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In questo articolo

  • Riepilogo
  • Abstract
  • Introduzione
  • Protocollo
  • Risultati
  • Discussione
  • Divulgazioni
  • Riconoscimenti
  • Materiali
  • Riferimenti
  • Ristampe e Autorizzazioni

Riepilogo

In questo studio, un modello di ratto di induzione della parodontite è presentato attraverso una combinazione di legatura ritentiva e iniezioni ripetitive di lipopolisaccaride derivato da Porphyromonas gingivalis, per 14 giorni intorno ai primi molari mascellari. Le tecniche di legatura e iniezione di LPS sono state efficaci nell'indurre la peridontite, con conseguente perdita ossea alveolare e infiammazione.

Abstract

La parodontite (PD) è una malattia immuno-infiammatoria cronica altamente prevalente del parodonto, che provoca una perdita dei tessuti molli gengivali, del legamento parodontale, del cemento e dell'osso alveolare. In questo studio, viene descritto un semplice metodo di induzione del PD nei ratti. Forniamo istruzioni dettagliate per il posizionamento del modello di legatura attorno ai primi molari mascellari (M1) e una combinazione di iniezioni di lipopolisaccaride (LPS), derivato da Porphyromonas gingivalis sul lato mesio-palatale della M1. L'induzione della parodontite è stata mantenuta per 14 giorni, promuovendo l'accumulo di biofilm batterico e l'infiammazione. Per convalidare il modello animale, IL-1β, un mediatore infiammatorio chiave, è stato determinato mediante un saggio immunologico nel liquido crevicolare gengivale (GCF) e la perdita ossea alveolare è stata calcolata utilizzando la tomografia computerizzata a fascio conico (CBCT). Questa tecnica è stata efficace nel promuovere la recessione gengivale, la perdita ossea alveolare e un aumento dei livelli di IL-1β nel GCF alla fine della procedura sperimentale dopo 14 giorni. Questo metodo è stato efficace nell'indurre la malattia di Parkinson, potendo così essere utilizzato in studi sui meccanismi di progressione della malattia e sui futuri possibili trattamenti.

Introduzione

La parodontite (PD) è la sesta condizione di salute pubblica più diffusa in tutto il mondo, che colpisce circa l'11% della popolazione totale, essendo una forma avanzata, irreversibile e distruttiva di malattia parodontale 1,2. Il PD è un processo infiammatorio che colpisce i tessuti gengivali e parodontali, che provoca la recessione gengivale, la migrazione apicale dell'epitelio giunzionale con sviluppo della tasca e la perdita dell'osso alveolare3. Inoltre, la malattia di Parkinson è associata a diverse malattie sistemiche, tra cui malattie cardiovascolari, obesità, diabete e artrite ....

Protocollo

NOTA: Il protocollo sperimentale dello studio è stato approvato dal Comitato Etico di Sperimentazione Animale dell'Istituto di Ricerca Sanitaria delle Isole Baleari (CEEA-UIB; numero di riferimento 163/03/21).

1. Anestesia animale e preparazione della procedura

  1. Sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici (bavagli in alluminio, esploratore dentale, lancia diamantata, forbici chirurgiche, pinze microchirurgiche, un micro portaaghi, un intagliatore hollenback, un elevatore microchirurgico periostale e forbici microchirurgiche) (5 min a 135 °C) prima dell'intervento.
  2. Preparare tutte le soluzioni necessarie p....

Risultati

Una sequenza temporale delle fasi sperimentali è presentata nella Figura 1. La figura 2A mostra un'immagine della mandibula dopo l'intervento chirurgico, con il posizionamento della legatura attorno al solco di M1 al tempo 0 dell'esperimento. La figura 2B mostra come, dopo 14 giorni dalla procedura, la legatura intorno alla M1 entra nel solco gengivale, causando infiammazione della gengiva e accumulo infiltrante.

Discussione

Questo metodo descrive l'induzione del PD nei ratti seguendo una tecnica combinata di iniezioni di Pg-LPS e posizionamento della legatura intorno alla M1, rivelando che cambiamenti significativi nei tessuti parodontali e nell'osso alveolare potrebbero essere indotti in 14 giorni dopo questo metodo.

Durante questa procedura, deve essere fornita attenzione a diversi passaggi critici. Durante l'anestesia animale e la preparazione della procedura, valutare la corretta anestesia durante il.......

Divulgazioni

Gli autori non dichiarano alcun conflitto di interessi.

Riconoscimenti

Questo lavoro è stato sostenuto dalla Fundació Universitat-Empresa de les Illes Balears (Proof of concept call 2020), dall'Instituto de Salud Carlos III, dal Ministerio de Economía y Competividad, cofinanziato dal Fondo sociale europeo FSE e dal Fondo europeo di sviluppo regionale del FESR (contratto con M.M.B; FI18/00104) e dalla Direcció General d'Investigació, Conselleria d'Investigació, Govern Balear (contratto con M.M.F.C; FPI/040/2020). Gli autori ringraziano la dottoressa Anna Tomás e Maria Tortosa per il loro aiuto alla chirurgia sperimentale e alla piattaforma di IdISBa. Infine, grazie ad ADEMA School of Dentistry per l'accesso allo scanner CBCT.

....

Materiali

NameCompanyCatalog NumberComments
Adsorbent paper point nº30 Proclinc8187
AprotininSigma-AldrichA1153
AtipamezoleDechra573751.5Revanzol 5 mg/mL
Braided silk ligature (5/0) Laboratorio Arago Sl613112
Buprenorphine Richter pharma578816.6Bupaq 0.3 mg/mL
Cone-beam computed tomography (CBCT) Scanner MyRayhyperion X9Model Hyperion X9
CTAn softwareSkyScanVersion 1.13.4.0
Dental explorer Proclinc99743
Diamond lance-shaped bur DentaltixIT21517
Food maintenance dietSodispain researchROD14 
Heated surgical platformPetSavers
Hollenback carverHu-FRIEDY HF45234
Hypodermic needle  BD 30060025G X 5/8” - 0,5 X 16 MM
Isoflurane KarizooIsoflutek 1000mg/g
Ketamine  Dechra581140.6Anesketin 100 mg/mL
Lipopolysaccharide  derived from P.Gingivalis InvivoGenTLRL-PGLPS
MethanolFisher ScientificM/4000/PB08
Micro needle holterFehling Surgical InstrumentsKOT-6
Microsurgical pliersKLS Martin12-384-06-07
microsurgical scissors S&T microsurgical instrumentsSDC-15 RV
Monitor iMEC 8 VetMindray 
Multiplex bead immunoassayProcartaplex, Thermo fisher ScientificPPX-05
Paraformaldehyde (PFA) Sigma-Aldrich8187151000
Periosteal microsurgical elevator DentaltixCU19112468
Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) Roche10837091001
Phosphate Buffer Solution (PBS)Capricorn ScientificPBS-1A
PhosSTOP Roche4906845001Commercial phosphatase inhibitor tablet 
Plastic vialSPL Lifesciencies600151.5mL
SalineCinfa204024.3
Stereo Microscope ZeissModel SteREO Discovery.V12
Surgical loupes led lightZeiss
Surgical scissors Zepf Surgical08-1701-17
Syringe BD plastipak3031721mL
Veterinary dental micromotorEickemeyer174028
XylazineCalier20102-003Xilagesic 20 mg/mL

Riferimenti

  1. Carvalho, J. D. S., et al. Impact of citrus flavonoid supplementation on inflammation in lipopolysaccharide-induced periodontal disease in mice. Food and Function. 12 (11), 5007-5017 (2021).
  2. Nazir, M. A.

Ristampe e Autorizzazioni

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