Questo progetto è stato finanziato dal Land Baden-Württemberg, nonché dall&#39;Unione Europea, Europäischer Fonds für die Entwicklung Regionale. Gli autori ringraziano Rainer Wittig (ILM Ulm) per fornire la linea cellulare U251-MG-L106-GRX1-roGFP2 e Claudia Hintze per l&#39;assistenza tecnica abile.

1 Cella Coltivazione Spheroid e incubazione <ol><li> Esperimento 1: Cellulari sferoidi incubate con un farmaco chemioterapico <ol><li> Preparare agarosio 1,5% in terreno di coltura con l&#39;aggiunta di 0,45 g di agarosio a 30 ml di terreno di coltura (sufficiente per 6 piastre). </li><li> Scaldare la miscela dal punto 1.1.1 ad almeno 80 ° C agitando di tanto in tanto. </li><li> Riempire 50 ml di miscela riscaldata dal punto 1.1.2 in ciascun pozzetto di una piastra a 96 pozzetti e lasciare solidificare in 1-2 ore. Conservare le piastre chiuse e coperte in frigorifero a 5 ° C fino al momento dell&#39;uso. </li><li> Seed circa 150 MCF-7 cellule di cancro al seno in ciascun pozzetto della piastra preparata a 96 pozzetti in Modified mezzo di Eagle Dulbecco (DMEM) con mezzo di F-12 cultura del prosciutto supplementato con 10% di siero fetale bovino (FCS) e 1% di penicillina / streptomicina . </li><li> Crescere sferoidi per 5-7 giorni fino ad un diametro di circa 200-300 micron in un incubatore al 5% di CO 2 e 3776; C. </li><li> Incubare le sferoidi di cellule con antracicline doxorubicina cloridrato antibiotico per 6 ore ad una concentrazione compresa tra 2 e 8 mM mM (in terreno di coltura) in un incubatore al 5% di CO 2 e 37 ° C. </li><li> Lavare gli sferoidi cellulari con terreno di coltura o di soluzione salina bilanciata di Earle (EBSS) prima di microscopia. </li></ol></li><li> Esperimento 2: processo di ossidazione in sferoidi che esprimono un sensore di redox <ol><li> Seed circa 400 cellule di glioblastoma U251-MG-L106 trasfettate stabilmente con il glutatione sensore redox verde fluorescente sensibile GRX1-roGFP2 in pozzi gel-rivestito agarosio (procedura descritta nei passaggi 1.1.1-1.1.3) di una piastra a 96 pozzetti in DMEM mezzo di coltura supplementato con 10% FCS, 1% di penicillina / streptomicina e igromicina B (150 mcg / ml). </li><li> Crescere sferoidi per 5-7 giorni fino ad un diametro di circa 200-300 micron in un incubatore al 5% di CO 2 e 37 ° C. </li><li> Aggiungere 10 &amp; #181, l di soluzione di perossido di idrogeno (purum pa, ≥ 30%) per 990 ml di acqua bi-distillata per creare una soluzione madre di 100 mM per essere utilizzato entro le 12 ore. </li><li> Diluire la soluzione stock a partire dal punto 1.2.3 a 50 micron di EBSS destra prima dell&#39;esperimento. </li><li> Incubare le sferoidi di cellule attraverso il sistema di microfluidica durante la misurazione con acqua ossigenata 50 micron di EBSS per l&#39;ossidazione del sensore di redox. </li></ol></li><li> Esperimento 3: Iniziazione e l&#39;etichettatura di necrosi cellulare all&#39;interno di sferoidi <ol><li> Seed circa 400 cellule (ad esempio, U251-MG-L106-GRX1-roGFP2 cellule di glioblastoma) in pozzetti di gel-rivestito agarosio (procedura descritta nei passaggi 1.1.1-1.1.3) di una piastra a 96 pozzetti in terreno di coltura DMEM supplementato con 10% FCS, 1% di penicillina / streptomicina e igromicina B (150 mg / ml). </li><li> Crescere sferoidi per 5-7 giorni fino ad un diametro di circa 200-300 micron in un incubatore al 5% di CO 2 e 37 ° C. </li><li> Incubare la cellasferoidi con l&#39;mitocondriale di trasporto degli elettroni inibitore rotenone per 3 ore ad una concentrazione di 1 mM in mezzo di coltura per indurre necrosi cellulare. Inoltre, co-incubare con una citotossicità colorante verde per 3 ore ad una concentrazione di 1 ml in 1 ml di terreno di coltura per etichettare le cellule necrotiche. </li><li> Lavare gli sferoidi di cellule con terreno di coltura o EBSS prima di microscopia. </li></ol></li></ol> 2 Regolazione foglio leggero NOTA: Per ottenere i migliori risultati che è necessario garantire che la vita fascio del foglio luce è nel piano di messa a fuoco della lente dell&#39;obiettivo. La posizione della cintura fascio può essere allineato soltanto in base al foglio leggero in posizione verticale rispetto al capillare (vedi i punti 2,5-2,8). <ol><li> Utilizzare un microscopio invertito e montare il modulo di eccitazione SPIM, come descritto in rif. 16, alla piastra di base della tabella di posizionamento (vedere Figura 1A). </li><li> Dotare il microscopio con un 10X / o 20X 0,3 / 0,5 microscopio lente obiettivo e un appropriato filtro passa-lunga (ad esempio, λ ≥ 515 nm) nel percorso rilevamento del microscopio. </li><li> Montare una telecamera integrazione alla porta di rivelazione del microscopio. </li><li> Utilizzare un fascio collimato parallelo di un laser o un diodo laser con una lunghezza d&#39;onda di eccitazione di 470 nm e preferenzialmente applicarlo al modulo SPIM. </li><li> Ruotare la lente cilindrica di 90 gradi, che trasferisce il foglio leggero in una posizione verticale per una regolazione assiale del fascio vita del foglio leggero. </li><li> Inserire un capillare contenente un liquido con un colorante fluorescente nel portacampioni. </li><li> Fissare il supporto del campione con il capillare al tavolo di posizionamento del microscopio e allineare la posizione del capillare tale che sia centrato e la vita fascio del foglio leggero è a fuoco. </li><li> Regolare la vita fascio tramite la variazione della posizione assiale della lente cilindrica stessa. Tornare indietro l&#39;obiettivo dopo annuncioalcuna regolazione. </li></ol> 3. cellulare Spheroid Applicazione e sincronizzazione feed Microscopio <ol><li> Posizionare le sferoidi di cellule separatamente o in gruppi all&#39;interno di borosilicato capillari di vetro rettangolare 16 con una sezione trasversale interna di 600 micron x 600 micron ed uno spessore di 120 micron. Due tecniche per l&#39;applicazione di uno sferoide cellule hanno dimostrato di avere successo. <ol><li> Prendete il capillare vuoto in posizione verticale con il pollice e il dito medio e sigillare l&#39;apertura superiore con il dito indice. Portare l&#39;apertura inferiore vicino al sferoide cellulare nel suo liquido circostante (EBSS o terreno di coltura). Rilasciare il dito indice dall&#39;apertura superiore. Liquido con la sferoide cellule in esso sarà messo a bagno in subito da forze capillari. Regolare la posizione dello sferoide all&#39;interno del capillare riempito da gravitazione nella rispettiva posizione verticale del capillare. </li><li> In alternativa, applicare il sferoide cella alla capillare mediante pipettaggio. Fate attenzione that l&#39;apertura della punta della pipetta è, da un lato, abbastanza grande per la dimensione sferoide e, dall&#39;altro, minore o uguale di dimensioni al diametro interno del capillare. </li></ol></li><li> Posizionare il capillare con la sferoide in in un supporto speciale campione per la microscopia. </li><li> Fissare il supporto del campione con il capillare al tavolo di posizionamento del microscopio e allineare la posizione dello sferoide cella tale che sia centrata e focalizzata. </li><li> Impostare la corrispondenza tra il foglio leggero ed il piano focale del microscopio lente obiettivo nel percorso rilevamento regolando la posizione dello specchio di riflessione e la lente cilindrica (vedi vite di regolazione nella Figura 1B). </li><li> Regolare la vite micrometrica (vedi Figura 1B) secondo gli indici di rifrazione e l&#39;apertura numerica della lente dell&#39;obiettivo per compensare l&#39;effetto di acquario. NOTA: diversi indici di rifrazione del campione e dei media t circostantiegli lente piombo obiettivo di una differenza tra lo spostamento della lente dell&#39;obiettivo e lo spostamento del piano focale. Poiché il foglio leggero viene spostato dalla torretta obiettivo, la mancata corrispondenza tra lo spostamento del foglio leggero (corrispondente allo spostamento della lente dell&#39;obiettivo) e lo spostamento del piano focale è compensata da un braccio di leva (vedere Figura 1B). La vite micrometrica viene utilizzata per adattare la distanza tra la parte superiore e il perno inferiore per regolare lo spostamento del foglio leggero secondo l&#39;apertura numerica della lente obiettivo e gli indici di rifrazione. </li></ol><img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51993/51993fig1highres.jpg" width="500" /> Figura 1 (A) Immagine del singolo modulo illuminazione aereo montato sul basamento del tavolo di posizionamento di un microscopio invertito, (B) la configurazione del singolo piano di illuminazionemodulo e la sincronizzazione dei mangimi microscopio per compensare il sollevamento-mancata corrispondenza (effetto acquario) tra il piano focale e il piano di illuminazione. Az o indica lo spostamento della lente obiettivo e Az f lo spostamento del piano focale e il foglio leggero. L&#39;intarsio mostra sezioni di sferoidali contenenti capillari. A sinistra: capillare rettangolare con diametro interno di 600 micron (parete 120 micron). A destra: il programma di installazione utilizzato per la rotazione. Una capillare interno rotondo (diametro interno 400 micron, diametro esterno 550 micron) viene ruotato all&#39;interno del capillare rettangolare esterno. Lo spazio tra i due capillari è riempito con un liquido di immersione. 4 Misura in liquido dinamico Ambiente NOTA: Il precedente protocollo viene utilizzato per l&#39;incubazione statica prima di una misurazione in cui il sferoide cella è già stato incubato e poi tenuto in posto nel capillare per semplice gravità. Non vi è alcuna necessità di ulteriori fixatisu. Tuttavia, per misure in flusso multimediale in cui una incubazione dinamico e, quindi, un ambiente dinamico è auspicabile per misurare la cinetica di assorbimento, si può raggiungere questo sub-protocollo. I passaggi 4,5-4,9 sono fondamentali per evitare bolle d&#39;aria che raggiungono il campione. <ol><li> Riempire il capillare con FCS per 30 min a sostenere l&#39;adesione successiva cellulare di uno sferoide cella alla superficie del vetro interno. </li><li> Lasciate il rivestimento FCS rimanente nel capillare impoverito asciugare per almeno 12 ore. </li><li> Introdurre il sferoide cella alla capillare rivestito FCS come descritto al punto 3.2. </li><li> Lasciare il capillare in incubatore al 5% di CO 2 e 37 ° C per ulteriori 2-4 ore a causare adesione cellulare della sferoide. </li><li> Impostare la parte afflusso del sistema microfluidica (vedere Figura 2). Utilizzare una pompa peristaltica per riempire l&#39;afflusso del tubo (diametro interno: 0,89 millimetri) con mezzo di coltura contenente il colorante fluorescente, droga o l&#39;agente. </li><li> Connect parte afflusso del sistema microfluidica ad un gorgogliatore (vedi figura 2). </li><li> Innanzitutto serrare il capillare senza bolle al tubo afflusso e quindi serrare l&#39;altro lato del capillare al tubo di scarico. </li><li> Tune la temperatura del liquido della vasca dell&#39;acqua al valore desiderato (ad esempio, 37 ° C). </li><li> Regolare la pompa peristaltica alla velocità della pompa desiderata (ad esempio, portata: 9 ml / min; velocità pompa nel capillare: 25 mm / min). </li><li> Raccogliere il liquido pompato o in un recipiente (configurazione ad anello aperto), dargli da mangiare alla sua fonte (configurazione a circuito chiuso) o alimentarlo direttamente nel tubo della pompa peristaltica (configurazione a circuito chiuso a tenuta). </li></ol><img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51993/51993fig2highres.jpg" width="500" /> Figura 2 impostazione Microfluidic (anello aperto e stretto a circuito chiuso); intarsio: Illuminazione di un spheroid all&#39;interno di un micro-capillare mediante foglio leggero microscopia a fluorescenza basato accoppiato ad un microscopio invertito. 5. acquisizione dati e analisi <ol><li> Impostare la potenza del laser e il tempo di integrazione per l&#39;acquisizione delle immagini. </li><li> Fare attenzione che i parametri definiti al punto 5.1 non superano i valori di dose di luce circa 50-100 J / cm 2 per le cellule native o 10-20 J / cm 2 per le cellule incubate con un colorante fluorescente o transfettate con un plasmide codifica proteina fluorescente a evitare di fototossicità (per i dettagli vedi Rif. 12). </li><li> Impostare l&#39;incremento per la z-stack per Az = 5-10 micron, che è preferibile per l&#39;analisi dei dati 3-dimensionale, come lo spessore della lamiera della luce è di circa 10 micron. </li><li> Eseguire misurazioni di singole immagini o z-stack dalla variazione del piano focale all&#39;interno della sferoide cellulare. </li></ol>

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Opt. 18 (12), 126007 (2013).</li><li>Lippert, H., Wald, M., Radt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+arrangement+for+the+production+of+a+light+sheet.">Optical arrangement for the production of a light sheet.</a> U.S. Patent. , (2010).</li><li>Lorenzo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+cell+division+dynamics+monitoring+in+3D+large+spheroid+tumor+models+using+light+sheet+microscopy.">Live cell division dynamics monitoring in 3D large spheroid tumor models using light sheet microscopy.</a> Cell Division. 6 (22), 1-8 (2011).</li><li>Bruns, T., Schneckenburger, H., Schickinger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+holder+for+rotation+of+three-dimensional+specimens+in+microscopy.">Sample holder for rotation of three-dimensional specimens in microscopy.</a> European Patent Application. , (2013).</li></ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Il presente manoscritto descrive un foglio leggero o singola microscopia illuminazione piano (SPIM) dispositivo che è ottimizzato per sistemi cellulari 3-dimensionale, ad esempio, sferoidi tumorali multicellulari (MCTS). Tre applicazioni esemplari sono (1) l&#39;assorbimento di un farmaco citostatico e la sua conversione parziale di un prodotto di degradazione (il cui contributo all&#39;efficacia chemioterapici rimane ancora da valutare), (2) le misurazioni dello stato redox mediante l&#39;uso di un sensore di...

Oltre ai metodi ben consolidati (confocale o multi-fotone microscopia a scansione laser 1-4, strutturato illuminazione microscopia 5,6) foglio di luce o di solo piano di microscopia illuminazione (SPIM) ha dimostrato di essere un metodo valido di imaging 3D 7,8, 9. Di particolare interesse è la sua applicazione di colture cellulari 3-dimensionale, ad esempio, sferoidi tumorali multicellulari (MCTS), che vengono utilizzati sempre più per la ricerca di scoperta della droga 10,11. Inoltre, SPIM è un metodo preferenziale in cui anche in caso di esposizione a lungo termine o misurazioni ripetute dosi di scarsa luminosità sono tenuti a mantenere la vitalità del campione, dal momento che per la misura di ogni piano del campione solo questo piano è esposto alla luce. Questo è in contrasto con altre tecniche di microscopia, dove per la rilevazione di ciascun piano focale è illuminato l&#39;intero campione, in modo che dopo la registrazione di numerosi piani somme dose di luce e può danneggiare il campione 12. </p&gt; Microscopia foglio leggero o SPIM si basa sulla illuminazione del campione in direzione perpendicolare al percorso osservazione mediante l&#39;uso di una lente cilindrica o effettuando la scansione del fascio laser eccitante (per una rassegna vedi cod. 8). Questo spesso richiede camere di campioni speciali 13,14 o matrici, ad esempio, agarosio 7,15, realizzato in microscopi speciali ad alto costo. In alternativa a tali sistemi è stato sviluppato un semplice dispositivo di illuminazione comparabilmente per SPIM e adattato ad un microscopio invertito convenzionale 16 (vedi Figura 1). È costituita da un fascio laser espanso ad un diametro di 8 mm e focalizzato da una lente cilindrica (lunghezza focale: 50 mm, apertura numerica: 0.08) per un foglio leggero spessore di 6-10 micron su una profondità di campo di circa 100 micron . I campioni sono situati in un capillare rettangolare di 600-900 micron di diametro interno posizionato davanti al microscopio len obiettivos per il rilevamento della fluorescenza. Queste caratteristiche principali sono attualmente completate e ottimizzati mediante l&#39;uso di approcci micro-capillari avanzata per la tenuta e per ruotare i campioni, la regolazione sincrona del foglio leggero illuminante (in direzione assiale) e la lente obiettivo utilizzati per il rilevamento di fluorescenza (cammino ottico identico lunghezze di spostamento richiedono una correzione del trascinamento meccanico), e l&#39;adattamento di un sistema microfluidica per l&#39;applicazione di coloranti fluorescenti, agenti farmaceutici o farmaci, minimizzando così i quantitativi e le spese richieste.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="944">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:243px;">Name of the Material/Equipment</td>
			<td style="width:201px;">Company</td>
			<td style="width:124px;">&#160;Catalog Number</td>
			<td style="width:376px;">Comments/Description(optional)</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">microtiter plate</td>
			<td>Orange Scientific</td>
			<td>4430100</td>
			<td>for cell spheroid growing</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">agarose&#160;</td>
			<td>Carl Roth GmbH</td>
			<td>3810.1</td>
			<td>for cell spheroid growing</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">MCF-7 cell line</td>
			<td>CLS Cell Lines Service GmbH</td>
			<td>300273</td>
			<td>cell line</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">U251-MG-L106 cell line</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>cell line</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">DMEM</td>
			<td>Biochrom AG (Merck Millipore)</td>
			<td>FG0435</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">DMEM/Ham&#39;s F-12</td>
			<td>Biochrom AG (Merck Millipore)</td>
			<td>FG4815</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">FCS</td>
			<td>Biochrom AG (Merck Millipore)</td>
			<td>S0615</td>
			<td>cell culture supplement</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">penicillin/streptomycin</td>
			<td>Biochrom AG (Merck Millipore)</td>
			<td>A 2213</td>
			<td>antibiotics</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">hygromycin B</td>
			<td style="width:201px;">PAA Laboratories&#160;&#160;</td>
			<td>P02-015</td>
			<td>antibiotic</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">EBSS</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc.</td>
			<td>E3024</td>
			<td>cell culture supplement</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">doxorubicin</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc.</td>
			<td>D1515</td>
			<td>fluorescent dye (CAUTION: acute toxicity)</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">green cytotoxicity dye</td>
			<td>Promega GmbH</td>
			<td>G8742</td>
			<td>CellTox - fluorescent cytotoxicity dye</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">rotenone</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc.</td>
			<td>R8875</td>
			<td>cellular inhibitor (CAUTION: acute toxicity)</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">hydrogen peroxide (H2O2)</td>
			<td>Sigma-Aldrich Inc.</td>
			<td>95302</td>
			<td>reagent for oxidation (CAUTION: acute toxicity)</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">capillary</td>
			<td>VitroCom&#160;</td>
			<td>8260-050</td>
			<td>sample preparation</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">microscope</td>
			<td>Carl Zeiss Jena</td>
			<td>Axiovert 200M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">AxioCam MRc CCD-camera</td>
			<td>Carl Zeiss MicroImaging GmbH</td>
			<td>426508-9901-000</td>
			<td>CCD-camera</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">AxioVision data aquisition software</td>
			<td>Carl Zeiss MicroImaging GmbH</td>
			<td>version 4.8.2.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">laser diode</td>
			<td>Pico Quant GmbH</td>
			<td>LDH-P-C-470</td>
			<td>used with driver PDL800-B</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">perestaltic pump</td>
			<td>Ismatec Labortechnik</td>
			<td>MS-1 Reglo</td>
			<td>re-callibrated to reduce the minimum pump speed by 1/10&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">silicone tubes</td>
			<td>IDEX Health &#38; Science GmbH</td>
			<td>TYGON R3607</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

single plane illumination module and micro-capillary approach for a wide-field microscope

Un modulo per foglio leggero o solo piano di illuminazione microscopia (SPIM) è descritto, che si adatta facilmente ad un microscopio a largo campo invertito e ottimizzato per colture cellulari in 3 dimensioni, ad esempio, sferoidi tumorali multicellulari (MCTS). Il modulo SPIM eccitazione forme e devia la luce in modo tale che il campione è illuminato da un foglio leggero perpendicolare al percorso rilevamento del microscopio. Il sistema è caratterizzato dall&#39;uso di un capillare rettangolare per la tenuta (e in una versione avanzata anche da un approccio micro-capillare per ruotare) i campioni, regolando sincrono del foglio leggero illuminante e la lente obiettivo utilizzato per la rilevazione della fluorescenza e da adattamento di un sistema microfluidica per l&#39;applicazione di coloranti fluorescenti, agenti farmaceutici o farmaci in piccole quantità. Un protocollo per lavorare con questo sistema è dato, e alcuni dettagli tecnici sono riportati. Risultati rappresentativi includono (1) misure del pianoprendere di un farmaco citostatico (doxorubicina) e la sua conversione parziale di un prodotto di degradazione, (2) misure redox mediante l&#39;uso di un sensore di glutatione geneticamente codificato dopo l&#39;aggiunta di un agente ossidante, e (3) l&#39;inizio e l&#39;etichettatura di necrosi cellulare su inibizione di la catena respiratoria mitocondriale. Differenze e vantaggi del presente modulo SPIM in confronto con i sistemi esistenti sono discussi.

Esperimento 1: Cellulari sferoidi incubate con un farmaco chemioterapico Una scansione z-stack di una precedentemente incubate MCF-7 sferoidale celle (8 micron doxorubicina, 6 ore) è illustrato in Figura 3. Esso fornisce informazioni dettagliate circa l&#39;assorbimento cellulare e la distribuzione di doxorubicina 17 e del suo prodotto di degradazione 18,19. All&#39;interno della cella strato esterno della doxorubicina fluorescente ros...

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Single Plane Illumination Module and Micro-capillary Approach for a Wide-field Microscope

Un modulo per singolo piano di illuminazione microscopia (SPIM) è descritto, che si adatta facilmente ad un microscopio a largo campo invertito e ottimizzato per colture cellulari 3-dimensionale. Il campione si trova all&#39;interno di un capillare rettangolare, e tramite un sistema di microfluidica coloranti fluorescenti, agenti farmaceutici o farmaci può essere applicato in piccole quantità.

Singolo Aereo Illuminazione Module e approccio micro-capillare per un microscopio a largo campo

A module for light sheet or single plane illumination microscopy (SPIM) is described which is easily adapted to an inverted wide-field microscope and ...

single-plane-illumination-module-micro-capillary-approach-for-wide

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Engineering

9.6K Views.  Aalen University.  Un modulo per singolo piano di illuminazione microscopia (SPIM) è descritto, che si adatta facilmente ad un microscopio a largo campo invertito e ottimizzato per colture cellulari 3-dimensionale. Il campione si trova all'interno di un capillare rettangolare, e tramite un sistema di microfluidica coloranti fluorescenti, agenti farmaceutici o farmaci può essere applicato in piccole quantità. 