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要約

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プロトコル

  1. テールピース(3mm)及びマークの耳をカット。
  2. 720 メートルリットルSTEおよび30 M LプロテイナーゼK(10 mg / mlストック)を追加します。
  3. 55℃でインキュベート加熱ブロックとボルテックス10秒最高速度で3時間毎正時C。
  4. で5分間70℃プロテイナーゼKを不活性化する。
  5. 氷上で5分間急冷する。
  6. フルスピードで10分間尾DNAを遠心します。
  7. 720 メートルリットルイソプロパノールを含む新しいチューブにデカント。  
  8. チューブを反転させたり、ボルテックスでDNAを沈殿させる。
  9. フルスピードで5分間、DNAをスピンダウン。 上清を取り除く。
  10. 70%エタノールでペレットを洗浄します。
  11. フルスピードでゲノムDNA 5分間スピンダウン。 上清を取り除く。
  12. DNAは1〜2分間乾燥することができます。
  13. ペレットのサイズに応じて100〜200 メートルのlで再懸濁し、DNA。
  14. 55位のチューブで1時間DNAの溶解を容易にする。  

資料

NameCompanyCatalog NumberComments
STEBuffer100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
TEBuffer100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl

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