פרוטוקול זה מספק שיטה benchtop להערכת היעילות ומנגנוני הפעולה של טיפול תרומבוליטי בסיוע היסטוטריפסיה או ליזוטריפסיה, גישה חלופית לא פולשנית לטיפול פקקת ורידים עמוקים קריטיים. טכניקה זו משתמשת בפעילות בועה כדי להיות השפעה דו כיוונית באמצעות פיברינוליזה מוגברת עקב משלוח ליטיק משופר ואת המוליזה של תאי דם אדומים בתוך הקריש. גישה זו של הספסל לטיפול בפקקת ורידים עמוקים מקלה על מידול קרישי דם, טיפול בליזוטריפסיה והדמיה סימולטנית במהלך הטיפול.
ניתן להשתמש בהמשך ביצירת ענן בועה, תכנון טיפול והדרכה בתמונה כדי לחקור טיפולים מבוססי היסטוטרפסיה במבחנה של מחלות אחרות, כגון גידולים בכליות ובכבד. כדי להגדיר את מקור היסטוטריפסיה, התקן את המקור על מערכת מיקום ממונעת. לכסות את מערך ההדמיה עם כיסוי בדיקה ולתקן את המערך באופן קואקסיאלי בצמצם של מקור היסטוטריפסיה.
חבר את מערך ההדמיה למערכת סריקת אולטרסאונד והטביע לחלוטין את מקור היסטוטריפסיה ומערך ההדמיה במיכל. השתמש במזרק כדי להסיר בעדינות את כל בועות האוויר ולהשתמש במערך ההדמיה והסורק כדי להשיג תמונות מים במצב B מנוקה במהירות של 20 פריימים לשנייה. בעת רכישת התמונות, התאם את מיקום מערך ההדמיה בתוך פתח מתמר הקונפוצלי עד שענן הבועה ממוקם בערך במרכז חלון התמונה ותיעד את מיקום המוקד שזוהה בחלון ההדמיה.
לאחר מכן להפסיק את insonation ולהגדיר את המתח החל על מקור היסטוטריפסיה לאפס. כדי להכין קריש לניתוח, להשתמש צבת כדי לחתוך את הקצה האטום של pipette המכיל קריש ולתת קריש סרום להחליק לתוך צלחת פטרי. השתמש באזמל כדי לחתוך את הקריש לאורך סנטימטר אחד ולהשתמש ניגוב ניקוי בעדינות כתם את סעיף החתך כדי להסיר כל נוזל עודף.
השתמש פינצטה למקם בזהירות את החלק של קריש על קנה מידה ולרשום את המשקל. לאחר מכן, להעלות באופן ידני את ערוץ הזרימה מתוך מיכל מים אוסמוזה הפוכה מגסה ולהסיר את כלי המודל מן הערוץ. השתמש פינצטה כדי למקם בזהירות את הקריש לתוך כלי המודל מבלי לפגוע קריש ולחבר את הכלי לערוץ הזרימה.
הורידו את ערוץ הזרימה למיכל כך שהקצה הפרוקסימלי של הבמה ביחס למאגר נמוך בהשוואה לצד הדיסטלי, והשתמשו בצינור כדי להוסיף 30 מיקרוליטרים של 37 מעלות צלזיוס חיממו פלזמה למאגר. נטר את טמפרטורת מיכל המים עד שהוא מגיע לפחות 36 מעלות צלזיוס, ולהשתמש pipette להוסיף 80.4 מיקרוגרם של rt-PA למאגר הפלזמה. כדי להפעיל את ערוץ הזרימה, השתמש במשאבת מזרק כדי למשוך פלזמה מהמאגר לתוך הערוץ עד שכלי הדגם יתמלא.
לאחר מכן, החלק ידנית את כלי הדגם כדי להבטיח שלא קיימות בועות אוויר בחללית הדגם, כפי שניתן לראות בחלון ההדמיה. כדי לתכנן נתיב למקור היסטוטרפסיה ומערך הדמיה לחשיפה היסטוטרפסיה אחידה לאורך אורך הקריש, השתמש בתסריט ההדמיה כדי להשתמש במיצבים הממונעים כדי ליישר את מערך ההדמיה במקביל לאורך הקריש ולאשר כי אין בועות אוויר קיימות בכלי. השתמש במיצבים הממונעים כדי ליישר את מערך ההדמיה כך שמישור ההדמיה מקביל לחתך של הקריש.
באמצעות חלון ההדמיה כמדריך, העבר את מקור היסטוטרפסיה לקצה הפרוקסימלי של הקריש, יחסית למאגר. כדי לקבוע את נתיב ההסתה לאורך אורך הקריש, להגדיר נקודות ציון לאורך הקריש במרווחים של חמישה מילימטרים. לפני השלמת כל נקודת ציון, בדיקות אש פולסים ממקור היסטוטריפסיה עם אותם פרמטרי אינסונציה כפי שהוכח, אבל עם החשיפה הכוללת מופחתת ל 10 פולסים הכוללים.
בכל נקודת אופן, שמור את מיקומי המנוע באמצעות הפקודות המיועדות על-ידי היצרן. כדי לטפל קריש לאורך אורכו על פי הנתיב המוגדר בשלב טרום הטיפול, להגדיר את משאבת המזרק ל 0.65 מיליליטר לדקה, ולחכות המניסקוס של הפלזמה לזוז. אינטרפולציה של נתיב הטיפול עם שלבי ביניים בין נקודות הציון שנקבעו עם גודל שלב קבוע, והשתמשו במיצבים כדי להזיז את מקור ההיסטוטריפסיה בכל מיקום נתיב, באמצעות הפרמטרים המקוריים שנקבעו בהתאמה.
לאחר מכן, צור סקריפט כדי להגדיר את מערך ההדמיה כדי להשיג תמונה במצב B של כלי הקריש והדגם כמה שניות לפני היישום של פעימת היסטוטרפסיה בכל מיקום. לאחר מכן להחיל את פעימת היסטוטריפסיה בכל נקודת ציון, רכישת הפליטות האקוסטיות בתסריט כדי ליצור תמונות cavitation פסיבי לאחר הניתוח. השתמש בחלון ההדמיה כדי לדמיין את פעילות הבועה במהלך היישום של פעימת היסטוטריפסיה בכל מיקום נתיב.
לאחר הניתוח, הרימו ידנית את כלי הדגם ממיכל המים כדי לנקז את ההזדחה באמצעות כוח המשיכה, והשתמשו במשאבת המזרק כדי למשוך את תמיסת הפלזמה מערוץ הזרימה כדי לאפשר איסוף של כל ההזדחה בכוס קטנה. נתק את כלי הדגם והסר את הקריש. ואז לנגב את הקריש עם רקמות מעבדה ולשקול את קריש כדי להעריך את אובדן מסת קריש.
עם יישום של מתח מספיק למקור היסטוטריפסיה, ענן בועה נוצר באזור המוקד של המתמר ודמיוני באמצעות הדמיית אולטרסאונד. מיקום המוקד מוגדר כמרכז ענן הבועה. שליטה זו זלוף של קריש שנחשף פלזמה לבד, וזה זלוף של קריש שטופלו ליזוטריפסיה שימשו להערכת התוכן המוגלובין ו D-dimer כפי שהודגם.
השונות בריכוז המוגלובין יכולה להיות מכמתת על ידי ספיגה אופטית. כאן, קריש יכול להיות חזותי בתוך כלי מודל באמצעות הדמיה במצב B לפני חשיפה היסטוטרפסיה כדי לקבוע את מיקום הקריש עבור פילוח של תמונת cavitation פסיבי. כפי שתמונה פסיבית זו נרשמה יחד עם תמונת מצב B של הקריש מאשרת, האנרגיה האקוסטית כלולה בעיקר בתוך הקריש במהלך החשיפה להיסטוטרפסיה.
בדגימות שנחשפו להיסטוטרפסיה, ההפרעה מוגבלת בעיקר למרכז קריש הדם, בהתאם למיקומים הנצפים של פעילות הבועה במעקב באמצעות הדמיית cavitation פסיבי. עם תוספת של ליטיק, אובדן המוני מתרחש גם באזורים קרובים יותר לפריפריה של קריש. לחלופין, ליפוזומים אקולוגיים המכילים rt-PA ניתן להשתמש במקום משלוח מערכתי rt-PA כדי לאפשר הערכה של אספקת סמים ממוקדת לקריש.
ליזוטריפסיה מספקת גישה חלופית לא פולשנית לטיפול במחלות רבות. פרוטוקול במבחנה זה מאפשר הערכה של יעילות הטיפול והצלחתו הפוטנציאלית ביישום vivo.
