טיפול סיסטמי בעכברות לאחר לידה, נוער ועכברים בוגרים על ידי הזרקת סינוס רטרובולברית

המחקר שלנו כולל פיתוח של טיפולים גנטיים להפרעות גנטיות נדירות, במיוחד עם דגש על קבוצה של הפרעות מטבוליות הידועות בשם חומצה אורגנית. מטרת המחקר שלנו היא לקבוע אילו גישות עשויות להיות המתאימות ביותר להתקדמות לניסויים קליניים בבני אדם. טיפולים גנטיים מרובים מאושרים לטיפול במגוון מחלות גנטיות, מה שלא היה המצב לפני עשור.

למעשה, מספר ניסויים קליניים בריפוי גנטי עבור חומצה אורגנית הושלמו, מתמשכים או מתוכננים. העברה מערכתית למודלים שיקוף של מחלות גנטיות חמורות יכולה להיות מאתגרת מכיוון שהעכברים עשויים שלא להגיע לגודל בוגר. פרוטוקול הזרקת רטרובולבר זה יאפשר בדיקה של טיפולים גנטיים במודלים שיקוף עם פנוטיפים קשים ובתקווה יאפשר פיתוח טיפולים חדשים לחולים.

כדי להתחיל, לדלל את AAV לנפח ההזרקה הרצוי ולריכוז הרצוי עם PBS סטרילי בצינור מיקרו צנטריפוגה סטרילי של 1.5 מיליליטר לכל הזרקה. לפני מילוי המזרק הסטרילי לשימוש חד פעמי, הזיזו את הבוכנה למעלה ולמטה מספר פעמים כדי להבטיח שניתן יהיה ללחוץ על הבוכנה בצורה חלקה. לאחר מכן ממלאים את המזרק לנפח הרצוי ומבטיחים שאין בועות אוויר.

אם אתה ימני, מקם את העכבר המרדים על צדו השמאלי כשהחוטם מצביע לכיוון יד ימין כדי להזריק לעין ימין. לאחר מכן, להחיל טיפה אחת או שתיים של הרדמה אופתלמית על גלגל העין להיות מוזרק. באמצעות פד גזה סופג סטרילי להסיר כל תמיסת הרדמה אופתלמית עודפת.

הפעל לחץ עדין עם קצות האצבעות על העור, הגב והגחון לעין כדי להבליט חלקית את גלגל העין של העכבר מהשקע. כעת, הכנס את שיפוע המחט בזווית של 30 מעלות לתוך הקנתוס המדיאלי. לאט ובצורה חלקה להפעיל לחץ על הבוכנה מזרק כדי לספק את ההזרקה.

לבסוף, הסר את מסכת הפנים מהעכבר כדי לאפשר התאוששות מהרדמה. הביטוי של מתילמלוניל קואנזים CoA mutase RNA נצפה בהפטוציטים ומצביע על הזרקה רטרובולברית מוצלחת.