Questo protocollo è un grande modello animale per lo studio dell'adattamento e del fallimento del ventricolo destro. Questo modello è quindi vitale per lo sviluppo di terapie mirate al camper per il trattamento dell'ipertensione polmonare. Questo modello aumenta progressivamente il camper giusto dopo il carico che può essere utilizzato come strategia per titolare l'adattamento del camper.
Nessun precedente modello animale di grandi dimensioni ha questo controllo sul fenotipo RV. A dimostrare che la procedura chirurgica sarà il Dr. Matthew Bacchetta, il direttore del laboratorio e i colleghi chirurghi medici John Stokes, Kelly Wu e Yatrik Patel. Dimostrerò la procedura di bendaggio dell'arteria polmonare.
Dopo l'anestesia, iniziare radendo il campo chirurgico dal collo della pecora alla parte superiore dell'addome. Pulire il campo chirurgico da sporco e altri contaminanti usando sapone o una spazzola scrub. Preparare il collo nel torace con soluzione di clorexidina o betaina e drappeggiare il campo chirurgico in modo sterile.
Per ottenere un'esposizione in stile media eseguire una mini toracotomia risparmiatrice muscolare al quarto spazio intercostale sinistro con lunghezza dell'incisione inferiore a otto centimetri. Utilizzare un divaricatore Finochietto piccolo o medio per separare le costole in un divaricatore tufaceo per sedersi perpendicolarmente al Finochietto all'interno dello spazio intercostale che ritrarrà i tessuti molli all'interno dello spazio intercostale, migliorando l'esposizione senza ferire il nervo frenico incidendo l'interno della pericardia ad esso e creando un pozzo pericardico con suture di seta 2/0 per esporre l'arteria polmonare principale e il ventricolo destro. Identificare l'appendice atriale sinistra all'interno dell'esposizione come punto di riferimento per il livello della biforcazione dell'arteria polmonare sezionata attorno all'arteria polmonare principale e isolarla con un nastro ombelicale.
Eseguire la dissezione intrapericardica dell'arteria polmonare sinistra e circondare con un nastro ombelicale. Posizionare un occlusore vascolare in silicone per impieghi gravosi attorno all'arteria polmonare principale. Usando una sutura di seta 0 su un ago Keith.
Fissare l'estremità dell'occlusore vascolare insieme a un punto a U. Una volta fissato intorno all'arteria polmonare principale, l'occlusore scorre distalmente lungo l'arteria polmonare principale. Per stabilire una linea di pressione ventricolare destra, iniziare posizionando una sutura di purser in polipropilene non assorbibile monofilamento 5/0 con pegni che circondano la posizione selezionata e vedere un laccio vascolare.
Preparare la giusta linea di pressione ventricolare tagliando l'estremità maschile di un tubo di pressione sterile da 36 pollici con un angolo di 30 gradi per facilitare l'inserimento attraverso il miocardio. Quindi utilizzare una cravatta di seta 2/0 per contrassegnare la linea di pressione a una profondità ottimale per il posizionamento all'interno del ventricolo destro. Usando un pugno di biopsia, fare una piccola cardiotomia nel tratto di deflusso ventricolare destro o parete libera di RVOT all'interno della sutura della corda del portaborse precedentemente posizionata.
Controllare il sanguinamento con la pressione manuale o stringendo il laccio sulla sutura del portaborse. Inserire e fissare l'estremità tagliata del tubo di pressione nel RVOT. Legare il cordone della borsa, quindi fissare il cordone della borsa al tubo di pressione per fissare la linea di pressione.
Estendere il tubo RVOT collegando un tubo di pressione aggiuntivo alla linea di pressione RVOT. Monitorare per la misurazione della pressione ventricolare destra della linea di base. Sezionare attentamente intorno all'arteria polmonare sinistra Circondare l'arteria polmonare sinistra con nastro ombelicale legandolo per legarlo.
Portare la linea di pressione RVOT e il tubo dell'occlusore dell'arteria polmonare fuori dal torace uno spazio intercostale sotto l'incisione toracotomia. Per contrassegnare i siti per le porte interne formano due tasche subdurali lungo lo strato di fascia sul dorso sinistro della pecora il più lontano possibile verso la colonna vertebrale all'interno del campo sterile. Utilizzare un tubo toracico polare per tunnel la linea di pressione RVOT e il tubo dell'occlusore dall'incisione toracica ai siti della porta del dorso sinistro.
Fissare sia il tubo dell'occlusore che la linea di pressione ventricolare destra alle connessioni barbe della porta. Ancorare l'occlusore e il tubo di pressione attorno ai connettori della porta con fascette aggiuntive. Per evitare la migrazione dei porti ancorare i porti in tre posizioni attorno ai loro bordi alla fascia sottostante con suture in polipropilene 3/0.
Riapprossimare il derma e la pelle del tessuto sottocutaneo in strati con suture di poliglattina 910. Lavare la porta RVOT con cinque millilitri di eparina sodica. Chiudere la toracotomia con la figura di otto suture di poliglactina 910 numero due Quindi chiudere lo strato muscolare pettorale con un numero corrente 0 poliglactina 910.
Infine, chiudere il tessuto sottocutaneo in strati di suture di poliglactina 910 numero corrente 2/0 e pinzare la pelle. Preparare due trasduttori di pressione per il monitoraggio, le pressioni del bracciale ventricolare destro e dell'occlusore. Dopo che l'animale è stato leggermente trattenuto, inserire l'ago Huber dal trasduttore di pressione ventricolare destro alla porta ventricolare destra.
Attaccare una siringa da cinque millilitri al rubinetto di arresto a tre vie e tentare di aspirare il sangue nella siringa dalla porta ventricolare destra. Una volta stabilita la linea di pressione ventricolare destra, collegare l'ago Huber dal trasduttore del bracciale dell'arteria polmonare. Cattura i valori di partenza delle pressioni del bracciale dell'arteria ventricolare e polmonare, notando eventuali cambiamenti drastici rispetto alle letture precedenti.
Iniettare lentamente il 3% di soluzione salina ipertonica nella porta dell'occlusore prestando attenzione alle pressioni ventricolari e dei polsini. Una volta gonfiato il bracciale PA alla quantità desiderata, rimuovere l'ago Huber dalla porta del bracciale. Lavare la porta ventricolare destra con 10 millilitri di soluzione salina, quindi lavare la porta con cinque millilitri di 1000 unità per millilitro di eparina sodica.
Tra le 12 pecore. La pressione media del bracciale dell'arteria polmonare è aumentata con un aumento del tempo dalla prima alla nona settimana. Il banding più veloce dell'arteria polmonare porta ad un declino più rapido della saturazione di ossigeno venoso.
Al contrario, quelli che hanno sperimentato una strategia di banding dell'arteria polmonare più graduale mantengono un intervallo fisiologico di saturazione di ossigeno venoso tra il 70 e l'80% controllando la pressione del bracciale dell'arteria polmonare. Questo modello ha la capacità di controllare e titolare l'adattamento ventricolare e il fenotipo.
