La cardiopatia da ischemia è una delle principali cause di morte in tutto il mondo. Questa procedura può essere eseguita per indurre lesioni da ischemia-riperfusione nel cuore. Questo protocollo serve a legare il LAD in modo accurato, sicuro e coerente.
Per preparare batuffoli di cotone bagnati salini, pizzicare una piccola porzione di cotone sterile e arrotolarla ripetutamente per formare una palla. Immergere i batuffoli di cotone in soluzione salina sterile allo 0,9% e spremere la soluzione salina in eccesso. Conservare i batuffoli di cotone in una scatola pulita sterilizzata con etanolo al 75%.
Per preparare ganci di tenuta, sterilizzare clip e elastici con etanolo al 75%. Per preparare un anello di legatura, posizionare il centro di un punto di seta 7-0 nell'occhio a molla di tre dimensioni a semicerchio di un ago chirurgico affusolato non avvolto. Per preparare un controller ad anello rullante, tagliare un tubo di polietilene 10 da cinque millimetri usando le forbici.
Successivamente, per l'esperimento, anestetizzare un ratto maschio di Sprague Dawley di otto settimane e controllare i riflessi pizzicando la coda e le zampe posteriori. Quindi aprire il tessuto tra i due anelli di cartilagine sotto la glottide usando le forbici e inserire un tubo di polietilene 50 di tre centimetri per fungere da tubo endotracheale. Collegare il tubo endotracheale a un ventilatore.
Tocca il petto e trova il manubrio e l'angolo sternale. Quindi identificare la costola laterale sinistra che si collega con l'angolo sternale. Identificare lo spazio intercostale sotto la costola A.Utilizzare una pinza a punta fine per sollevare delicatamente la pelle vicino allo spazio intercostale.
Quindi utilizzare le forbici per creare un'incisione obliqua di un centimetro lungo le linee di tensione della pelle dal punto di circa cinque millimetri a sinistra del corpo sternale. Separare la pelle e gli strati muscolari dall'incisione usando le forbici. Quindi agganciare gli strati muscolari all'esterno della parete toracica anteriore sinistra verso il basso con clip piegate per esporre le costole sottostanti.
Dopo aver identificato la costola B sotto la costola A, tagliare la costola B con una forbice smussata dal centro della cartilagine della costola. Toccare delicatamente e comprimere la ferita con un batuffolo di cotone bagnato salino per diversi secondi se si verifica sanguinamento. Quindi, agganciare le quattro clip piegate al muscolo intercostale e alle costole per allargare delicatamente la parete toracica in quattro direzioni e creare una finestra chirurgica rettangolare per aprire attentamente il torace dal taglio della costola B.Hook delicatamente contro il polmone sinistro e i tessuti adiacenti che coprono il pericardio con un'altra clip piegata per prevenire danni accidentali ai tessuti durante la procedura.
Esporre il cuore rimuovendo il pericardio sottile con una pinza. Quindi identificare il primo ramo dell'arteria coronaria principale sinistra, o LMCA, tra l'arteria polmonare e il padiglione auricolare sinistro. Utilizzando un ago chirurgico, creare un anello di legatura aperto inserendo e passando il punto di seta sotto il LAD in una posizione immediatamente distale al primo ramo del LMCA nella direzione da sinistra verso il lato destro del LAD per evitare di perforare accidentalmente il padiglione auricolare sinistro.
Se il LAD è invisibile a causa del liquido o del sangue che copre la superficie del cuore, tamponare delicatamente la superficie del cuore per visualizzare le arterie coronarie. Inserire le due estremità della sutura di seta su un lato dell'anello aperto nel cerchio dell'altro lato per formare un anello di rullante. Quindi inserire le due estremità della sutura di seta dell'anello del rullante nel controller del rullante preparato prima di chiudere l'anello.
Far scorrere il controller del rullante lungo la sutura della seta mentre si allunga delicatamente la seta per chiudere l'anello del rullante. Cessare il flusso coronarico del LAD per indurre ischemia miocardica per un'ora. Una volta che il cappio è stato legato saldamente, tenere la seta per fissare la posizione del controller del loop del rullante con una pinza Kelly.
Posizionare l'altra estremità della pinza Kelly sul tavolo chirurgico. Coprire la finestra chirurgica con batuffoli di cotone bagnati salini durante la legatura LAD. Aprire la pinza Kelly, quindi rilasciare il controller del rullante per la riperfusione del flusso coronarico per due ore.
Viene mostrata la convalida della qualità della legatura LAD con il blu Evans. Il miocardio con perfusione coronarica era colorato di blu rispetto a una regione non perfusa, che rimaneva rossa. Una bassa variazione nell'area a rischio, o percentuale di AAA tra gli animali in studio, ha indicato la posizione accurata della legatura LAD.
Inoltre, la dimensione dell'infarto è stata stimata come il rapporto tra l'area dell'infarto e l'AAR nei gruppi di controllo e trattati. La percentuale di dimensione dell'infarto del gruppo di trattamento è inferiore rispetto al gruppo di legatura LAD controllata. Questa tecnica apre la strada ai ricercatori per esplorare nuovi approcci terapeutici contro la cardiopatia ischemica.
