Utilizzando questo protocollo del modello di ratto di silicosi, è possibile imitare da vicino il processo patologico della silicosi umana. Questa tecnica è facile da eseguire in modo economico con una buona ripetibilità e non ci sono traumi per l'animale. Il modello di ratto stabilito in questo studio contribuisce all'identificazione precoce, alla diagnosi accurata e al trattamento della silicosi.
Per iniziare, mettere le particelle di silice in una malta di agata e macinare per 1,5 ore prima di ogni esposizione animale. Quindi pesare 30 grammi di silice macinata in una bilancia elettronica e metterla in un contenitore di vetro. Cuocere a 180 gradi Celsius per sei ore in un essiccatore elettrico a soffiaggio d'aria per eliminare gli agenti patogeni dalla superficie delle particelle di silice.
Configurare il regolatore dell'esposizione alla silice collegando i sistemi di iniezione e generatore. Quindi posizionare la silice pesata nel generatore e verificare che il collegamento della tubazione sia corretto. Il cavo di alimentazione è collegato e l'alimentazione è normale.
Dopo essersi assicurati che le valvole della camera di inalazione siano chiuse, accendere il dispositivo di scarico dei gas di scarico e la fonte d'aria per confermare che l'interno dell'armadio di schermatura sia in uno stato di pressione negativa. Controllare la concentrazione di silice nell'armadio con un campionatore atmosferico calibrato seguendo le istruzioni del produttore. Per la determinazione gravimetrica, utilizzare una bilancia analitica digitale a piatto singolo e pesare la silice.
Metti il ratto nella gabbia, quindi metti 10 ratti nella camera di inalazione e chiudi lo scomparto di inalazione e le porte dell'armadio schermate. Quindi procedere con l'esperimento di inalazione di silice come previsto. Al termine dell'esperimento, chiudere la valvola di controllo del flusso di gas miscelato e aprire la valvola di flusso del gas puro per iniettare il gas nella camera di inalazione.
Dopo 20 minuti, chiudere la valvola del flusso d'aria pura. Aprire lo sportello ed estrarre la gabbia dalla camera di inalazione. Quindi togli i ratti dalla gabbia e riportali nella stanza priva di agenti patogeni.
Quindi, rimuovere la rastrelliera per topi e i componenti del tubo di derivazione in sequenza e posizionarli nel lavandino per la pulizia. Dopo il risciacquo, chiudere la valvola di pulizia automatica e aprire il portello. Quindi pulire la parete interna con un panno pulito per asciugare il serbatoio.
Infine, disinfettare il serbatoio con etanolo al 75% e chiudere la saracinesca di scarico. Quindi, aprire rapidamente la porta della cabina di inalazione per far evaporare l'umidità in modo che l'interno della cabina di inalazione rimanga asciutto. I ratti esposti alla silice per due e 24 settimane hanno rivelato un ispessimento della parete alveolare dopo due settimane di inalazione di silice, mentre la struttura alveolare è scomparsa e dopo 24 settimane si sono formate ampie aree di fibrosi.
Inoltre, le particelle di silice sono state viste intrappolate nei macrofagi dei lobi polmonari osservati attraverso un microscopio a luce polarizzata. La colorazione immunoistochimica di CD 68 nel polmone ha rivelato l'evoluzione dinamica dei noduli silicotici da due a 24 settimane. Con l'aumentare del tempo di esposizione, anche l'area dei noduli aumentava gradualmente e i noduli silicotici adiacenti si fondevano in noduli più grandi.
Lesioni fibrotiche multiple di varie dimensioni si sono formate nei polmoni dei ratti esposti alla silice rispetto ai ratti di controllo. Tuttavia, non sono state riscontrate differenze significative nei reni, nel fegato e nella milza tra i ratti con silicosi e il controllo. Ma è interessante notare che la perdita ossea è stata osservata nei ratti con silicosi.
La cosa più importante in questo protocollo è assicurarsi che la silice sia ben macinata e che la concentrazione sia costante prima di iniziare la procedura.
