Studio della patogenesi della mutazione MYH7 Gly823Glu nella cardiomiopatia ipertrofica familiare utilizzando un modello murino

Questo protocollo è significativo in quanto può fornire una dimostrazione di ultrasuoni in piccoli animali. Questa tecnica può fornire informazioni sulla scoperta di geni patogeni nella cardiomiopatia ereditaria. Fissare i topi knockin orizzontalmente sulla piattaforma, quindi inclinare la piattaforma di 30 gradi rispetto al mouse knockin.

Rimuovere i peli sulla parete toracica anteriore dei topi knockin usando una crema depilatoria posizionare la sonda verticalmente con la protuberanza rivolta verso la testa dell'animale. Quindi ruotare la sonda in senso antiorario di circa 45 gradi nella vista dell'asse lungo parasternale. Ruotare la sonda di 90 gradi in senso orario per ottenere la vista dell'asse corto parasternale.

Dopo aver ruotato la sonda, regolate lo spostamento dell'asse Y per ottenere la fetta corretta. Osservare l'immagine dell'asse lungo del cuore e quindi selezionare i dati di misurazione della modalità M. Acquisire dati ecografici da viste parasternali ad asse lungo di topi e misurare la frequenza cardiaca, la frazione di eiezione ventricolare sinistra, la gittata cardiaca, la dimensione ventricolare sinistra e diastolica, la dimensione ventricolare sinistra e sistolica.

Parete posteriore ventricolare sinistra e setto ventricolare. Sono stati ottenuti i pedigree familiari della cardiomiopatia ipertrofica e a tutti i membri della famiglia documentati è stata diagnosticata l'arruolamento della cardiomiopatia ipertrofica. Il sequenziamento con metodo Sanger ha confermato la stessa variante M Y H 7 P G 8 23 E in tutti i pazienti, ma non negli individui sani nelle famiglie.

E 174 controlli, l'eterozigote M Y H 7 P G 8 23 E completamente co-segregato in questa famiglia. Il residuo di glicina al Codone 8 23 nella regione del dominio del collo di M Y H 7 era altamente conservato in tutte le sequenze di miocina vertebrata disponibili. Secondo gli standard e le linee guida A C M G, la variante M Y H 7 P G 8 23 E è stata prevista come una variante patogena.

I topi knockin hanno sviluppato ipertrofia cardiaca dipendente dall'età dopo la nascita. L'ecocardiografia ha rivelato che il setto interventricolare e la parete posteriore ventricolare sinistra si sono sviluppati con un aumento della frequenza cardiaca nei topi knockin. Confermato anche dall'analisi istologica.

I dati ecografici dei virus possono essere ottenuti ruotando la sonda a diverse angolazioni su diverse sezioni del termine del mouse.