Questo metodo prevede il posizionamento di un impianto di matrice di collagene come un'impalcatura nel fegato per promuovere la rigenerazione del fegato. Questo metodo di impianto ha aperto la porta a uno stratega che esplora il ripristino della forma e del palloncino dei tessuti resecati, riducendo così l'anestesia, la durata chirurgica e il tempo di recupero. Questo metodo può essere utilizzato per promuovere la rigenerazione che coinvolge modelli di fibrosi epatica, così come altre specie di mammiferi.
Questo metodo si basa sull'ingegneria tissutale e sulla medicina rigenerativa per promuovere il ripristino del tessuto danneggiato. Iniziare disinfettando il tavolo di lavoro dell'area chirurgica, il microscopio microchirurgico e il sedile con una soluzione di clorexidina al 2%, quindi idratare l'impalcatura della matrice di collagene ottenuta da un condilo bovino in soluzione salina sterile per 20 minuti. Successivamente, usando sapone chirurgico e una lama a doppio taglio, radere la pelle addominale di un ratto Wistar maschio anestetizzato di sei-otto settimane, quindi disinfettare la pelle tre volte usando una soluzione di iodio povidone al 10%.
Posizionare l'animale su una piastra calda nella posizione dorsale del decubito con il collo iperesteso per mantenere una via aerea permeabile. Valutare la profondità dell'anestesia attraverso il pattern respiratorio e la perdita del riflesso di astinenza negli arti. Quindi posizionare un drappo chirurgico monouso intorno alla pelle rasata e utilizzando il processo xifoide come punto di riferimento, eseguire un'incisione di 2,5 centimetri sulla linea alpis con pinzede di dissezione, avendo cura di evitare il vaso sanguigno della parete addominale per prevenire il sanguinamento.
Dopo aver posizionato il divaricatore addominale, osservare la cavità addominale. Usando la pinica di dissezione, estrarre il lobo del fegato sinistro e posizionarlo sulla piastra metallica. Utilizzando un modello metallico triangolare sterile uno per uno per uno, eseguire un'epatectomia.
Per prevenire il sanguinamento del fegato, mantenere la compressione chirurgica con un tampone sul bordo del fegato per cinque minuti. Successivamente, utilizzando suture di polipropilene non assorbibili 7-O, impiantare l'impalcatura della matrice di collagene idratata nel sito di epatectomia con quattro punti tra il tessuto epatico e l'impalcatura per prevenire lo spostamento del biomateriale. Riportare il fegato nella cavità addominale e suturare la parete addominale e la pelle con una sutura di nylon 3-O.
Pulire l'incisione chirurgica due volte con una spugna chirurgica imbevuta di iodio e monitorare i segni vitali dell'animale. Quindi posizionare l'animale in posizione di decubito laterale. Dopo aver somministrato un analgesico, posizionare l'animale in una singola scatola di policarbonato con lettiera per animali da laboratorio in un'area priva di rumore con controllo della temperatura.
Osservare il recupero dall'anestesia e monitorare il consumo di acqua e cibo per due ore. Non c'era differenza nella funzionalità epatica tra il gruppo SHAM e i gruppi sperimentali con e senza l'impalcatura della matrice di collagene a tre, 14 e 21 giorni, indicando che l'impalcatura della matrice di collagene non interrompe la funzionalità epatica. L'analisi istologica del terzo giorno mostra che la presenza dell'impalcatura della matrice di collagene nel fegato non ha promosso una reazione da corpo estraneo e si osserva la cospicua presenza di tessuto connettivo lassista.
Nei giorni 14 e 21, il tessuto connettivo lassista è più abbondante con le trabecole dell'impalcatura della matrice di collagene circondate da epatociti che suggeriscono che gli epatociti sono migrati verso l'impalcatura della matrice di collagene. Aree di epatociti irrigati da un vaso possono essere visti e gli epatociti che aderiscono alle trabecole dello scaffold della matrice di collagene sono talvolta circondati da tessuto connettivo lassista. Durante l'esecuzione dell'epatectomia, utilizzare la tecnica asettica per evitare l'infezione e applicare la compressione in seguito per prevenire il sanguinamento dal fegato.
Inoltre, utilizzare suture 7-O per l'impianto di scaffold della matrice di collagene per evitare strappi. Dopo l'impianto dell'impalcatura della matrice di collagene in un modello animale fibrotico, è possibile valutare i vantaggi dell'impianto sinogenico per la rigenerazione del fegato. L'uso di scaffold a matrice di collagene per sostituire la massa estubica del fegato non è stato valutato fino ad ora.
Questi materiali genogenici aprono la strada come un'altra opzione terapeutica nel campo delle malattie croniche del fegato.
