Per iniziare, posizionare i vetrini con le sezioni endometriali colorate immunoistochimicamente sul rack dei vetrini di uno scanner di immagini patologiche panoramiche. Quindi, posizionare il rack nello scomparto di scansione a vetrini dello strumento per avviare la scansione. Una volta completata la scansione, avviare il software di analisi delle immagini e creare una nuova cartella.
Importare le immagini che richiedono l'analisi. Per creare un classificatore di tessuti, contrassegnare diversi tessuti insieme a un'annotazione vuota per stabilire un classificatore che identifichi il tessuto e le aree vuote. Utilizzare l'ottimizzazione in tempo reale per osservare la capacità di riconoscimento del software durante l'annotazione del contrassegno.
Per creare un algoritmo di analisi, selezionare l'algoritmo IHC multiplex standard nel software e scegliere i pixel negativi e positivi per impostare i parametri di colore del riconoscimento delle celle. Stabilire i parametri del nucleo, del citoplasma e della membrana cellulare fino a trovare i parametri ottimali per l'immagine. A questo punto, impostare la soglia positiva di riconoscimento delle cellule e ottimizzarla fino a ottenere una soglia appropriata.
Selezionare quindi il classificatore di tessuti nell'algoritmo. Controlla la parte di tessuto al suo interno per identificare le cellule in base ai tessuti. Selezionare l'area di analisi e quindi utilizzare l'algoritmo stabilito per analizzare le immagini.
Una volta completata l'analisi, controllare manualmente l'accuratezza del riconoscimento tissutale, del riconoscimento negativo e positivo. Se il riconoscimento dell'immagine non è accurato, regolare nuovamente l'algoritmo e le soglie dei parametri. Eseguire l'analisi dell'immagine fino a quando non ha esito positivo.
Quindi, esportare i risultati dell'analisi. Impostare i diversi parametri di analisi in base all'espressione di diversi marcatori immunitari endometriali. Usa il software per calcolare la proporzione di cellule immunitarie endometriali.
Dopo il calcolo, utilizzare i valori per valutare i livelli di varie cellule immunitarie nell'endometrio di pazienti con aborto spontaneo ricorrente. Diverse cellule immunitarie sono state colorate immunoistochimicamente in base alla loro espressione individuale di diversi marcatori. La macchia marrone rappresenta le cellule immunitarie positive e il blu rappresenta il nucleo.
Diverse cellule immunitarie sono state espresse nelle donne con aborti spontanei ricorrenti. Le cellule CD56 sembrano essere predominanti al 16,76%, con le cellule CD1a e Foxp3 che costituiscono lo 0,11-0,12% della popolazione di cellule immunitarie.
