מהאשכים ומהאפידידימיס. צור חתך של 0.5 ס"מ דרך שריר הקרמסטר של האשך הראשון בשיאו באמצעות זוג מספריים קפיציים קטנים של Vannas.
15. מניחים מהדק נעילה על הקצה האחורי של שריר הקרמאסטר החתוך. השתמש זוג צר של hemostats או זוג מחזיקי מחט מיקרו נעילה. לאחר הידוק הרקמה, הנח בעדינות את המכשיר בצד הצדדי של העכבר כדי לשמור על הרקמה מהודקת במהלך השלבים הפרוצדורליים הבאים.
16. השתמש במלקחיים כדי לתפוס את הגבול העליון של החתך שנעשה בשלב 1.14. בזמן ששני הקצוות של שריר הקרמסטר נסוגים, השתמשו בזוג מלקחיים נוסף כדי להגיע אל תוך החלל ותפסו בעדינות את האשך.
    1. משוך אותו החוצה דרך החור בשריר. היזהר לשים לב לכל סימן של כלי דם ניקובים ודם בשדה הניתוח.
    2. האשך, אפידידימיס, חוט הזרע המחובר וכלי הדם יהיו גלויים כאשר הרקמות מוחצנות כראוי.
    3. ליד הקצה הקאודלי-גבי של האפידידימיס והאשך, יש נקודת חיבור סיבית של האשך לשריר הקרמסטר. גלגלו את הרקמה החיצונית לרוחב כדי לאתר נקודת הכנסה זו. לנתק את זה כדי למנוע נזק לשריר ולאפשר בידוד נוסף הדמיה של רקמות. השתמש בשני זוגות מלקחיים כדי לבצע טכניקת מהדק וקרע.
17. חפשו רקמת שומן סביב האשך מכרית השומן המפשעה. השתמשו בזוג מלקחיים כדי לתפוס את כרית השומן ומשכו אותה בעדינות כדי להוציא אותה החוצה.
    1. אין לתפוס את כלי הדם שנע לאורך כרית השומן, כמו משיכה על זה יכול להוביל לדימום.
18. אתרו את חוט הזרע, כלי הדם וכרית השומן הנותרת הקרובה לרקמות החיצוניות והשתמשו בזוג המוסטטים כדי להדק אותה. תוך כדי החזקת מתח קל באשך הדיסטלי, צרוב את חוט הזרע וכלי הדם דיסטליים למהדק המוסט.
    1. לאחר השלמתו, שחררו לאט את המהדק פרוקסימלי לקצה הצרוב ובדקו סימני דימום. אם קיים, חזור על שלב זה. כדאי להשתמש בזוג מלקחיים כדי להחזיק מתח עדין בקצה הדיסטלי של הרקמה הצובה.
19. אפשרו לגדם הקטוע של חוט הזרע לסגת חזרה לגוף. תפוס את שני הקצוות החתוכים של שריר הקרמאסטר וקרב אותם יחד. להעריך את גודל החתך ברקמה, ולסגור את הרקמה באמצעות 4-0 או 5-0 תפרים נספגים. בהתאם לגודל החתך, יהיה צורך בתפרים 1 או 2. חותכים את קצות התפר עד 0.5 ס"מ באמצעות מספריים לתפר.
20. חזור על שלבים 1.13-1.20 בצד השני של שק האשכים כדי להסיר את האשך השני.
21. יש להתכונן לסגירת החתך בעור.
    1. להבטיח hemostasis טוב של שני גדמי הרקמות. המוסטזיס ירוד יגרום לדימום שיורי בתחום הניתוחי. אם זה קורה, לאתר את הדימום ולצרוב. זה נמנע על ידי מניפולציה איטית וזהירה של הרקמות עם מכשירים קהים.
    2. אם רואים דם בשדה הניתוח, השתמש במוליך כותנה מעוקר כדי לייבש את האזור להדמיה טובה יותר. השתמש מזרק כדי לטפטף מלוחים על האזור כדי להשקות כל דם או נוזל הרחק משדה הניתוח.
22. משכו את שני צידי החתך בעור יחד כדי להכין אותו לסגירה. יש לוודא שהקצוות התפורים של חתכי הקרמסטר אינם בולטים לתוך חתך העור. במידת הצורך, יש לקצץ עוד יותר את קצות התפר.
23. סגרו את העור.
    1. אם אתם משתמשים באטבי פצעים, השתמשו במלקחיים כדי לנתק את העור ולמשוך אותו הרחק מהרקמה שמתחתיו. מניחים אטב פצע אחד במרכז החתך. בדוק כי העור הוא גזוז היטב. אם החתך מעט גדול מדי עבור קליפ פצע אחד כדי לסגור אותו מספיק, ניתן למרוח דבק עור כירורגי על החלקים העליונים והנחותים של החתך.
    2. אם אתם משתמשים בתפרים, הניחו את מספר התפרים הדרוש דרך העור, מבלי לתפוס את הרקמה שמתחתיו. חתך מסוג זה ידרוש 2-3 תפרים קטועים בודדים באמצעות 4-0 חומר תפר שאינו נספג.
24. יש לנקות את העור סביב אתר הניתוח בעדינות עם מי מלח ומוליך כותנה מעוקר כדי להסיר דם מיובש או שאריות של פילינג אנטיספטי.

2. כריתת שחלות מורין

1. הכינו שדה עבודה אספטי וודאו שכלי הניתוח הדרושים עוקרו וזמינים. בצע שיטות אספטיות עבור ניתוח הישרדות מכרסמים.
2. רשום את משקל העכבר הנשי ונהל את שיטת ההרדמה המועדפת בהתאם להנחיות המוסדיות שלך. בפרוטוקול זה, 2% איזופלורן הועבר באמצעות וופורייזר מדויק לשמירה על הרדמה. לפני ההליך, יש לתת תרופות נגד כאבים בהתאם להנחיות המוסדיות. בפרוטוקול זה, 1.0 מ"ג / ק"ג Buprenorphine SR ו 5 מ"ג / ק"ג Meloxicam הועברו תת עורית.
3. יש למרוח ג'ל עיניים משמן על עיני בעל החיים כדי למנוע היווצרות פגיעה בעיניים, התייבשות הקרנית או כיב. ודא מקור חום זמין כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של בעל החיים במהלך הניתוח. ודא את מישור ההרדמה הנכון על ידי בדיקת תגובת צביטת הבוהן.
4. הכינו את האזור הכירורגי של בעל החיים לפני הכנסתו לשדה הניתוח.
   1. יש לגלח בעדינות את השיער על האזור הגבי של גב החיה באמצעות זוג קוצצים. הסר שיער מהאזור שמעל הגבול העליון של הירכיים ומתחת לגבול התחתון של כלוב הצלעות, כמו גם את האזורים שבין ציוני דרך אלה.
   2. בעזרת מוליך צמר גפן, מרחו שכבה של קרם מסיר שיער על עור החיה, וכיסו את האזור שזה עתה גולח. מחכים 30 שניות ומסירים את הקרם עם חתיכת גזה, מסירים את השערות העדינות שנותרו.
   3. השתמשו בספוג גזה ספוג אתנול 70% כדי לנגב את שאריות הקרם והשיער מאזור הניתוח.
      הערה: 70% אתנול בשלב זה הוא לסייע בהסרה מוחלטת של קרם depilatory. הכנה אנטיספטית של אתר הניתוח מתבצעת בשלב 2.5.
5. הניחו את בעל החיים במצב רוחבי (לחתך להסרת שחלה אחת בכל פעם) בשדה הניתוחי וודאו כי קיים מקור חום זמין. יש לקרצף את האזור הניתוחי עם פילינג כירורגי Betadine (או פילינג דומה להכנת עור מחטא), ולאחר מכן 70% אלכוהול לפחות שלוש פעמים כדי להבטיח חיטוי עור תקין. עבור כל קרצוף, יש לשפשף בתנועה רדיאלית כלפי חוץ, כך שאת אמצע החתך מקרצפים תחילה ואת הגבול החיצוני של אזור הניתוח המגולח אחרון.
6. בשלב זה, ללבוש כפפות כירורגיות סטריליות. עבור השלבים הבאים של ההליך, להשתמש בטכניקות אספטיות. מניחים וילון כירורגי עם חתך קטן בתוכו (חותכים ריבוע של כ 0.5-1 אינץ 'בווילון כדי להתאים לאתר הניתוח) מעל בעל החיים כך שהגוף מכוסה בחומר וילון.
7. אתר את המיקום האידיאלי עבור החתך הניתוחי על-ידי מציאת נקודת אמצע הדרך בין הירכיים והצלעות של העכבר (ראה איור 2). אחזו את העור במלקחיים ובצעו חתך של 1.0 ס"מ לתוך העור במיקום זה.
8. השתמש במכשיר קהה (בדיקה, מרית כירורגית, או hemostats קהה) כדי להפריד את העור מרקמת השריר שמתחת לרקמת השריר. קח זמן לעשות זאת על הגבולות הרוחביים, העליונים והנחותים של החתך.
9. אתר את דופן השריר הדורסולטרלי של הבטן. במידת הצורך, הסירו רקמת שומן שנמצאת בין שכבת העור לשכבת השריר. בעכברים בוגרים, רקמת שומן זו בולטת יותר. הזיזו את רקמת השומן לכיוון הקצה הקאודלי של העכבר, וחשפו את דופן השריר.
   1. רקמת השומן נבדלת מדופן הבטן בצבע: רקמת השומן נראית לבנה בהירה ושטחית יותר, ואילו דופן הבטן נראית ורודה ועמוקה יותר מרקמת השומן.
10. אחזו בדופן הבטן בעזרת מלקחיים של שיני חולדה ובצעו לתוכו חתך של 0.5 ס"מ.
11. תפסו גבול אחד של חתך זה עם זוג מלקחיים אחד, השתמשו בזוג שני כדי להגיע לתוך חלל הגוף, ומצאו את השחלה, קרן הרחם וכרית השומן. משכו אותו בעדינות דרך החתך בדופן השריר כדי להפריד את השריר מהרקמה שמתחתיו ולצאת ממנו. אתר את המעבר בין קרן הרחם לשחלה.
12. לחתוך את השחלה על ידי ביצוע טכניקת ריסוק וקרע.
    1. מניחים מהדק אחד בקצה הדיסטלי של קרן הרחם ומניחים את המהדק השני רק דיסטלי לראשון. תוך הפעלת לחץ חזק עם שני מלחציים, להרחיק את הדיסטלי יותר מהגוף, לקרוע את הקשר ביניהם. כדי למזער דימום ונזק לרקמות, שמור על מהדק פרוקסימלי נייח במהלך תהליך זה והיזהר לא למשוך אותו גם מהגוף.
    2. לחלופין, השתמש בצריבה. השתמש זוג מלקחיים או hemostats כדי להדק את קרן הרחם רק פרוקסימלי לנקודת הצריבה הרצויה. השתמש בכלי צריבה כדי לנתק את הרקמות.
13. שחררו בעדינות ובאיטיות את המהדק הפרוקסימלי ובדקו סימני דימום.
14. אפשרו לגדם הרקמה לסגת לתוך חלל הגוף. תפסו את דופן הבטן ומשכו בעדינות כלפי מעלה. אין לדחוף את גדם הרקמה פנימה, כמו זה מגדיל את הסבירות לדימום.
15. אתרו את גבולות החתך בדופן השריר וחברו אותם יחד כדי להתכונן לתפירתו.
16. יש להכניס 1-2 תפרים קטועים בודדים לדופן שריר הבטן באמצעות חומר תפר נספג 4-0. חותכים את קצות התפר עד 0.5 ס"מ באמצעות מספריים לתפר.
17. סגרו את החתך בכך שתאפשרו לעור לחזור למצב המנוחה הטבעי שלו ואז לסובב אותו כלפי מעלה, תוך זהירות שלא לתפוס את הרקמה שמתחתיו או את קצות חומר התפרים. יש להניח 1-2 אטבי פצעים על העור הקטוע. בהתאם להנחיות המוסדיות שלך, ניתן לסגור את העור גם באמצעות חומר תפר 4-0 שאינו נספג.
18. כדי להסיר את השחלה השנייה, החלף את מיקום העכבר כך שהצד השני הצדדי פונה כלפי מעלה. היו עדינים בעת החלפת תנוחת העכבר כדי לא להפעיל לחץ רב מדי על העור החתוך של הפצע משלב 2.17.
19. בצד זה, חזור על שלבים 2.5 - 2.17.
20. יש לנקות את העור סביב אתר הניתוח בעדינות עם מי מלח ומוליך כותנה מעוקר כדי להסיר דם מיובש או שאריות של פילינג אנטיספטי.

3. טיפול לאחר הניתוח

1. בהתאם להנחיות המוסדיות שלך, יש לתת תרופות נגד כאבים עד 72 שעות לאחר הניתוח. תעד את ההליך הכירורגי של בעלי החיים, תוך ציון התאריך, השעה, חומר ההרדמה ומשכך הכאבים שבהם נעשה שימוש. כאן, שחרור איטי Buprenorphine ו meloxicam מנוהל לפני הניתוח.
2. לאחר סיום הניתוח של בעלי החיים, העבירו אותם לכלוב נקי מרופד במגבת נייר יבשה. מניחים את הכלוב 2/3 על מקור חום, ומשאירים את 1/3 הכלוב האחרים מחום. אין להניח עכברים יחד בכלוב עד שהם התאוששו מההרדמה.
3. אפשרו לבעל החיים להחזיר לעצמו את היכולת להסתובב בחופשיות בכלוב לפני החזרתו לכלוב נקי עם מצעים רגילים של בעלי חיים. בשלב זה, עכברים יכולים להיות מאוחסנים יחד אם כולם התאוששו מהרדמה.
4. בימים הראשונים לאחר הניתוח, יש לוודא שמזון לח ומים נגישים בקלות. הניחו מעט אוכל לח בתחתית הכלוב. לעתים קרובות לבדוק על אתר כירורגי העכבר ולחפש כל סימנים של זיהום או דימום.
5. לאחר הניתוח, יש לוודא שהעכברים שוכנים לבדם או עם בעלי חיים אחרים שעברו את אותו הליך בו זמנית. עכבר המתאושש מניתוח הממוקם באותו כלוב כמו עכבר ללא ניתוח עלול להוות סכנה ויש להימנע ממנו.
6. עבור עכברות שעברו כריתת שחלות ויש להן קליפסים לפצעים בצידי הגב הגב, הסר את כל בתי הגידול של איגלו מכרסם מהכלוב כדי להפחית את הסיכוי שקליפ הפצע של העכבר ייתפס באיגלו במהלך השבוע הראשון לריפוי.
7. המשך לעקוב אחר בעל החיים לאיתור סימני זיהום, כאב או סיבוכים כירורגיים כל 12 שעות במהלך 72 השעות הראשונות של זמן הריפוי.
8. הסר אטבי פצעים באמצעות כלי מסיר קליפסים לפצע 10-14 יום לאחר הניתוח.

תוצאות

ההליך המוצג כאן מבוצע בעכברים בני חודש עד שלושה חודשים על רקע C57BL/6J. עכברים זכרים שקלו 16-28 גרם, ועכברות נקבות שקלו 14-24 גרם בזמן ההליך. הליך זה הותאם כך שיהיה ישים עבור עכברים בגילאים רבים, החל מהגמילה ועד לבגרות.

כריתה כירורגית כוללת חתך עור יחיד בשק האשכים הגחוני, כפי שמתואר

Discussion

הסרה כירורגית של אשכים ושחלות מאפשרת ללמוד פיזיולוגיה של מורין תחת חסך הורמונלי מבוקר. טכניקה זו חשובה עבור תחומים רבים של מדע, כולל ניוון עצבי, מטבוליזם מינרלי, לב וכלי דם, ובריאות הרבייה 15,16,17,18,19,20,21....

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1mL Syringe	BD	309659
30G 1/2" Needle	BD	305106
AutoClip System	Fine Science Tools	12020-00
Betadine Solution	Fisher Scientific	NC0158124
Cotton-Tipped Applicators	Fisher Scientific	10-000-692
Double -ended Micro Spatula	Fine Science Tools	10091-12
Galilean Loupes	Fine Science Tools	28050-30	Optional, can provide better clarity during procedure
Gauze Sponges, 4"x4"	Fisher Scientific	13-761-52
Graefe Forceps	Fine Science Tools	11150-10
High Temp Cautery Kit	Fine Science Tools	18010-00	Using the fine tip attachment
Needle Holders	Fine Science Tools	12001-13
PGA Absorbable Suture:4-0 / NFS-2 Reverse Cutting 19MM / 30 IN	Covetrus	29242	4-0 or 5-0 Absorbable sutures are best
Rodent Warming pad	Kent Scientific	RT-0515
Sterile Alcohol Prep Pads	Fisher Scientific	22-363-750
Straight Locking Micro Needle Holders	Fine Science Tools	12060-01
Surgical Scissors	Fine Science Tools	140-60-09
Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge	Fine Science Tools	15000-08
Veet Sensitive Hair Remover Gel Cream	Amazon	N/A
Wahl Professional Animal Compact Trimmer and Grooming Kit, Blue	Amazon	#9861-900