Dissezione della stria vascolare del topo adulto per sequenziamento di singoli nuclei o immunocolorazione

La stria vasculare funziona per generare il potenziale endococleare e regolare l'omeostasi ionica nella coclea. Il programma di sviluppo e ripristino uditivo cerca di comprendere i meccanismi sottostanti che collegano l'omeostasi ionica disfunzionale con i disturbi dell'udito e della stabilità, che sono malattie in cui si verifica una fluttuazione o un'improvvisa perdita dell'udito. Il lavoro nel mio laboratorio ha stabilito il paesaggio trascrizionale della stria vascolare e ha contribuito alla nostra comprensione della sua importanza nell'udito.

Abbiamo usato questi dati per tracciare parallelismi con disturbi dell'udito e della stabilità poco compresi, tra cui la malattia di Meniere. Questo protocollo consente la dissezione e l'isolamento della stria vascolare a montaggio intero per ulteriori studi molecolari tra cui l'immunoistochimica. Dato che i tipi di cellule della stria vascolare sono strettamente intrecciati tra loro, l'uso dell'isolamento nucleare e del sequenziamento dell'RNA a singolo nucleo ha facilitato la nostra comprensione del distinto meccanismo trascrizionale coinvolto.