Bioluminescenza e vicino infrarosso Imaging di neurite ottica e cervello infiammazione nel modello EAE della sclerosi multipla nei topi

Katja Schmitz; Irmgard Tegeder

doi:10.3791/55321

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Riepilogo
Abstract
Introduzione
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Riepilogo

Mostriamo una tecnica per bioluminescenza vivo in vivo e vicino infrarosso per immagini di neurite ottica ed encefalite nel modello di encefalomielite autoimmune sperimentale (EAE) per la sclerosi multipla in topi SJL / J.

Abstract

Encefalomielite autoimmune sperimentale (EAE) in SJL / J topi è un modello per la sclerosi multipla recidivante-remittente (RRMS). punteggi EAE clinici che descrivono i deficit delle funzioni motorie sono letture di base della infiammazione immuno-mediata del midollo spinale. Tuttavia, i punteggi e il peso corporeo non permettono una valutazione in vivo di infiammazione del cervello e neurite ottica. Quest'ultima è una manifestazione precoce e frequente in circa 2/3 dei pazienti con SM. Qui vi mostriamo i metodi per bioluminescenza e vicino infrarosso immagini dal vivo per valutare EAE evocato neurite ottica, infiammazione del cervello, e la barriera emato-encefalica interruzione (BBB) nei topi che vivono con un sistema di imaging in vivo in. Un substrato bioluminescente attivato da ossidasi soprattutto ha mostrato neurite ottica. Il segnale era specifico e ha permesso la visualizzazione degli effetti di farmaci e gli andamenti temporali di malattia, che in parallelo i punteggi clinici. nanoparticelle fluorescenti pegilato che sono rimasti all'interno del vasculature per lunghi periodi di tempo sono stati utilizzati per valutare l'integrità BBB. Vicino infrarosso di imaging rivelato una perdita BBB al picco della malattia. Il segnale era più forte intorno agli occhi. Un substrato vicino infrarosso per metalloproteinasi della matrice è stato utilizzato per valutare l'infiammazione EAE-evocato. Auto-fluorescenza interferiva con il segnale, che richiede unmixing spettrale per la quantificazione. Nel complesso, imaging bioluminescenza è un metodo affidabile per valutare neurite ottica e farmaci effetti EAE-associata e era superiore alle tecniche vicino infrarosso in termini di specificità del segnale, robustezza, facilità di quantificazione, e costo.

Introduzione

Multiple sclerosis is caused by the autoimmune-mediated attack and destruction of the myelin sheath in the brain and the spinal cord¹. With an overall incidence of about 3.6 cases per 100,000 people a year in women and about 2.0 in men, MS is the second most common cause of neurological disability in young adults, after traumatic injuries²^,³. The disease pathology is contributed to by genetic and environmental factors⁴ but is still not completely understood. Autoreactive T lymphocytes enter the central nervous system and trigger an inflammatory cascade that cause....